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1.
目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)-反义寡核苷酸(ASODN)转染胃癌细胞SGC-7901对其VEGF表达和生长的抑制作用。方法人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN,转染胃癌细胞SGC-7901,24h后实时荧光定量RT-PCR检测细胞VEGF mRNA起始拷贝数,ELISA法检测细胞及培养液上清中VEGF蛋白含量,Western blot法检测细胞生存素(survivin)蛋白含量,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,用MTT实验检测转染对细胞活性的影响,用细胞生长曲线表示转染对细胞生长的影响。结果VEGF-ASODN能显著降低VEGF mRNA水平、降低胃癌细胞及其培养液中VEGF蛋白含量、降低survivin蛋白含量、增加细胞凋亡、抑制细胞活性及生长(P〈0.05)。结论VEGF-ASODN转染胃癌细胞SGC-7901能显著抑制VEGF和survivin蛋白表达、增加细胞凋亡、抑制细胞生长。 相似文献
2.
目的探讨Survivin反义核酸技术诱导乳腺癌细胞凋亡的作用及效果。方法本实验共分6组,分为以脂质体介导反义寡核苷酸组(ASODN/Lip)、无义寡核苷酸组(NODN/Lip)及RPMI 1640培养液的空白对照组(Lip),转染人乳腺癌MCF-7细胞系,应用Hoechst 33258/PI双重染色观察MCF-7细胞的形态学改变,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化,DNA凝胶电泳观察凋亡情况,研究Survivin反义寡核苷酸对MCF-7乳腺癌细胞的生长抑制作用。结果Hoechst 33258/PI染色及透射电镜观察可见转染后的细胞结构呈凋亡样改变;流式细胞仪检测见转染后细胞凋亡显著增加,并出现G2/M期阻滞现象;DNA凝胶电泳在600ng/ml,800ng/ml ASODN/Lip组的电泳图谱上呈现出明显的“梯状”现象。结论凋亡抑制基因Survivin表达下涧对乳腺癌细胞的生长抑制作用主要是通过诱导细胞发生凋亡以及阻止有丝分裂发生在G2/M阻滞期来实现,Survivin靶向反义核酸技术可能成为乳腺癌基因治疗的一种有效方法。 相似文献
3.
为了探讨结直肠癌 (CRC)患者者围手术期的细胞免疫状况以及化疗、免疫制剂对它们的影响 ,同时观察这一期间几种肿瘤标志物 (TM )的变化 ,将手术切除的 48例CRC患者 ,随机分为 :(1)化疗组 (实验组 ) (18例) ;(2 )免化组 (实验组 ) (化疗联用干扰素 ) 2 0例 ;(3)手术组 (对照组 ) (10例 ) .分别于术前、术后 2周 ,术后 6周进行T细胞亚群 (CD4 ,CD8,CD4 /CD8)、NK细胞、癌胚抗原 (CEA)、糖链抗原 19- 9(CA19-9)、胃癌抗原 (MG-7)检测 ,并与正常人参考值比较 .结果发现 :(1)CRC患者除DukesA期外 ,术前均存在… 相似文献
4.
细胞凋亡作为一种特殊的细胞死亡方式,参与人类多种疾病的发生、发展。近年来研究表明,细胞凋亡也发生于胰腺移植中供体胰的切取、保存、再灌注和排斥反应过程,被认为是缺血再灌注损伤、移植排斥反应并最终导致移植物功能丧失的主要机制。 相似文献
5.
PTEN基因联合奥沙利铂对胆管癌细胞生长抑制的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨脂质体介导PTEN基因转染人胆管癌细胞(QBC939),联合化疗药物奥沙利铂(L-OHP),分别进行人胆管癌细胞体外培养和体内接种生长,观察分析该基因对胆管癌细胞生长的抑制情况,探索人类胆管癌的生物治疗的可行性和方法.方法将携带PTEN基因的真核表达载体pBP-PTEN和不含该基因的空载体.转胆管癌QBC939细胞,嘌呤霉素抗性筛选克隆、扩增培养.绘制细胞生长曲线及MTT细胞活性观察;利用免疫组化检测转染前后PTEN阳性表达率;透射电镜扫描观察转染前后及联合奥沙利铂后细胞的超微结构变化;流式细胞分析细胞的周期变化和细胞凋亡情况;体外细胞侵袭力抑制试验;裸鼠体内肿瘤生长,病理学及电镜扫描的观测.结果PTEN基因转染后QBC939细胞稳定表达,阳性表达率升高(P<0.05);肿瘤细胞活性下降(P<0.05),细胞周期G1~S期抑制,细胞凋亡率增加(P<0.01);透射电镜细胞较成熟、分化好;细胞侵袭力明显抑制(P<0.05);裸鼠体内肿瘤未转染组生长早,加入奥沙利铂后生长受抑制(P<0.05),病理证实为腺癌.结论1.脂质体成功将PTEN基因转染人胆管癌QBC939细胞,并稳定表达.2.PTEN基因转染后细胞生长速度无明显变化;MTT实验活性细胞数有所下降.3.转PTEN基因后的胆管癌细胞超微结构变化显示线粒体增多,细胞较成熟、分化好;流式细胞议分析,细胞周期G1期被抑制,细胞凋亡多,侵袭力受到抑制;4.接种转PTEN基因裸鼠的体内成瘤显著抑制;6.转基因的生物治疗联合奥沙利铂(L-OHP)对人胆管癌细胞生长具有显著的抑制作用. 相似文献
6.
