反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株基质金属蛋白酶－2的抑制作用

目的 观察反义RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响.方法 将反义RhoC真核表达载体转染人胆管癌细胞株QBC939,逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测MMP-2在QBC939细胞、转染空载体的QBC939细胞(QBC939-V)、转染反义RhoC的QBC939细胞(QBC939-AS)的mRNA和蛋白相对表达量.结果 QBC939细胞MMP－2 mRNA吸光度相对值为0.588±0.074,QBC939-V细胞为0.629±0.061,两者差异无统计学意义(P＞0.05),QBC939-AS细胞MMP-2 mRNA吸光度相对值为0.286±0.097;与QBC939及QBC939－V比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 反义RhoC基因能够抑制QBC939细胞株的MMP-2表达.     

多种油脂肪乳在胃肠外科重症患者术后肠外营养中的应用

目的探讨术后应用多种油脂肪乳（SMOF）的肠外营养治疗对胃肠外科重症患者预后的影响。方法将72例胃肠外科重
症患者按照前瞻、随机、对照原则分为SMOF组及对照组,分别给予含SMOF及中、长链脂肪乳的等热量的肠外营养支持,于使
用前及使用后第4、9天分别检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）、C反应蛋白（CRP）、白介素6（IL-6）
及外周血内毒素水平,并统计两组患者的重症监护病房（ICU）住院时间、抗菌素使用时间及术后并发症发生率。计量数据采用
独立样本t检验,计数数据采用χ2检验。结果术后第4天,SMOF组CRP、TL-6低于对照组（P<0.05）;术后第9天,SMOF组ALT、
TBIL、CRP、TL-6低于对照组（P<0.05）,术后两组患者ALB及外周血内毒素水平无显著性差异。术后ICU入住时间、抗菌素使
用时间,SMOF组低于对照组（P<0.05）,术后感染性并发症,SMOF组低于对照组,但二者之间无统计学意义（χ2=1.047,P>
0.05）。结论胃肠外科重症患者术后应用添加SMOF的肠外营养能够有效减少炎症介质释放、保护重要脏器功能,减少术后并
发症,改善患者的预后。
     

伊立替康联合替加氟治疗晚期胃癌的临床观察

目的探讨伊立替康联合替加氟一线治疗晚期胃癌的疗效及不良反应。方法伊立替康180mg/m^2,静脉滴注,第1天;替加氟15mg/kg,静脉滴注,第1～5天,21天为1个周期。结果46例患者能评价疗效,无完全缓解病例,部分缓解21例,疾病稳定12例,疾病进展13例。总有效率为45.6%,临床获益率为71.7%。结论伊立替康联合替加氟方案治疗晚期胃癌临床获益率高,耐受性良好,是一种较为安全有效的联合方案,值得推广应用。     

γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰基-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯与氯喹的交叉对话作用对胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡的影响

目的观察胃癌MKN-45细胞中Notch信号通路抑制剂3,5-二氟苯乙酰基-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)对自噬的影响及自噬抑制剂氯喹(CQ)对Notch信号通道的影响,探讨DAPT联合CQ对MKN-45细胞增殖、凋亡的影响。方法将MKN-45细胞分成4个组,对照组(Control组,RPMI 1640完全培养基培养);氯喹组(CQ组,含40μmol/L氯喹的RPMI 1640完全培养基培养);γ-分泌酶抑制剂组(DAPT组,含80μmol/L DAPT的RPMI 1640完全培养基培养);联合用药组(Comb组,含40μmol/L CQ和80μmol/L DAPT的RPMI 1640完全培养基培养)。应用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡;应用透射电镜、蛋白质印迹法(Western blot)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞自噬水平;应用Western blot检测Notch信号通路表达。两组间比较采用独立样本t检验。结果MTT结果显示,Comb组[(55.09±1.38)%]细胞增殖能力明显低于DAPT组[(78.83±1.74)%]和CQ组[(64.82±1.89)%],差异均有统计学意义(t=18.514、7.185,P<0.01)。流式细胞结果显示,Comb组[(43.43±2.30)%]凋亡率明显高于DAPT组[(27.26±3.02)%]和CQ组[(22.16±2.24)%],差异均有统计学意义(t=7.339、11.415,P<0.01)。Western blot、RT-PCR结果显示,DAPT组自噬相关的微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、苄氯素1(Beclin1)、自噬相关基因7(ATG7)信使核糖核酸(mRNA)、自噬相关基因12(ATG12)mRNA的相对表达量(0.587±0.030、1.503±0.066、1.797±0.110、2.433±0.111)明显高于Control组(0.333±0.002、1.137±0.068、1.000±0.000、1.000±0.000),差异均有统计学意义(t=14.893、6.695、12.527、22.446,P<0.01)。CQ组Notch1蛋白的相对表达量(0.932±0.061)明显高于Control组(0.477±0.031),差异有统计学意义(t=11.590,P<0.01)。结论胃癌MKN-45细胞中自噬与Notch信号通路存在交叉对话,两者相互调节,DAPT联合CQ可以使胃癌MKN-45细胞增殖能力下降、凋亡率提高。     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌过程中脾脏巨噬细胞的变化

