病毒白细胞介素-10转基因在造血干细胞中的表达

目的　观察逆转录病毒转病毒白细胞介素 10 (vIL 10 )基因在体内的表达。方法　用MSCVneo vIL 10重组体在体外转导CBA (H 2 K)小鼠的造血干细胞 (HSCs) ,给经致死照射(90 0rads)的 2 0只同基因CBA(H 2 K)小鼠注入经MSCVneo vIL 10转染的HSCs ,2× 10 6HSCs/只。酶联免疫吸附测定 (ELISA)、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )、Westernblot分析vIL 10的表达。结果　移植MSCVneo vIL 10转染HSCs的 2 0只小鼠 ,移植后 8周用ELISA检测 ,其中 15只小鼠血清的vIL 10浓度为 :2 70～ 13 40ng/L ,5只小鼠血清的vIL 10为阴性。 12周后有 2只小鼠vIL 10测不出 ,13只小鼠长时间表达vIL 10达 6个月。对照组小鼠血清vIL 10均为阴性。RT PCR和Westernblot证实小鼠的器官均有vIL 10的mRNA和蛋白的表达。结论　逆转录病毒能有效地将vIL 10基因导入造血干细胞并在体内长时间表达。     

C-IAP2在肝细胞肝癌中的表达及与临床预后的关系

目的探讨C-IAP2 mRNA和蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的关系。方法采用荧光定量PCR和免疫组化方
法检测肝细胞癌组织及对应的非癌组织中C-IAP2 mRNA和蛋白的表达水平并分析肝癌组织中C-IAP2的表达和临床病理特征
之间的关系。结果肝细胞肝癌中C-IAP2 mRNA的表达是非癌组织的2.70倍（P<0.001）。C-IAP2蛋白在肝癌组织阳性表达率
为70.8%,显著高于非癌组织中的阳性表达率27.8%（P=0.001）。C-IAP2 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达与术前有无癌栓、
有无淋巴结转移、甲胎蛋白水平、肿瘤病理分化类型、TNM分期以及术后复发转移时间有关（P<0.05）,而与患者性别、年龄、乙型
肝炎表面抗原、肿瘤大小、肿瘤数目、肝硬化以及包膜完整性无关（P>0.05）。结论C-IAP2表达水平与原发性肝癌的转移、复发
有关,可作为原发性肝细胞癌预后的新生物学指标。     

肝移植围手术期液体治疗的临床研究

目的 探讨肝移植围手术期的液体治疗与术后早期预后的关系,为肝移植围手术期合理的液体治疗提供依据.方法 回顾性分析1996年7月至2005年12月的62例肝移植受者资料,根据术后早期是否有肺部并发症(包括肺水肿、急性肺损伤、肺炎、急性呼吸窘迫综合征),将受者分为有并发症组和无并发症组.应用单因素分析比较两组受者围手术期中的23项参数,然后进行logis-tic多因素回归分析,筛选出影响早期肺部并发症的一些变量;并比较这些变量对术后恢复情况的影响.结果 有并发症组和无并发症组受者的23项参数比较发现:术前肺功能、术中入量、术中出血量、术中出入量差、术后第1天入量、术后第1天的液体平衡≤-14 ml/kg和术后第1天及术后3 d内的另1 d液体平衡均≤-14 ml/kg的差异有统计学意义.将有统计学意义的参数作为自变量、术后并发症作为因变量,进行logistic多因素回归分析,结果术前肺功能、术中出入量差>62 ml/kg、术后第1天入量≤44ml/kg和术后第1天及术后3 d内的另1 d液体平衡均≤-14ml/kg为影响术后早期肺部并发症的因素.结论 肝移植围手术期液体治疗中,术中和术后维持液体平衡是减少肝移植术后肺部并发症的重要措施,尤其是术后前3 d在血流动力学稳定的前提下,适当的液体负平衡有利于受者恢复正常.     

PCR－SSCP法检测胃癌P53基因突变

应用多聚酶链反应和单链构象多态性分析法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测１９例冰冻胃癌组织Ｐ５３基因第７外显子ＤＮＡ片段扩增及突变情况，同时应用免疫组化法（ＩＨＣ）检测相应胃癌石蜡包埋组织中Ｐ５３蛋白的表达。结果发现４例（２１．１％）胃癌组织Ｐ５３基因第７外显子发生突变。而Ｐ５３蛋白表达率达４７．４％（９／１９）。Ｐ５３基因突变及Ｐ５３蛋白表达与肿瘤发生部位、组织学类型、淋巴结转移及肿瘤分期无关（Ｐ＞０．０５）。提示在胃癌发生和演变过程中，Ｐ５３基因突变是重要事件，其中第７外显子是突变热区之一。     

