金属蛋白酶类及层粘连蛋白受体与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系

目的揭示金属蛋白酶类(MMPs)及层粘连蛋白受体(LN-R)与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系,并探讨MMPs及IN-R用以判断肿瘤细胞侵袭转移的可能性。方法通过流式细胞术(FCM)定量研究和蛋白酶活性分析(Zymography),对具有不同潜在转移能力的人黑色素瘤细胞系(WM35,WM134b,WM983a,WM451)进行MMPs及瘤细胞表面67000LN-R的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度测定。结果早期WM35不产生MMPs;WM1341b仅产生MMP2,不产生MMP9;进展期WM983a和远处转移瘤株WM451既产生MMP2又产生MMP9。瘤细胞表面67000LN-R的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为WM451>WM983a>WM1341b>WM35。结论MMPS和LN-R与人黑色素瘤细胞侵袭转移能力的获得之间关系密切,并可作为较特异的肿瘤侵袭转移标记物应用于肿瘤研究与治疗中。     

MDR基因在食管癌中的表达及其临床意义

临床上对肿瘤患者进行化疗失败的重要原因是瘤细胞对化疗药物产生耐受性,多药耐药（MDR）就是耐药的一个主要类型,其实质是MDR基因mdr-1表达升高,导致细胞内药物积聚减少。我们选择食管癌患者手术切除的标本组织,采用RT－PCR方法检测其表达水平,探讨MDR与食管癌组织学分级之间的关系,及其在临床上的应用价值,为临床化疗和克服MDR提供理论依据。     

不同转移潜能的人黑色素瘤细胞p53和MMPs基因突变的研究

目的探讨具有不同潜在转移能力的黑色素瘤细胞恶性表型的演进及其侵袭转移的机制。方法采用细胞培养,p53蛋白免疫组化,PCR－SSCP检测;酶活性分析,流式细胞术检测。结果人类黑色素瘤细胞中存在有p53基因的突变,瘤细胞表面671kDa层粘连蛋白受体（LN－R）的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为：WM451＞WM983A＞WM1341B＞WM35。MMPs的产生情况：早期WM35不产生MMPs,WM1341B仅产生72kDa（MMP－2）,不产生92kDa（MMP－9）;进展期WM983A和远处转移瘤株WM451均产生72kDa和92Kda。其侵袭、转移的潜能与其产生或诱导产生的MMPs的能力和其表面67kDaLN－R的表达水平密切相关。结论p53基因突变;MMPs的产生和细胞表面67kDaLN－R的高表达是人黑色素瘤细胞侵袭转移能力获得的关键因素。     

C-myc与肺鳞癌中miRNA-21表达的关系

目的:检测肺鳞癌组织中miRNA-21和癌基因C-myc的表达,探讨两者的相关性及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和免疫印迹检测25例肺鳞癌组织及其相应癌旁正常组织中miRNA-21及C-myc蛋白的表达水平,分析两者与临床病理指标的关系.结果:肺鳞癌组织中miRNA-21的表达及C-myc的表达均高于癌旁正常组织,在低分化肺鳞癌组织中的表达水平与高分化肺鳞癌组织相比,差异无统计学意义.miRNA-21及C-myc在转移癌组织中表达水平显著高于非转移癌组织.肺鳞癌组织中miRNA-21表达量与C-myc阳性表达存在正相关.结论:miRNA-21和C-myc在肺鳞癌中表达上调,可能与肺癌的发生与演进相关.     

半胱氨酸蛋白酶-3基因表达对缺血再灌注心室功能的影响

目的观察家兔急性缺血再灌注后心肌组织中半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达对心室功能影响。方法家兔30只,分对照组（10只）,缺血组（10只）,再灌注组（10只）。缺血组套扎左冠状动脉前降支30min,再灌注组套扎30min后再灌注120min,对照组游离左冠状动脉前降支不结扎。超声心动图测量左室收缩功能,采用RT—PCR和免疫组化方法检测caspase-3基因与蛋白表达情况。结果对照组：各项指标基本正常。缺血组与对照组比较：caspase-3蛋白表达明显增高（P〈0．01）;caspase-3mRNA表达显著增强;左室应变率明显降低（P〈0．01）。再灌注组与缺血组比较：caspase-3蛋白表达进一步增高（P〈0．01）;caspase-3mRNA表达也有所增强;左室应变率有所恢复,但仍明显低于对照组（P〈0．05）。结论缺血再灌注激活capase-3是导致与心室功能的改变的重要原因。     

视网膜缺血再灌注血清中IL-1 α的表达

视网膜缺血再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)损伤,是临床上广泛关注的问题,目前对其发生机制的研究越来越深入.探讨RIR损伤的发生机理,对防治RIR的损伤,具有重要的理论和实践意义.     

