结直肠癌细胞Kiss-1基因表达在X线照射后的变化及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的研究X线照射后人结直肠癌SW480细胞中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达水平变化及其对细胞增殖和凋亡能力的影响。方法SW480细胞分为对照组（0Gy）和不同照射剂量（2、4、6和8Gy）的实验组。实验组经6-MVX线照射后48h,应用细胞免疫组织化学、实时定量PCR法检测细胞中Kiss．1蛋白及mRNA水平．通过软琼脂集落形成实验和流式细胞法检测细胞增殖和凋亡情况。结果与对照组相比,2、4Gy剂量组细胞Kiss-1蛋白表达无明显改变（P〉0．05）．6、8Gv剂量组表达明显上调（P〈0．05）;在2、4、6Gy剂量组细胞瞄SS-1基因mRNA水平上调（P〈0．05）,8Gy剂量组则无明显改变（P〉0．05）;与对照组相比,各剂量组细胞克隆形成数均明显减少（P〈0．05）：4、6、8Gy剂量组细胞凋亡率增加（P〈0．05）。2Gv剂量组细胞凋亡率无明显改变（P〉0．05）。结论X线照射有可能上调SW480细胞Kiss-1基因的表达．同时残存癌细胞凋亡率增高、增殖力下降。     

放射治疗对直肠癌组织中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达的影响

目的：探讨放射治疗对直肠癌组织中Kiss-1基因表达的影响及意义。方法：应用免疫组化SP法检测29例放射治疗前、后直肠癌组织中Kiss-1基因的表达,通过图像分析系统（Image-Pro Plus 6.0）进行定量分析。结果：放射治疗前直肠癌组织中Kiss-1基因表达水平的图像分析灰度值为160.81±2.78,放疗后为158.04±3.24,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：放射治疗对直肠癌中肿瘤转移抑制基因Kiss-1的表达无明显影响,推测放射治疗不会增加直肠癌转移的风险。     

肿瘤转移抑制基因Kiss-1对构建原代人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型的影响

目的 构建原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤模型(肝转移模型),探讨Kiss-1基因在移植瘤存活、生长和转移中的作用.方法 选择Kiss-1基因阳性和阴性表达的人结直肠癌组织块各1块,分别建立裸鼠皮下移植瘤和裸鼠盲肠原位移植瘤模型,并观察移植瘤生长和肝转移.结果 裸鼠第2代皮下移植瘤模型构建成功率Kiss-1基因阳性组为37.50％,阴性组为100.00％,差异有统计学意义(P＜0.05);裸鼠盲肠原位移植瘤模型构建成功率,第1代为41.67％(Kiss-1阳性组为12.25％,阴性组75.00％),第2代为75.00％(Kiss-1阳性组为56.25％,阴性组为93.75％);Kiss-1阴性组成功率均高于阳性组,差异有统计学意义(P＜0.05);皮下移植瘤模型和第1代盲肠原位移植瘤模型中均未发现肝转移,第2代盲肠原位移植瘤模型中肝转移率Kiss-1阳性组为33.33％,阴性组80.00％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Kiss-1基因表达缺失有助于提高原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤肝转移模型构建的成功率,提示它具有抑制结直肠癌移植瘤存活、生长和转移的作用.     

结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达的关系

目的：研究结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响。方法：应用甲基化特异性PCR （MSP）方法检测73例结直肠癌、正常结直肠组织和人结直肠癌细胞HCT116、SW480、W1116、LoVo中Kiss-1基因启动子甲基化状态,应用realtime-PCR、Western-blot技术检测相应组织和细胞中Kiss-1基因mRNA和蛋白质（Metastine）的表达量。结果：结直肠癌中Kiss-1基因甲基化阳性率（82.19%）高于正常组织（6.31%）（PSW480〉SW1116〉HCT116,差异有统计学意义（p〈0.05）。结论：结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化可能引起Kiss-1基因表达下调。     

Kiss1蛋白及其受体GPR54在结直肠癌中表达的意义

 目的　探讨Kiss1蛋白及其受体GPR54与结直肠癌转移的关系。方法　应用免疫组织化学SP法检测121例结直肠癌原发灶及相应61例淋巴结转移灶中Kiss1、GPR54的表达。结果　Kiss1在伴淋巴结转移的结直肠癌原发灶表达率（52.46 %）低于无淋巴结转移者（71.67 %）,差异具有统计学意义（P＝0.030）;伴远处器官转移者表达率（28.57 %）低于无远处器官转移者（69.00 %）,差异具有统计学意义（P＝0.001）;结直肠癌淋巴结转移灶中Kiss1表达率（22.95 %）低于其原发灶Kiss1的表达率（52.46 %）,差异具有统计学意义（P＝0.001）。GPR54在结直肠癌原发灶中的表达与有无淋巴结转移及远处器官转移无关（P＞0.05）。结论　Kiss1表达下降与结直肠癌的转移密切相关,可能参与肿瘤转移的调控。     

