对羟基桂皮醛诱导食管癌TE-13细胞分化及其作用机制

目的：探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛（p-hydroxylcinnamaldehyde,CMSP）对食管癌细胞株TE-13的分化作用及其机制。方法：用流式细胞术检测质量浓度为10、20、40 μg/ml的 CMSP处理TE-13细胞对该细胞凋亡和细胞周期分布的影响,用吉姆萨染色、电镜观察TE-13细胞形态学改变,Real-time PCR和ELISA方法检测TE-13细胞中肿瘤相关抗原CEA和SCC的表达,用克隆集落形成实验、Transwell迁移实验检测不同质量浓度CMSP对TE-13细胞的增殖、迁移能力的影响,Western blotting检测CMSP（20 μg/ml）对TE-13细胞中MAPK通路中各蛋白水平的影响。结果： CMSP可抑制食管癌Kyse30、TE-13、Eca109和Kyse180细胞的增殖\[(1.6±0.2)×104 vs （3.8±0.3)×104、(1.7±0.3)×104 vs (4.5±0.4)×104、 (2.5±0.1)×104 vs (4.0±0.4)×104、(1.5±0.1)×104 vs (2.5±0.3)×104个细胞, 均P<0.01\],而对人食管上皮细胞无明显作用(P>005)。CMSP处理TE-13细胞后：(1) 随CMSP质量浓度（10 、20 、40 μg/ml）和处理时间的增加（24、48、72 h）,G0/G1期细胞数量均增加、S期细胞数量减少（P<0.01或 P<0.05）,但细胞凋亡率无明显变化（P>0.05）;(2) 细胞出现典型分枝状突起,且随CMSP质量浓度增加更显著（P<0.05）;（3）CEA和SCC水平显著降低（P<0.01）;（4）抑制TE-13细胞的增殖和迁移能力,诱导细胞分化;（5）p-P38蛋白水平明显升高（P<0.01）,而p-ERK、p-SPKA/JNK蛋白水平明显降低（P<0.01）。结论： CMSP抑制食管癌TE-13细胞的增殖、诱导其分化,其作用机制可能与上调MAPK信号通路中p-P38和下调p-ERK、p-SPKA/JNK有关。     

含幽门螺杆菌特异性抗体牛奶清除幽门螺杆菌效果的临床随机试验

目的:比较观察抗幽门螺杆菌抗体牛奶根除幽门螺杆菌的效果。方法:用4 株幽门螺杆菌(1 株为标准菌株,3 株为本地流行菌株)免疫奶牛,制备出抗幽门螺杆菌抗体牛奶。本次试验共筛选148 例患者,C-14 呼气试验阳性的患者为72 例,最后符合入选标准的为39 例,将符合标准的患者随机分为试验组和对照组,分别为21 例和18 例,试验组饮用含特异性幽门螺杆菌抗体的牛奶,对照组饮用普通牛奶,连续饮用2 个月后,观察结果。结果:试验组的21 名对象中,9 人C-14 呼气试验转为阴性,10 人降低。有效清除率达42.86%,而对照组未有清除,两组清除率有统计学意义(P =0.005,P<0.05)。结论:抗幽门螺杆菌抗体牛奶具有多克隆性和很高的效价,能够有效清除胃内幽门螺杆菌。     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织，采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平，并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移，同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高，且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此，CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。     

木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛对食管癌移植瘤的抑制作用

目的：探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛（p-hydroxylcinnamaldehyde,CMSP）对食管癌细胞增殖及在BALB/c裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法： 细胞计数法检测CMSP对食管癌细胞株Kyse 30和TE-13增殖的抑制作用,RT-PCR法检测食管癌细胞中CEA和SCC mRNA的表达情况,Western blotting法检测食管癌细胞中C-myc和N-myc蛋白的表达变化。构建裸鼠食管癌细胞移植瘤模型,分为对照组和CMSP处理组,实验结束后测量移植瘤大小及体积;免疫组织化学SP法观察移植瘤组织C-myc和N-myc蛋白的表达变化,H-E染色后光镜下观察两组裸鼠移植瘤组织和肝、脾组织的病理学变化。结果：CMSP对食管癌细胞Kyse 30和TE-13的增殖具有明显的抑制作用\[（1.7±0.3) vs (3.8±0.3),(1.6±0.2) vs (4.5±0.4),均P<001\]。经CMSP处理后：（1）Kyse 30和TE-13细胞中CEA和SCC mRNA表达降低（P<0.01)、C-myc和N-myc蛋白表达明显低于对照组（P<0.05或P<0.01）;（2）裸鼠移植瘤平均体积和质量明显降低（P<0.05或P<0.01）,移植瘤组织中C-myc和N-myc蛋白表达水平低于盐水对照组肿瘤组织。CMSP处理组和对照组中肝、脾组织并未发生任何病理改变。结论：木鳖子单体化合物CMSP体外抑制食管癌细胞增殖,体内抑制裸鼠食管癌移植瘤的生长。     

中药木鳖子乙醇提取物对羟基桂皮醛对小鼠的毒性

目的：检测中药木鳖子乙醇提取物对羟基桂皮醛（CMSP）的毒性,为其应用于临床肿瘤治疗提供毒理学依据。方法：60只昆明小鼠（4~6周龄,雌雄各半）分为空白对照组,CMSP 200 mg/kg和400 mg/kg染毒组,每组20只,采用腹腔注射的方式染毒,每周3次,每次100 μL,连续28 d。观察各组小鼠一般状态,28 d后,处死小鼠,摘眼球取血,采用全自动血细胞分析仪及全自动生化分析仪检测小鼠血常规、肝肾功能和心肌酶谱等生化指标,并计数雄性小鼠精子畸形率,同时采用HE染色观察各组小鼠重要脏器组织的病理改变。观察骨髓细胞微核形成率。结果：观察期内无小鼠死亡,各组小鼠血常规指标、雄性小鼠精子畸形率与对照组相比,差异均无统计学意义（P > 0.05）,高剂量CMSP组小鼠外周血ALT和AST较对照组高（P < 0.05）,肾功能及心肌酶谱无明显差异（P > 0.05）。HE染色结果显示各组小鼠内脏组织均未观察到肉眼可见的病理改变。小鼠骨髓细胞微核形成率亦无明显变化（P > 0.05）。结论：在本研究中,我们发现CMSP具有相对较小的毒性作用,因此可考虑应用于肿瘤临床治疗中,但在后续研究中需充分关注其可能具有的肝功能损伤作用。     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织,采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平,并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移,同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高,且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此,CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。