探索建立医学检验专业实验教学模式

重庆医科大学医学检验系 1 984年在国内首批成立。创始之初 ,由于国内无既定的模式 ,因此探索建立一套适合医学检验学生的理论和实验教学模式 ,培养理论水平丰厚、实验操作技能扎实、学生能力素质较高的毕业生一直是我们教学改革的目标。建系 1 7年来 ,经过长期的探索总结 ,我系在实验教学中形成了贯穿学生科研能力训练 ,重视学生实践能力和创造性思维培养 ,紧密结合临床的实验教学模式。该教学模式的实施 ,有效地提高了教学质量 ,强化培养了学生动手能力和思维能力 ,成效显著 ,受到学生的一致好评。总结长期实验教学的经验 ,我们重点抓了以…     

苦参碱诱导K562细胞分化的差异表达基因的研究

目的研究苦参碱诱导人红白血病K562细胞分化的分子机制。方法应用改良的mRNA差异显示逆转技术(DDRT—PCR)筛选苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因；对差异cDNA片段纯化、克隆、测序及Blast分析，采用逆转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)方法验证。进一步对其中的未知差异cDNA片段采用Northern杂交确定其转录本的大小及组织分布特性，进而充分利用多种生物信息学资源对差异片段进行结构和功能的预测。结果苦参碱诱导K562细胞前后存在明显的基因表达差异，筛选获得了17条差异条带。其中4个差异显著片段经RT—PCR验证后，在Genbank中分析，有3个为已知基因，1个可能为未知基因，暂命名为KH基因。Northern杂交证实KH基因转录本的大小为1．35kb，分布于正常人体脑组织中。结论苦参碱具有诱导K562细胞基因表达谱发生变化的作用，由苦参碱诱导的K562细胞分化是一个多基因参与的过程；KH基因可能是苦参碱作用K562细胞后表达量发生改变的未知基因，可能与细胞癌变有关。     

医学检验专业本科人才培养的探索

本文概括了重庆医科大学高等检验医学教育从创建到发展21年来,在学科建设、人才培养和优化课程体系等方面的探索和改革实践。初步形成了适应我国检验工作岗位的医学检验专业本科人才培养体系。     

唐氏综合征胎儿全基因组miRNA表达谱特征及其染色体分布

目的研究唐氏综合征(DS)胎儿全基因组miRNA表达谱及其编码基因的染色体分布特征。方法采用Illumina深度测序技术对6例DS胎儿(DS组)和6例正常胎儿脐带血(对照组)单个核细胞小RNA测序比对分析,确定DS全基因组miRNA表达谱及其编码基因的染色体分布特征。结果两组共检测到395种miRNA,编码于316个miRNA基因。其中149种miRNA在两组中的表达具有显著性差异(DS组中6种上调,143种下调),有51种miRNA特异性表达于对照组。21号染色体编码的14个miRNA基因在DS组中有1个(miR-802)高表达,4个(let-7c、miR-99a、miR-125b和miR-155)低表达,余下9个在两组样本中均未表达。两组样本miRNA基因表达的染色体分布趋于一致,但miRNA基因表达丰度的分布却不尽相同:DS组主要分布于8、16、17和21号染色体,对照组主要分布于3、8、14、16、17和22号染色体。结论 DS胎儿脐带血单个核细胞具有其特定的miRNA表达谱和染色体分布特征,表达丰度差异分布的染色体编码miRNA可能在DS各临床性状的形成过程中具有重要作用。     

迎接挑战开创医学检验教育的新局面

重庆医科大学医学检验系创建于 1983年。 2 0年来 ,中国临床检验诊断学学科领域更新 ,发展迅速 ,成绩显著。随着高新科技的迅猛发展 ,并与临床医学的相互渗透结合 ,临床实验室的工作内容、方式及其在临床诊疗、科研中的地位和作用发生了深刻的变化 ,对人才素质的要求也发生了历史性的重大变革。就临床检验诊断学学科内涵的变革、人才队伍的成长、学术领域的扩大和活跃等方面而言 ,我系2 0年的创建发展历程 ,可以视为我国临床检验诊断学科发展的一个缩影。1　建系 2 0年检验医学教育的发展和基本实践1 1　学科的形成和定位　临床检验诊断学 ,…     

