EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过IκBα的降解活化NF-κB

目的　阐明鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)活化核转录因子NF κB的机制。方法　利用强力霉素Dox诱导表达LMP1的鼻咽癌细胞株Tet on LMP1 HNE2为实验模型 ,首先应用免疫印迹方法测定Dox诱导后不同时相LMP1的表达动力学以及IκBs蛋白量及功能的改变。进而用间接免疫荧光法检测NF κB的亚细胞定位。最后采用瞬间共转染及报道基因活性分析分析NF κB的活性。结果　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,Dox处理 15分钟后LMP1的表达迅速升高并维持与较高水平直至 12 0分钟。LMP1的诱导性表达导致IκBα的磷酸化并降解 ,但IκBα蛋白总量无改变。继IκBα的磷酸化并降解 ,NF κB(P6 5 )自胞浆易位至胞核且活性升高。IκBα的显性负性突变子抑制NF κB(P6 5 )的核易位及报道活性。LMP1的诱导性表达并未引起IκBβ蛋白水平变化。结论　在鼻咽癌细胞Tet on LMP1 HNE2中 ,EB病毒LMP1通过IκBα的磷酸化并降解激活核转录因子NF κB的活性 ,并且 ,LMP1诱导的NF κB活性能被IκBα的显性负性突变子完全抑制。IκBβ在此信号传导途径中无改变。LMP1表达前后IκBα蛋白总量维持恒定可能是由于NF κB的活化迅速启动了IκBα的重头合成这一自身调节环路所致。     

Rel/NF-κB/IκB/IKK信号转导途径研究进展

真核细胞核转录因子Rel/NF-кB家族广泛调控着自昆虫至人类的免疫和炎症反应中一系列基因的表达。静息状态下,NF-кB二聚体与抑制性蛋白IкB结合而存在于胞质中。当细胞受外源性刺激时,NF-кB活化进入核内发挥其功能。目前,外源性信号活化NF-кB的机制已初步阐明,Rel/NF-кB/IкB/IKK信号转导途径在蛋白质水平的相互调控,以及在肿瘤发生中的意义的研究也已获得一定进展。本文综述了近年来Rel/NF-кB/IкB/IKK信号转导途径的分子机制及其与肿瘤发病关系的研究进展。     

JIP抑制鼻咽癌细胞中LMP1诱导的AP-1活性及机理的研究

目的:探讨鼻咽癌细胞中JIP抑制激活蛋白1(AP-1)信号转导途径的分子机制。方法:用Dox诱导L7(Tet-on-LMP1-HNE₂)细胞表达LMP1,观察AP-1活性的动力学变化,然后用不同浓度的JIP质粒转染L7细胞后,观察JIP的表达对LMP1诱导的AP-1活性的影响,并用荧光免疫组化方法观察JIP抑制JNK核移位引起磷酸化的JNK在胞浆中的滞留。结果:在转染JIP表达质粒24h之后,抑制了活化的JNK核移位,下调了AP-1的生物活性。结论:JIP能够通过抑制磷酸化的JNK核移位,从而下调AP-1活性。     

EBV-LMP1通过NFκB介导的信号传导 途径活化CyclinD1机制初探

目的 :探讨ＥＢＶ -ＬＭＰ1促进细胞增殖 ,参与ＥＢＶ相关疾病致瘤的分子机制和ＥＢＶ -ＬＭＰ1通过ＮＦκＢ介导的信号传导途径活化细胞周期重要正性调节因子ＣｙｃｌｉｎＤ1表达的机制。方法 :利用已建株的 ,ＬＭＰ1表达受四环素衍生物强力霉素严密调控的ｐＴｅｔ-ｏｎ -ＬＭＰ1 -ＨＮＥ2稳定鼻咽癌细胞系 ,用强力霉素诱导ＬＭＰ1的表达 ,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ从蛋白质水平分析ＬＭＰ1诱导ＣｙｃｌｉｎＤ1表达的表达动力学 ,包括时间效应及剂量效应 ,进一步在ＬＭＰ1稳定表达的鼻咽癌细胞系ＣＮＥ -ＬＭＰ1中 ,用反义硫代磷酸化…     

