病理学多媒体网络教学模式探讨

病理学多媒体网络教学模式是基于因特网的现代远程教育模式.实践证明,多媒体网络教学作为病理学教学的重要辅助手段,将极大地改变传统病理学教学模式的面貌,促进了现代病理学教育思想、内容、方法和手段的改革与转变.     

CD44v6、E-Cadherin表达与CNE-2Z-F1裸鼠移植瘤转移的关系

目的　探讨CD44v6、E -Cadherin表达与人鼻咽癌裸鼠移植瘤转移的关系。方法　分别将人鼻咽癌细胞克隆株F1在体外与鼠肺块共同孵育及胸内移植 ,然后将带瘤细胞肺块 (Ⅰ组 )和胸内瘤组织块 (Ⅱ组 )各行裸鼠皮下移植 ,并与瘤细胞悬液皮下移植瘤 (Ⅲ组 )比较 ,观察各组移植瘤转移特点。采用免疫组织化学技术检测各组移植瘤回复培养细胞CD44v6和E -Cadherin表达。结果　Ⅰ组和Ⅱ组皮下移植瘤的总转移率和淋巴结转移率均高于Ⅲ组 (其中ⅠvsⅢ ,P <0 .0 5) ;肺转移仅发生在Ⅰ组。这两组移植瘤细胞CD44v6表达水平明显增高 ,其阳性细胞数分别为 (79.7± 5.7) %、(74.1± 3.1 ) % ,第 3组为 (65.6± 4.31 ) %移植瘤转移率与CD44v6高表达密切相关 ;E -Cadherin阳性细胞分别为 (41 .7± 4.9) %、(43.8± 6.4) %和 (2 7.4± 4.9) % ,Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组之间比较 ,有显著差异 (P <0 .0 5)。结论　CD44v6的过表达和E -Cadherin功能障碍 ,可能在鼻咽癌侵袭转移中起一定作用。     

Ras、MAPK、Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性研究

目的探讨Ras/Raf/MAPK信号通路和通路下游靶基因Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性。方法 (1)用激光扫描共聚焦显微技术对病理性瘢痕和瘢痕癌进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记;(2)提取DNA,检测病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子的突变;(3)采用免疫组化SP法检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中MAPK、Cyc-lin D1蛋白的表达;(4)采用原位杂交技术检测3组组织中MAPK mRNA、Cyclin D1 mRNA的表达。结果 (1)免疫荧光双标记K-ras、H-ras、N-ras在病理性瘢痕上皮中呈较弱荧光为弱阳性,在瘢痕癌组织中呈较强荧光为强阳性;(2)在病理性瘢痕和瘢痕癌中未发现K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变;(3)MAPK和Cyclin D1的蛋白及mRNA在正常皮肤表皮均呈阴性或弱阳性,在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均光密度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)Ras、MAPK、Cyclin D1基因的高表达与瘢痕癌的发生密切相关,各种基因共同发挥了协同作用;(2)K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变与瘢痕癌的发生无相关性。     

miRNA-146a在鼻咽炎症和癌症病变组织中的表达及意义

目的探讨miRNA-146a在鼻咽炎症和癌症病变组织中的表达及意义。方法 SYBR Green实时定量PCR方法定量检测miRNA-146a在13例鼻咽黏膜慢性炎症患者和16例鼻咽癌患者病变组织中的表达,比较miR-NA-146a表达在鼻咽炎症与癌症组织中以及鼻咽癌不同临床病理特征的组间差异。结果鼻咽癌组织中miRNA-146a表达水平明显高于鼻咽黏膜慢性炎症组织(P<0.01);miRNA-146a在鼻咽癌淋巴结转移组中的表达水平高于无淋巴结转移组(P<0.05);miRNA-146a表达水平在不同年龄及临床分期比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论人鼻咽癌组织中miRNA-146a呈高表达,可能促进鼻咽癌淋巴道转移。     

鼻咽癌中PTTG1与MAPK/ERK信号通路及增殖凋亡的关系

目的探讨鼻咽癌中PTTG1与MAPK/ERK信号通路及细胞增殖凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法检测33例鼻咽癌中PTTG1、p-ERK、Ki-67蛋白的表达;用50、100μmol/L的ERK/MAPK信号传导通路抑制剂PD98059,分别处理CNE-2Z细胞24、48、72 h,免疫细胞化学法检测PTTG1、p-ERK、Ki-67蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 33例鼻咽癌组织中PTTG1、p-ERK、Ki-67蛋白的阳性表达率分别为81.82%(27/33)、66.67%(22/33)、78.79%(26/33);PTTG1与p-ERK(r=0.345,P=0.042<0.05)、Ki-67(r=0.600,P<0.01)蛋白表达均呈正相关;不同浓度PD98059作用于CNE-2Z细胞不同的时间,免疫细化检测PT-TG1、p-ERK、Ki-67蛋白的阳性表达降低,细胞增殖明显受抑制,可检测到凋亡峰。结论 PTTG1在鼻咽癌中可能通过MAPK/ERK信号通路发挥促进癌细胞增殖及抑制凋亡的生物学作用。     