目的 观察在二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌过程中大鼠脾脏巨噬细胞(Mω)结构与功能的变化.方法 将SD大鼠50只随机分为正常对照组10只和实验组40只.实验组按DEN腹腔注射加慢性间断自由饮用DEN水溶液的方法制备肝癌肺转移模型,分别在造模的第8、13、16周随机处死大鼠.根据病理结果依次归为为肝硬化组(10只)、肝癌未转移组(10只)、肝癌转移组(10只).应用透射电镜观察各组大鼠脾脏Mω超微结构.贴壁法分离纯化Mω,应用Vybant吞噬检测试剂盒、噻唑蓝(MTY)比色法、Rat肿瘤坏死因子(TNF)-α Elispot试剂盒、DQTM ovalbumin试剂盒检测脾脏巨噬细胞活力和吞噬、代谢、分泌及抗原旱递功能.结果 Mω超微结构:肝硬化组和肝癌未转移组Mω较正常组Mω表面突起增多,细胞器增多;肝癌转移组Mω表面突起减少,细胞器较少.Mω吞噬指数:与正常对照组(75.6±1.7)比较,肝硬化组(84.7±1.9)升高(P<0.05);肝癌未转移组(89.5±3.1)显著升高(P<0.01);肝癌转移组(36.0±2.6)显著降低(P<0.01).Mω代谢率:与正常对照组(1.48±0.17)比较,肝硬化组和肝癌未转移组代谢率(1.53±0.15、1.56±0.14)增高(P<0.05),肝癌转移组(1.12±0.29)代谢率降低(P<0.05).TNF-α分泌值与正常对照组(626.6±24.6)比较,肝硬化组和肝癌末转移组(分别为741.0 4±52.9、1126.2±174.5)升高(P<0.05),肝癌未转移组增高更为显著(P<0.01),肝癌转移组(313.8±50.8)显著降低(P<0.01).抗原呈递阳性细胞比率(%):与正常组(16.45±1.86)比较,肝硬化组和肝癌未转移组(分别为24.03±1.87、27.95±2.63)显著升高(P<0.01);肝癌转移组(10.46±2.16)显著降低(P<0.01).结论 在肝硬化及肝癌早期,脾脏Mω吞噬、代谢、分泌、抗原呈递功能普遍增强;在肝癌晚期,脾脏Mω吞噬、代谢、分泌、抗原呈递功能普遍减弱.说明脾脏抗肿瘤作用呈双向性和时相性.     

DEN诱发大鼠肝癌过程中脾脏巨噬细胞变化的研究

目的 探讨在二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠肝癌过程中大鼠脾脏巨噬细胞（MΦ）结构与功能的变化。方法 SD大鼠50只随机分为正常对照组10只和实验组40只。实验组按DEN腹腔注射加慢性间断自由饮用DEN水溶液的方法制备肝癌肺转移模型,分别在造模的第8、13、16周随机处死大鼠,根据病理结果依次归为为肝硬化组（10只）、肝癌未转移组（10只）、肝癌转移组（10只）。应用透射电镜观察各组大鼠脾脏MΦ超微结构。贴壁法分离纯化MΦ,应用Vybant Phagocytosis Assay试剂盒、MTT法、Rat TNF-αElispot试剂盒、DQTM ovalbuin试剂盒检测脾脏巨噬细胞吞噬、代谢、分泌及抗原呈递功能。结果 MΦ超微结构：肝硬化组和肝癌未转移组MΦ较正常组MΦ表面突起增多,细胞器增多;肝癌转移组MΦ表面突起减少,细胞器较少。MΦ吞噬指数：与正常对照组（75.6±1.7）相比,肝硬化组（84.7±1.9）升高（P＜0.05）;肝癌未转移组（89.5±3.1）显著升高（P＜0.01）;肝癌转移组（36.0±2.6）显著降低（P＜0.01）。MΦ代谢率：与正常对照组（1.41±0.07）相比,肝硬化组和肝癌未转移组代谢率（分别为1.55±0.08,1.60±0.212）增高（P＜0.05）,肝癌转移组（1.25±0.12）代谢率降低（P＜0.05）。TNF-α分泌值：与正常对照组（626.6±24.6）相比,肝硬化组和肝癌未转移组（分别为741±52.9, 1126.2±174.5）升高（P＜0.05）,肝癌未转移组增高更为显著（P＜0.01）,肝癌转移组（313.8±50.8）显著降低（P＜0.01）。抗原呈递阳性细胞比率（%）：与正常组（16.45±1.86）相比,肝硬化组和肝癌未转移组（分别为24.03±1.87、27.95±2.63）显著升高（P＜0.01）;肝癌转移组（10.46±2.16）显著降低（P＜0.01）。结论　在肝硬化及肝癌早期,脾脏MΦ吞噬、代谢、分泌、抗原呈递功能普遍增强;在肝癌晚期,脾脏MΦ吞噬、代谢、分泌、抗原呈递功能普遍减弱。这一结果弥补了脾脏抗肿瘤作用资料的不足,进一步支持脾脏抗肿瘤作用呈双向性和时相性的观点。     

