抗CD3单抗轻、重链可变区基因的分离克隆及序列测定

抗CD3单克隆抗体能阻断身体中全T细胞功能是T细胞功能的特异抑制物。该抗体已用于多种器官移植排斥反应的防治,再生障碍性贫血及骨髓移植GVHD的治疗,显示     

抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建

为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性．增加其在人体内的生物活性及治疗作用，使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病。本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆了抗体的轻重链可变区基因的cDNA。以此轻重链可变区cDNA为特异探针从HIT3a基因文库中分离带有调控序列的功能性轻重链可变区基因，并将其插入到含有人k轻链及人71重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中成功地构建了抗人CD3人／鼠轻重链嵌合抗体基因，为研制人抗CD3入／鼠嵌合抗体完成了关键性的第一步。     

抗CD_3单克隆抗体HIT3aⅠ.制备和特异性鉴定

利用鼠—鼠杂交技术获得1个单克隆抗体(McAb)HIT3a。经免疫学、细胞化学和生物化学分析,证实HIT3a是抗入成熟T细胞表面CD_3抗原McAb,具有亲和力高、活性稳定、能激活T细胞、在补体存在下溶解T细胞等特性,是1个理想的可用于免疫学研究和临床治疗的CD_3类McAb。     

抗CD_3鼠/人嵌合抗体基因的构建及表达 I.CD_3单抗重链可变区基因的克隆及序列测定

以人工合成的小鼠免疫球蛋白重链可变区(V_H)基因特异的寡核苷酸片段为引物,用PCR法成功地进行了HIT_3a(抗CD_3单克隆抗体)V_H基因的扩增,并将扩增片段克隆进了pGEM-7Zf(+)质粒DNA中,重组质粒序列测定的结果表明,片段大小为353 bp,基因重排方式为VDJ_4。     

通过HIT_(8a)和HIT_(8b)两个单克隆抗体鉴定发现CD_8抗原有不同的表位

用间接免疫荧光法、免疫组化技术鉴定了HIT_(8a)和HIT_(8b)两个单克隆抗体(单抗)对各种正常组织、细胞系和各种白血病患者细胞的反应性,证明其反应模式与CD8单抗相似。HIT_(8a)、HIT_(8b)识别的胸腺细胞上抗原分子量分别为 59和60KD(未还原),也与CD8近似。然而,竞争抑制试验显示,9个国际命名的 CD8单抗中只有5个可以完全抑制 HIT_(8a)、HIT_(8b)-FITC与靶细胞结合,4个无作用。证实HIT_(8a)和 HIT_(8b)是 CD8样抗体,识别同一抗原位点。但也揭示 CD8抗原有不同表位。本文对此进行了讨论。     

HI166:抗转铁蛋白受体单克隆抗体(简报)

采用B细胞杂交瘤技术,将CEM细胞系免疫的BALB/C小鼠脾细胞与NS_1骨髓瘤细胞融合。以间接免疫荧光法筛选,获得一株抗人转铁蛋白受体单克隆抗体(单抗),暂命名为HI166。 经琼脂双向免疫扩散方法测定,HI166为IgG_1亚类。组织分布结果表明,HI166可与32±7％正常人骨髓细胞及5～13％胎儿胸腺细胞以及多种T、B粒单造血细胞系反应,但与正常人休止T细胞、B细胞,粒细胞、血小板及成熟红细胞不反应。组织切片免疫酶染色结果显示,HI166抗原表达在扁桃体及脾脏生发中心、脾红髓红系造血细胞、脾窦基底膜、胸腺皮质部分细胞、胎肝细胞、胎盘滋养叶细胞及多种肿