大鼠肺鳞癌组织中Pokemon基因与MDM2基因表达的相关性

目的:探讨原癌基因Pokemon与癌基因MDM2在大鼠肺鳞癌发生发展过程中的表达及意义.方法:采用Wistar大鼠实验组灌注三甲基胆蒽与二乙基亚硝胺诱癌,对照组灌注碘油,采用原位杂交法检测肺鳞癌发生、发展各阶段的基因转录及表达水平.结果:实验组诱癌率为80％,其中支气管黏膜上皮增生28％,不典型增生17.3％,原位癌37.3％,侵袭癌26.7％,转移癌21.3％.Pokemon基因对照组与不典型增生组、鳞癌组比较差异有统计学意义;转移癌组和非转移癌组比较差异有统计学意义.MDM2基因对照组与不典型增生组、鳞癌组比较差异有统计学意义,转移癌与非转移癌比较差异有统计学意义.Pokemon基因与MDM2基因两者表达呈正相关.结论:Pokemon基因与MDM2基因在大鼠肺鳞癌的演进过程中呈现逐渐的高表达,两者可能共同参与了大鼠肺鳞癌的发生、发展过程.     

新生儿缺氧缺血性脑病血清中IL-1β,NSE和sICAM-1动态变化的临床意义

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患者血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的变化及其对临床的实用价值。方法 HIE患儿60例,分别在急性期、恢复期采血,用ELISA测定IL-1β,NSE和sICAM-1的含量,20例同期出生的健康新生儿作为正常对照组。结果 HIE组急性期血清IL-1β,NSE和sICAM-1水平显著高于正常对照组（P〈0.01）,中、重度HIE组血清IL-1β,NSE和sICAM-1水平与轻度组、对照组比较,差异都有显著意义;恢复期HIE轻度组血清IL-1β,NSE和sICAM-1水平已基本降至正常对照组水平,中、重度组IL-1β,NSE和sICAM-1水平也下降,但仍高于正常对照组和轻度组（P〈0.01）。结论 IL-1β,NSE和sICAM-1可能参与了HIE的发生发展过程,且其水平与HIE的病情程度密切相关。     

心肌缺血再灌注交界区细胞凋亡促进因子、p53、bcl-2基因动态表达的临床意义

目的探讨缺血再灌注损伤诱导交界区心肌细胞凋亡与细胞凋亡促进因子(caspase-3)、p53、bcl-2基因动态表达的临床意义。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应技术、原位杂交技术、免疫组化技术等,观察家兔心肌缺血/再灌注模型缺血交界区caspase-3 mRNA、p53 mRNA、bcl-2 mRNA动态表达的内在联系。结果①caspase-3 mRNA与心肌细胞凋亡在缺血再灌注损伤4h后开始升高,12h达高峰,二者之间存在明显正相关性(r=0.9286,P<0.01)。②p53mRNA于缺血再灌注8h开始升高。bcl-2 mRNA在缺血再灌注8h时开始激活,并持续维持低水平状态。p53 mRNA和bcl-2mRNA二者的表达之间存在明显的负相关性(r=-0.9648,P<0.01)。结论caspase-3的激活进一步上调p53表达,二者促进心肌细胞凋亡,进而影响心肌功能。     

凋亡相关基因在大鼠肺鳞癌发生发展中的表达研究

目的：研究凋亡效应蛋白Caspase-3和凋亡抑制蛋白Survivin在大鼠肺鳞癌发生发展各阶段的基因转录、表达水平并探讨凋亡和肺癌发生发展的关系。方法选择Wistar大鼠40只,左肺下叶支气管灌注含三甲基胆蒽（3-Methyl-cholanthrene,MCA）和二乙基亚硝胺（ Diethylinitrosamine,DEN）的碘油溶液0.1 ml,另8只灌注0.1 ml碘油做为对照,分批处死获取肺鳞癌形成过程各阶段标本。原位杂交法检测各阶段病变组织中Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA的转录水平并采用半定量法进行评分。结果有多个阶段病变共存,共获取支气管黏膜上皮增生18例、不典型增生15例（含鳞状化生7例）、原位癌6例、侵袭癌7例、转移癌6例。正常对照组大鼠支气管黏膜上皮细胞Caspase-3 mRNA表达高于试验组,差异有统计学意义（ P=0.043）,其中鳞癌组与正常组相比,差异最显著（ P=0.014）;根据据原位杂交评分,在鳞癌组织中Survivin mRNA表达高于癌前病变组、增生组及正常组（ P﹤0.05）;在鳞癌组中转移癌和非转移组Survivin mR-NA表达评分比较差异有统计学意义（ P﹤0.05）。病变肺组织中,Survivin mRNA和Caspase-3 mRNA呈负相关（ Pearson’s R=-0.647,P﹤0.05）。结论 Caspase-3 mRNA、Survivin mRNA与肺鳞癌的发生和发展相关,Survivin mRNA与Caspase-3 mRNA呈负相关关系,从分子水平验证了Survivin主要通过作用于Caspase-3来阻断细胞的凋亡过程,促进癌变进程。