卵巢癌细胞外泌体抑制外周单个核细胞源性树突状细胞成熟的机制研究

目的 探究卵巢癌细胞源性外泌体对人外周血树突状细胞(DCs)成熟的影响。方法 从健康人外周血中分离单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠从中分选出CD14⁺的细胞;采用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素-4(rhIL-4)联合刺激的办法诱导CD14⁺/PBMC分化为未成熟树突状细胞(iDCs),光镜确认细胞形态;超速离心提取卵巢癌顺铂耐药细胞外泌体(A2780cis-外泌体),蛋白质印迹法检测其特征性蛋白标志物,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测外泌体粒径分布;iDCs与A2780cis-外泌体共培养后给予重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导,流式细胞术检测CD83⁺/HLA-DR⁺/CD1a⁺细胞比例变化。结果 超速离心提取的卵巢癌顺铂耐药细胞外泌体,TEM下可检测到直径约为60 nm的“杯盏状”外泌体颗粒。蛋白质印迹法结果显示A2780cis细胞各蛋白表达均为1,A2780cis-外泌体中CD9、CD8...     

恶性黑色素瘤组织AURKA表达对细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨极光激酶A(AURKA)在恶性黑色素瘤组织中的表达以及对黑色素瘤细胞增殖、凋亡以及迁移的影响.方法 收集2018-01-01-2021-01-01在宁夏医科大学总医院病理科储存的30例原位及转移性黑色素瘤组织,免疫组织化学法检测AURKA在正常皮肤组织、原位以及转移性黑色素瘤组织中的表达水平.分别选用来源于同...     

模式识别受体NOD2在髓样分化蛋白88缺陷小鼠抗分枝杆菌感染中的作用机制

目的探讨模式识别受体NOD2信号在髓样分化蛋白88缺陷(MyD88-/-)小鼠中的表达与免疫功能。方法通过PCR技术鉴定MyD88~(-/-)小鼠、野生型C57BL/6小鼠,分别用分枝杆菌减毒株(卡介苗,BCG)经气管滴入建立肺部感染模型,以磷酸缓冲盐溶液(PBS)气管滴入为阴性对照,感染24h后,收集外周血,无菌取肺脏。利用荧光定量PCR技术、Western Blot技术检测小鼠中NOD2基因与蛋白的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠外周血中白介素6(IL-6)含量。结果与PBS对照组相比,BCG感染组NOD2蛋白表达量显著升高;而MyD88~(-/-)小鼠相比野生型小鼠NOD2蛋白表达量更高;两种小鼠中BCG感染组均比PBS对照组NOD2蛋白表达量更高;两种小鼠中BCG感染后外周血IL-6的含量比PBS对照组高,差异有统计学意义。结论 MyD88依赖途径功能缺失时,BCG可激活NOD2信号通路。