猪原位肝移植术中内皮素和血流动力学关系的研究

目的 探讨猪原位肝移植（ＯＬＴｘ）术中血浆内皮素（ＥＴ）与血流动力学的关系。方法 观察静脉转流组（ＶＶＢ）和无静脉转流组（ＮＶＶＢ）各６例猪ＯＬＴｘ术中ＥＴ水平和血流动力学指标改变及其相互关系。结果 复灌后ＮＶＶＢ组的ＥＴ水平比ＶＶＢ组高。血浆ＥＴ水平与ＭＡＰ、ＳＶＲ、ＰＶＰ、ＰＡＷＰ呈正相关,与ＣＯ、ＳＶ呈负相关关系。结论 ＥＴ参与猪ＯＬＴｘ术中血流动力学紊乱的病理过程,ＶＶＢ可降低ＯＬＴｘ术中血浆ＥＴ水平,有助于血流动力学稳定。     

双 mTORC1/2 抑制剂 AZD2014 可抑制大鼠肝移植后的急性排斥反应

目的 在同种异基因大鼠肝移植模型中验证AZD2014是否具有抑制肝移植术后急性排斥反应的作用。方法 采用Kamada 提出的“二袖套”法建立Lewis→BN 同种异基因大鼠肝移植急性排斥反应模型,随机分成对照组和AZD2014组,各4只。AZD2014组腹腔内注射AZD2014药物,5 mg/kg,1次/d;对照组腹腔内注射药物溶剂2.5 mL/kg,1次/d。不同时间点取外周血检测肝功能（丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和总胆红素）。记录生存时间,进行生存分析。移植肝脏行免疫组化检测CD3和Foxp3的表达水平,评估T淋巴细胞和Treg淋巴细胞浸润的程度;移植肝脏行HE染色,采用Banff方案评估肝移植术后排斥反应的严重程度。结果 对照组在术后14 d内有3/4 的大鼠死亡,而AZD2014组在术后14 d内无大鼠死亡,AZD2014组与对照组相比生存时间明显延长（χ2=4.213,P=0.040）。对照组血清中ALT、AST和TBIL进行性升高,上述指标均高于同时间AZD2014组（P<0.05）。病理检查显示对照组移植肝内排斥反应明显重于AZD2014组（排斥指数P<0.01）,对照组中T淋巴细胞（CD3阳性）浸润相较于AZD2014组更为严重（P<0.01）,而Treg细胞（Foxp3阳性）明显少于AZD2014组（P<0.01）。结论 双mTORC1/2抑制剂AZD2014可以有效地抑制同种异基因大鼠肝移植术后的急性排斥反应。     

肝移植治疗复发性肝癌(附7例报告)

复发性肝癌的根治性治疗包括再次肝部分切除术及肝移植.有关肝移植治疗复发性肝癌的临床资料国内报道尚少.我院于2004年8月至2005年10月对7例复发性肝癌患者实施肝移植治疗,现总结报道如下.     

原发性肝癌患者可溶性白细胞介素-2受体的变化及其临床意义

对３４例原发性肝癌（ＰＬＣ）患者外周血可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、ＮＫ活性、Ｔ淋巴细胞亚群进行测定。结果：ＰＬＣ患者ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于健康对照组（Ｐ＜０．０１），ＮＫ活性、Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ比值均低于正常人（Ｐ＜０．０１），而ＣＤ８高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。Ⅱ、Ⅲ期ＰＬＣ患者ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于Ⅰ期患者（Ｐ＜０．０１）。ｓＩＬ－２Ｒ水平≥１０００ｕ／ｍｌ、５００～１０００ｕ／ｍｌ、＜５００ｕ／ｍｌ者６个月内的死亡率分别为８０．０％、２９．４％、０％。肝癌切除术后２周ｓＩＬ－２Ｒ水平较术前低（Ｐ＜０．０５），免疫治疗后４周ｓＩＬ－２Ｒ水平亦较治疗前低（Ｐ＜０．０５）。细胞免疫水平都有所改善。提示测定外周血ｓＩＬ－２Ｒ水平可作为ＰＬＣ的免疫状态、病情严重程度、疗效观察及预后估计的生物学指标。     

再次背驮式肝移植并肾移植治疗肝移植术后慢性排斥并肾功能不全(附一例报告)

目的 探讨用原位背驮式肝移植并肾移植术治疗先天性多囊病肝移植术后慢性排斥并肾功能不全。方法 供肝取自同血型脑死亡供体;顺利切除原病肝,行原位再次背驮式新肝植入及右髂窝肾移植。结果 再次背驮式肝移植并肾移植手术成功,供肝,供肾功能良好,术后１８ｄ死于曲霉菌性腹膜炎所致的多器官功能衰竭。结论 背驮式技术适用于再次肝移植;肝移植术后慢性排斥反应并肾功能不全是联合肝肾移植的适应证。     

背驮式肝移植术及其并发症的预防

目的 探讨同种原位背驮式肝移植术（PBOLT）常见手术并发症的预防。方法 4例终末期良性肝病行5次PBOLT,其中2例为肝肾联合移植,1例为肝移植术后慢性排斥行再次肝移植。结果 5次肝移植术后肝功能恢复良好,未发生与背驮式手术相关的并发症,最长存活1年,生活质量良好。结论 PBOLT可适用于任何终末期良性肝病患者,包括再次肝移植,正确处理第三肝门,以三根肝静脉成形后与供肝肝上下腔静脉吻合,术中维持血液动力学稳定是减少或避免该术式有关手术并发症的重要措施。