结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化对其表达 水平的影响及其临床意义

目的:研究结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响,分析其与结直肠癌临床病理特性的关系及临床意义。方法:收集126例结直肠癌组织及其癌旁正常结直肠组织,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测Kiss-1基因启动子区甲基化状态,采用实时荧光定量 PCR和Western blotting法检测结直肠癌组织和正常结直肠组织中Kiss-1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果：结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性率（83.33%）高于癌旁正常结直肠组织（30.16%）（P<0.05）。结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性组Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平均低于Kiss-1基因启动子甲基化阴性组（P<0.05）。结直肠癌组织中T3+T4组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于T1+T2组（P<0.05）,但Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平低于T1+T2组（P<0.05）;
中和低分化组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于高分化组（P<0.05）,Kiss-1基因mRNA表达水平低于高分化组（P<0.05）;淋巴结转移组甲基化阳性率高于无淋巴结转移组（P<0.05）,但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无淋巴结转移组（P<0.05）;远处转移组Kiss-1基因启
动子甲基化阳性率显著高于无远处转移组（P<0.05）,但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无转移组（P<0.05）。Kiss-1基因启动子甲基化阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤部位和大小无明显关联（P>0.05）。结论：结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达
水平及结直肠癌的恶性转化特性（特别是转移）有关联,Kiss-1基因甲基化状态有望成为评估结直肠癌转移风险的重要指标。     

小分子干扰RNA沉默人结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响

目的 观察小于扰RNA(siRNA)沉默结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响,以及细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学行为的变化.方法 利用脂质体lipofectamineTM 2000将siRNA稳定转染结直肠癌HT-29细胞,实验分为干扰组、阴性对照组、空白对照组;应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)与Western blot技术检测TCF21与Kiss-1基因mRNA与蛋白的表达水平,分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell小室法检测干扰前后细胞增殖、侵袭与迁移能力的变化.结果 siRNA干扰后成功沉默了HT-29细胞TCF21基因的表达,Kiss-1基因mRNA的表达量为0.58 ±0.02,较对照组的1.00±0.00明显降低(P＜0.05),蛋白表达量为0.3491±0.0009,与对照组比较(0.8485 ±0.0016)亦出现明显下降(P＜0.05),同时细胞增殖、侵袭及迁移能力均明显增强(P＜0.01).结论 沉默TCF21基因的表达可以下调结直肠癌细胞Kiss-1基因的表达水平,并导致相应生物学行为的变化,因此TC F21基因可能是Kiss-1基因的上游调控因子.     

Kiss-1基因启动子甲基化与结直肠癌的关系

目的探讨结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态与临床病理学特征的关系及临床意义。方法采用甲基化特异性PCR检测142例正常结直肠组织、23例结直肠腺瘤组织、73例结直肠癌组织和相应癌旁组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态。结果结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性率为82.2%,癌旁组织为30.1%,结直肠腺瘤组织为21.7%,正常结直肠组织为6.3%,总体比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kiss-1基因启动子甲基化阳性率与结直肠癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。结论 Kiss-1基因启动子甲基化可能促进结直肠癌的发生、发展与转移,Kiss-1基因启动子甲基化水平有可能成为评估结直肠癌转移风险及预后的指标之一。     

X线照射对人结直肠癌细胞株SW480中Kiss-1基因表达的影响

目的探讨X线照射对体外培养人结直肠癌细胞株SW480中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达的影响。方法应用SYBRGreen实时定量PCR检测、相对定量法分析不同剂量X线照射后24、48 h SW480中Kiss-1 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,照射后24 h,各照射组Kiss-1 mRNA表达的差异均无统计学意义(P>0.05);照射后48 h,2、4、6 Gy组Kiss-1 mRNA表达上调(P<0.05),8 Gy组Kiss-1 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 X线照射不会导致结直肠癌细胞Kiss-1基因表达下调,放疗可能不会增加结直肠癌转移的风险。     

不同消化道重建方式对远端胃癌合并2型糖尿病患者术后血糖的影响

目的：探讨不同消化道重建方式对远端胃癌合并2型糖尿病患者术后血糖的影响。方法：选取本院79例远端胃癌合并2型糖尿病的患者,对其行根治性远端胃大部切除术,按消化道重建方式的不同分为三组,A组19例：毕Ⅰ式吻合;B组38例：单纯毕Ⅱ式吻合;C组22例：毕Ⅱ式吻合＋空肠侧侧吻合。比较三组患者术后血糖的变化情况。结果：A组血糖治疗有效率为26.3%,B组为81.6%,C组为86.4%。B、C组术后对血糖控制的有效率均高于A组（P〈0.05）,而B、C组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。B、C组术后1、6、12个月的FPG、2 h PG、Hb Alc与A组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;而B、C组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：毕Ⅱ式吻合能够有效控制术后的血糖,并推测前肠短路导致肠激素分泌减少可能是手术治疗糖尿病的主要原因。