上皮--间质转化及其在鼻咽癌中的作用研究进展

鼻咽癌（NPC）是一种与Epstein-Barr病毒（EBV）感染密切相关的鼻咽部黏膜上皮恶性肿瘤,对放疗较敏感,但大多数患者在初次确诊时已有局部淋巴结或远处转移,处于临床Ⅲ或Ⅳ期,晚期患者放疗后仍有30％～40％发生远距离转移和局部复发旧j,侵袭和转移仍是威胁患者生存的关键因素之一。上皮一间质转化（EMT）是肿瘤发生侵袭转移的重要机制,且与NPC原位侵袭和远处转移密切相关。现将EMT在NPC中的作用研究进展综述如下。     

EB病毒LMP1与E-cadherin、ICAM-1在鼻咽癌组织中的表达及其相关性北大核心

目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞黏附分子E-cadherin和ICAM-1表达的影响,探讨LMP1在鼻咽癌转移中的作用及其相关的机制。方法应用免疫组织化学(SP法)分别检测LMP1、E-cadherin和ICAM-1蛋白在31例鼻咽粘膜慢性炎、32例鼻咽癌和24例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中的表达。结果LMP1和ICAM-1蛋白在鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移灶中的阳性表达率显著高于在鼻咽粘膜慢性炎组织中的阳性表达率,E-cadherin蛋白在鼻咽癌和鼻咽癌淋巴结转移灶中的阳性表达率则显著低于在鼻咽粘膜慢性炎组织中的阳性表达率。Spearman相关分析显示,在鼻咽癌组织和鼻咽癌淋巴结转移灶中,LMP1与E-cadherin的表达呈负相关,而与ICAM-1的表达呈正相关。结论在鼻咽癌和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中LMP1可能通过抑制E-cadherin的表达和促进ICAM-1的表达进而影响肿瘤细胞的黏附性,促进鼻咽癌的侵袭和转移。     

肿瘤中 MicroRNAs表达失调机制的研究进展

转化医学这种新的医学模式是将预测、预防、早期干预和个体化治疗等作为临床医学发展方向。非编码RNA （ non－coding RNAs,ncRNA）是转化医学研究领域的研究热点。有科学家预言,ncRNA在生物发育的过程中有着不亚于蛋白质的重要作用。研究表明ncRNA与许多疾病尤其是肿瘤存在关系,但是,目前我们对 ncRNA 的了解甚少,随着更多ncRNA及其生物学功能被发现,必将对各种疾病尤其是肿瘤的发病机制有更深入的了解。 MicroRNAs（ miRNAs）是一类长度为18～25核苷酸的内源性ncRNA,可调节30％～60％基因mRNA的翻译和（或）其稳定性,发挥调节生物体内细胞发育、分化、增殖、凋亡、免疫等生物过程的作用［1－2］。miRNAs在肿瘤中表达异常,通过调节其靶基因表达发挥促癌基因或抑癌基因的作用,影响肿瘤的进展。 DNA甲基化、单核苷酸多态性（ SNP）、miRNA加尾修饰、RNA编辑及长链非编码RNA（long non－coding RNAs,lncRNAs）等对肿瘤中miRNAs表达起调节作用。目前国内鲜见文献综述miRNA在肿瘤中表达失衡的机制,因此本文对这一主题进行综述,希望能为转化医学研究领域提供研究miRNAs的思路。     

绿色荧光蛋白报道基因转染鼻咽癌细胞系CNE1后的表达:用做转染报道基因的可行性鉴定

目的:将经过"人类化"改造的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因质粒导入鼻咽癌CNE1细胞系内,观察GFP报道基因转染鼻咽癌细胞系CNE1后的表达情况.方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成.将带有GFP报道基因的质粒PAT-GFP及PAT-GFP-LMP1在电容960 μ F,280 V条件下电导转染到鼻咽癌CNE1细胞系中,用选择培养液(嘌呤霉素筛选)继续换液培养直至长出抗性细胞克隆,胰酶消化收集细胞.存488 nm光激发下,用荧光显微镜检测及流式细胞仪观察转染细胞在活的、固定后或裸鼠体内移植后3组细胞的GFP的表达情况并计算转染效率,并用免疫组化法及Western blot法观察插入目的基因LMP1的表达情况.结果:温度在28～32℃的条件下活细胞有GFP基因稳定而持续地表达,但表达较低,表达率为(16.20±1.70)%,且目的基因LMP1的插入明显影响GFP基因的表达,表达率为(3.48±0.28)%,而在固定后或裸小鼠体内移植后均无表达;目的基因LMP1则能稳定而持续地表达.结论:绿色荧光蛋白报道基因GFP在CNE1细胞系中能稳定而持续地表达,且不影响插入目的基因的表达,可用做转染报道基因.