小儿腹股沟斜疝手术及其并发症防治 总被引:7,自引:0,他引:7
腹股沟疝是小儿腹外疝中最常见的一种,临床上所见到的几乎均为斜疝,直疝极罕见。我院收治的960例小儿腹股沟疝均为斜疝,男孩占97.5%,3岁以下者52.4%。右侧多见占56%,左侧占36.6%,双侧占7.4%。与一般文献报告相似。一、小儿腹股沟斜血的病理特点小儿斜迹的病因主要是腹膜鞘状突末闭或闭锁不全以及腹压增高,多数患儿的腹壁薄弱不明显,因此只要正确处理沈囊,做到高位迹囊结扎即可治愈本病。小儿腹股沟管的长度因年龄而异,一般长约1~4cm,年龄越小,腹股沟管走向较直,几乎从腹壁直接多出,内环和外环也越接近,故手术时可… 相似文献
7.
胆道空肠扩大吻合矩形瓣成形术治疗儿童肝胆管结石 总被引:1,自引:0,他引:1
胆道空肠扩大吻合矩形瓣成形术治疗儿童肝胆管结石段体德,李遐龄,段磊儿童肝胆管结石不仅较为少见,而且因并存肝内外胆道的病理改变,处理上较为复杂,我院近10年来共收治6例,采用胆道空肠扩大吻合矩形瓣成形术治疗疗效满意。临床资料男5例,女1例,年龄0~14... 相似文献
8.
目的:观察血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)转染胃癌细胞SGC-7901对血管内皮生长因子(VEGF)和生存素(survivin)表达的影响。方法:人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN。实验分为5组:对照组,错义组,实验1组(转染浓度为100 ng∕mL),实验2组(转染浓度为400 ng∕mL)及实验3组(转染浓度为700 ng∕mL)。转染后实时荧光定量RT-PCR检测细胞RNA起始拷贝数; ELESA法检测细胞及培养上清液VEGF 蛋白含量; Western-blot法检测细胞生存素蛋白表达量; 流式细胞仪检测细胞凋亡; 细胞生长曲线检测转染对细胞生长的影响。结果:3个实验组VEGF mRNA水平和VEGF蛋白表达量及培养上清液VEGF 蛋白含量均明显降低,survivin蛋白的表达水平随转染浓度的升高而降低,转染VEGF-ASODN能使胃癌细胞凋亡增加、细胞生长减缓。结论:VEGF-ASODN转染胃癌细胞SGC-7901能显著抑制细胞VEGF的表达,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。 相似文献
9.
反义肝素酶基因对胰腺癌细胞体外增殖和侵袭的抑制作用 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:研究反义肝素酶基因对人胰腺癌SW1990细胞体外增殖和侵袭能力的抑制作用.方法:反义肝素酶基因转染胰腺癌sW1990细胞,并设空载体对照组和空白对照组,以流式细胞仪检测细胞周期;免疫组化、Western blot及RT-PCR检测肝素酶蛋白和mRNA表达;平板克隆形成实验检测细胞增殖活性,Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭能力.结果:与空白组和空载组比较,反义组细胞周期中S期比例明显减少(18.8%±2.5%vs 36.3%±2.2%,33.2%±2.1%,P<0.01),G1期细胞比例明显升高(66.0%±2.7%vs30.7%±3.2%,39.8%±4.9%,P<0.01);肝素酶蛋白及mRNA表达分别降低34.3%和37.8%:细胞克隆形成数目减少(12.2±2.8 vs 30.8±4.4,28.3±2.7,P<0.01);Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数减少(13.0±3.5 vs 34.8±5.8,29.4±5.6.P<0.01).结论:反义肝素酶基因抑制人胰腺癌SW1990细胞体外增殖及侵袭能力. 相似文献
10.
腹腔镜胆囊切除术围手术期神经内分泌代谢变化的临床研究 总被引:4,自引:0,他引:4
作者对腹腔镜胆囊切除术(LC)与开腹胆囊切除术(CC)共60例患者术前、术后的总T3、总T4、TSH、皮质醇、胰岛素、胰高血糖素、C肽、血糖、电解质、白细胞、体温及血气分析变化进行了监测分析。结果表明腹腔镜组术后患者的甲状腺、肾上腺功能改变及其他手术应激反应均较开腹组轻。应激反应的程度主要与手术创伤大小有关,而与不同的麻醉方法因素关系不大。从客观指标上证实了LC具有创伤小、痛苦少和恢复快的优点,为 相似文献