VP-16和VM-26与铂类联合化疗合并放射治疗小细胞肺癌的疗效比较

分别用含ＶＰ－１６的ＣＥＰ和ＥＰ方案及含ＶＭ－２６的ＶＭ－２６＋ＤＤＰ和ＶＭ－２６＋Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ方案合并放射治疗小细胞肺癌患者共７４例，以比较二者的近、远期疗效和毒副作用。结果示：ＶＰ－１６组有效率为９０．７％，ＶＭ－２６组为９３．５５％；ＶＰ－１６组的两年存活率为４４．１９％，ＶＭ－２６组为４８．３９％；ＶＰ－１６组的脑转移率为１４％，ＶＭ－２６组为１２．９％；ＶＰ－１６组的３～４级血液毒性发生率为２７．９１％，ＶＭ－２６组为５８．０６％。提示ＶＰ－１６与铂类联合的ＣＥＰ，ＥＰ方案和ＶＭ－２６＋ＤＤＰ，ＶＭ－２６＋Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ方案均可视为治疗小细胞肺癌的有效方案。ＶＭ－２６对预防小细胞肺癌的脑转移未见显著优势     

放射合并西咪替丁治疗鼻咽癌的远期疗效

目的 :探讨组胺 2受体拮抗剂西咪替丁 (CMD)在鼻咽癌综合治疗中的应用价值。方法 :6 5例无远处转移的鼻咽癌患者 ,随机分为两组。放射治疗组 ,放疗 DT:70～ 76 Gy/7～ 8周。放疗 CMD组 ,放疗同上 ,CMD:16 0 0～ 2 0 0 0 mg,d1,分 4次口服 ,疗程为 4～ 6个月。结果 :5年生存率 ,放射治疗组为 5 9.38% (19/32 ) ,放射 CMD组为 6 6 .6 7% (2 2 /33) ,P>0 .0 5。 5年无瘤生存率分别为 43.75 % (14/32 )和 6 3.6 4% (2 1/33) ,P>0 .0 5。 5年内复发和转移发生率 ,放射治疗组为 5 0 % (16 /32 ) ,放射 CMD组为 2 4.2 4% (8/33) ,P<0 .0 5。差异有显著性。提示放射合并西咪替丁治疗可减少鼻咽癌的复发和转移。结论 :西咪替丁是一种经济、安全、有效的免疫调节剂 ,可能具有肿瘤治疗的应用价值。     

鼻咽癌中EB病毒潜伏膜蛋白1对p53表达的调控

目的 探讨EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）是否通过NF-kB在鼻咽癌细胞中促进p53蛋白的表达,为阐明LMP1促进细胞凋亡的机制提供实验依据。方法 利用四环素诱导表达系统,建立受四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系,用报道基因检测法和Western印迹技术,观察LMP1过量表达对NF-kB的功能性活化及p53、bcl-2表达的影响。结果 在鼻咽癌细胞中,LMP1能活化NF-kB。过量表达的LMP1促进p53基因的表达,这种促表达可以被硫代磷酸化修饰的LMP1及p65反义寡聚脱氧核苷酸阻断,LMP1和p65地bcl-2的表达则没有影响,LMP1过表达对bcl-2的表达无影响。结论 鼻咽癌中LMP1通过活化核转录因子NF-kB调节p53的表达;而在LMP1过表达时,bcl-2介导的抗凋亡机制未被启动,至少是未被上调的。     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过IκBα的降解活化NF-κB

目的 :ＥＢ病毒是一类与鼻咽癌等肿瘤密切相关的ＤＮＡ致瘤病毒 ,其具体致瘤机制至今未明。ＥＢ病毒编码的潜伏膜蛋白 1 (ＬＭＰ1 )被确证具有瘤基因功能 ,它所介导的信号传导途径 ,尤其是ＬＭＰ1通过活化核转录因子ＮＦ κＢ调控下游靶基因的表达 ,在细胞增殖、分化、转化与凋亡中发挥着重要的生物学作用 ,因而在鼻咽癌发病机制的研究中备受瞩目。静息状态下 ,ＮＦ κＢ二聚体与抑制子ＩκＢｓ结合而存留在胞浆内。活化信号通常通过信号传导途径导致ＩκＢｓ与ＮＦ κＢ的分离 ,ＮＦ κＢ得以进入胞核结合特异的识别序列 ,并反式激活靶基因…