第十四次全国高等医学教育医学检验专业校际会闭幕式上的讲话

全国高等医学教育医学检验专业第十四次校际会在东道主中南大学湘雅医学院医学技术与情报学院的大力支持下，在各位代表的积极参与和共同努力下，经过一天半的高效率的会议日程安排，基本完成了预期的任务。本次会议共有76所院校，163名代表参加。在东道主的努力下，很荣幸地邀请到卫生部科教司孟群副司长，卫生部临检中心王治国主任代表申子瑜主任莅临会议，给我们作了重要的报告和有关本学科发展中一些重要问题的动向，希望我们共同认真领会，积极主动地应对。     

重组逆转录病毒双表达载体的构建及其对K562细胞增殖活性的影响

目的 构建针对慢性粒细胞白血病bcr-abl b3a2型mRNA的双表达逆转录病毒载体,初步探讨其对K562细胞表型的影响.方法 以逆转录病毒载体pMSCV-neo为骨架,构建eGFP及针对bcr-abl b3a2型mRNA的反义RNA双表达载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40AS,同时构建对照载体pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL40S和pMSCV/GFP-H1-BCR/ABL80AS,酶切及测序鉴定各重组载体;以脂质体法转染各载体到PT67包装细胞后,G418筛选稳定的病毒产生细胞株,再以NIH3T3细胞测定病毒滴度并感染K562细胞,计数细胞数绘制细胞生长曲线,FCM检测细胞凋亡情况、并用Western blot检测PKR激活情况.结果 酶切及测序结果证实各重组载体构建完全正确;G418筛选到高滴度重组逆转录病毒生产细胞株:PT67-MSCV/GFP、PT67-40as、PT67-40s和PT67-80as,且PT67-40as上清感染组K562细胞生长受抑制,其24 h时早期细胞凋亡率为22.54±3.19%,与除PT67-80as组外的其余各组相比有显著差异(P＜0.05);PT67-40as和PT67-80as处理组细胞PKR磷酸化水平分别增高了59.20%和60.33%,2AP能抑制PT67-40as的作用.结论 成功构建重组逆转录病毒双表达载体,并发现其能抑制K562细胞生长并引起细胞凋亡,通过激活PKR抗肿瘤可望成为肿瘤新的靶向治疗策略.     

成人肝细胞微粒体乙基吗啡N-脱甲基酶活性及酶动力学研究

目的观察成人肝细胞微粒体乙基吗啡N-脱甲基酶(EDM)的活性水平、酶动力学特征及乙醇和头孢噻肟对酶动力学的影响。方法肝组织除去筋膜和血红蛋白,加磷酸盐缓冲液4℃下匀浆,12 000×g离心15 min,取上清100 000×g超速离心60 min,沉淀加PBS/甘油缓冲液制成微粒体悬液,终点法测EDM酶活性。观察不同浓度乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性及酶动力学参数最大反应速度Vm和米氏常数Km的影响。结果48例成人肝细胞微粒体EDM活性为(0．89±0．18) U,女性组(0．96±0．22)U明显高于男性组(0．81±0．16)U(P＜0．05)。乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性均有抑制作用,底物浓度为1．0 mmol/L时,抑制常数Ki分别为474 mg/L(1．04 mmol/L)和3．6%(0．62 mmol/L);头孢噻肟终浓度分别为0、200、400 mg/L时,米氏常数Km分别为0．80、0．86和0．96 mmol/L,Vm分别为1．46、1．39和1．35 mmol甲醛/g微粒体蛋白/min;乙醇终浓度分别为0%、2．0%、4．0%时,Km分别为0．80、0．94、和1．1 mmol/L,Vm分别为1．46、1．36和1．22 mmol甲醛/g微粒体蛋白/min。结论成人肝细胞微粒体EDM酶活性水平女性组高于男性组;乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性的抑制作用是竞争性抑制为主的混合性抑制。     

微阵列比较基因组杂交技术及其在遗传性疾病中的应用

拷贝数变化(copy number alterations,CNVs)是指患者与健康对照之间基因组DNA拷贝数的差异,以及导致微缺失或微复制综合征的基因组不平衡,如缺失、重复、扩增和非整倍体等.基因组CNVs通过基因缺失(或)重复、基因断裂、位置效应、后生效应或上位效应等方式可导致各种人类疾病或功能障碍.最近研究发现,CNVs是许多遗传病的细胞遗传基础,根据特征性的CNVs,可对遗传病进行准确诊断.