帕洛诺司琼在胃肠癌化疗过程中止吐疗效的观察

目的观察帕洛诺司琼在胃肠癌化疗过程中止吐疗效。方法 120例胃肠癌化疗患者随机分为帕洛诺司琼组、格拉司琼组及恩丹西酮组,每组40例,均于化疗前30 min使用止吐药物,观察比较各组急性呕吐(d1)及迟发性呕吐(d2~d5)的发生情况。结果对于急性呕吐,帕洛诺司琼组的有效率与其他2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。对于迟发性呕吐帕洛诺司琼组的有效率明显高于其他2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论帕洛诺司琼治疗胃肠癌化疗过程中的呕吐起效快,持续时间长,尤其对迟发性呕吐的治疗效果较好。     

巴弗洛霉素A1抑制胃癌MGC-803细胞增殖及增强奥沙利铂的敏感性

目的探讨巴弗洛霉素A1对抑制胃癌细胞自噬、增殖、侵袭、凋亡和奥沙利铂敏感性的影响。方法将胃癌MGC-803细胞
分为空白对照组（Control组）、巴弗洛霉素A1组（BAF组）、奥沙利铂组（OXA组）及巴弗洛霉素A1+奥沙利铂（O+B组）。分别采
用MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖活力;Elisa法检测细胞核小体表达水平;Transwell法检测细胞运动能力;扫描电
镜、免疫组化及Western blot检测自噬水平;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达情况。结果BAF组与Control组相
比自噬水平显著降低,BAF组增殖活力、迁移细胞数及侵袭细胞数显著低于Control组（P=0.000）,核小体和Bax表达显著高于
Control组（P=0.000）,Bcl-2表达低于Control组（P=0.046）。O+B组与OXA组相比自噬水平显著降低,此时O+B组细胞增殖活
力、迁移细胞数及侵袭细胞数显著低于OXA组（P=0.000）,凋亡率显著高于OXA组（P=0.000）,Bcl-2相对表达量显著低于OXA
组（P=0.001）,Bax相对表达量显著高于OXA组（P=0.000）。结论巴弗洛霉素A1通过抑制自噬能够显著抑制胃癌MGC-803细
胞的增殖和运动能力,促进凋亡,而且能增强奥沙利铂的药物敏感性。
     

胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达及其临床意义

目的检测胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达,分析其临床意义,并初步探讨其可能的作用机制。方法应用免疫组化SP法检测90例胃癌和30例癌旁正常胃黏膜石蜡组织中LIN28B和c-myc蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR方法和Western blotting法检测23例新鲜胃癌组织及相应癌旁正常组织中LIN28B和c-myc mRNA及蛋白的表达量。结果胃癌组织中LIN28B mRNA(△Ct:6.33±2.54)及蛋白(0.601±0.22)的表达水平显著高于癌旁正常组织(△Ct:1.05±0.64,0.124±0.088,P0.05);LIN28B在胃癌组织中表达阳性率(76.7%,69/90)较癌旁正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(66.7%,20/30)高,差异有统计学意义(H=4.195,P0.05);c-myc在胃癌组织中表达阳性率(81.1%,73/90)较正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(60.0%,18/30)高,差异有统计学意义(H=3.887,P0.05);LIN28B蛋白表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度、临床分期有相关性(P0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、部位无相关性(P0.05);LIN28B与c-myc在胃癌组织中的表达有显著相关性(r=0.252,P0.05)。结论LIN28B和c-myc基因的表达及相互作用与胃癌的发生、发展及生物学行为密切相关,对判断预后有参考作用,其机制可能与胃癌干细胞及LIN28B/let-7/c-myc信号环路有关。