慢病毒介导的突变型胸苷激酶对T淋巴细胞杀伤作用的实验研究

目的观察慢病毒介导的突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-sr39tk)及野生型HSV-tk对T细胞的体外杀伤作用,比较HSV-sr39tk/更昔洛韦(GCV)、HSV-sr39tk/阿昔洛韦(ACV)、HSV-tk/GCV、HSV-tk/ACV对T细胞存活率的影响。方法采用改良的磷酸钙沉淀法将包装质粒、包膜蛋白质粒和含目的基因的转移质粒共转染293T包装细胞,收集的病毒上清感染T细胞后,分别与不同浓度梯度的前体药物GCV和ACV作用4d后,MTT法测定细胞存活率。结果共转染293T细胞后获得较高滴度的慢病毒(2×106IU/ml)。前体药物GCV和ACV浓度在0～10.0μmol/L时转染HSV-sr39tk细胞(39tk+T细胞)存活率下降比较明显,GCV组细胞存活率由(96.04±3.23)%下降为(36.76±4.38)%,ACV组细胞存活率由(97.31±4.61)%下降为(43.75±8.99)%,而GCV和ACV浓度大于10.0μmol/L时,39tk+T细胞存活率下降趋势则减缓。统计显示39tk+T细胞对GCV、ACV均有敏感性(P值均<0.05);转染HSV-tk T细胞(tk+T细胞)对GCV有敏感性(P<0.05),而对ACV不具有敏感性(P>0.05);同一浓度时39tk+T细胞+GCV与tk+T细胞+GCV两组间T细胞存活率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒载体可高效、稳定地感染T细胞,同时不影响细胞的增殖,与野生型HSV-tk基因比较,表达突变型HSV-sr39tk的T细胞对GCV具有更高的敏感性,而且对ACV也具有敏感性。     

突变型自杀基因HSV1-sr39tk真核表达载体的构建与鉴定

 目的 克隆突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV1-sr39tk并构建其真核表达载体。方法 通过PCR扩增HSV1-sr39tk基因,用BamHⅠ和BglⅡ双酶切纯化的PCR产物,在T4DNA连接酶作用下于室温将其连接于经BamHⅠ单酶切的慢病毒载体转移质粒pTK151上,重组质粒经PstⅠ酶切及测序鉴定。结果 阳性重组质粒酶切及测序鉴定与预期结果完全相符。结论 成功克隆出突变型自杀基因HSV1-sr39tk,并成功构建其真核表达载体。     

MA方案诱导治疗急性髓系白血病的疗效及其预后因素分析

 目的　研究MA方案诱导治疗急性髓系白血病（AML）患者的治疗效果及影响预后的相关因素。方法　对初治原发AML患者102例,采用MA方案（米托蒽醌+阿糖胞苷）诱导治疗,观察其治疗效果及不良反应。根据患者年龄、白细胞计数、FAB分型、乳酸脱氢酶（LDH）水平以及免疫表型进行分组,分析影响预后的相关因素。结果　经1个疗程的MA方案诱导治疗后,完全缓解（CR） 65例（63.73 %）,部分缓解（PR）18例（17.65 %）,未缓解（NR）19例（18.62 %）,总有效（PR+CR）率为81.38 %。年龄<60岁、白细胞计数<100×109／L、FAB分型为M2、LDH＜600 U／L者的CR率及总有效率较≥600 U／L组高,差异有统计学意义（P <0.05）,CD+7与CD-7组相比仅CR率差异有统计学意义（P＜0.05）,而CD+19与CD-19 组相比CR率及总有效率差异均无统计学意义（P >0.05）。结论　采用MA方案诱导治疗AML具有较好的疗效,不良反应少。患者年龄、白细胞计数、FAB分型、LDH水平以及CD7的表达是影响治疗效果的预后相关因素。     

弥漫大B细胞淋巴瘤MYD88、A20基因突变的表达及临床意义

目的 分析弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）MYD88、A20基因突变的表达及临床意义。方法 收集2015年1月至2022年1月徐州市中心医院收治的DLBCL患者213例,治疗前应用二代测序技术检测患者MYD88、A20基因突变情况,治疗后3个月患者采用PET-CT进行疗效评估,统计不同临床特征、不同治疗效果患者MYD88、A20基因突变的情况。结果 213例患者中MYD88基因突变35.21%,其中72.00%突变点位为L265P;A20基因突变22.54%,均为3号外显子的错义突变。MYD88、A20基因双突变者5.63%。MYD88基因突变者Ki-67高表达、Bcl-2阳性、c-MYC/Bcl-2阳性、疾病类型为ABC-DLBCL型占比明显高于MYD88基因未突变者,差异有统计学意义（P<0.05）。A20基因突变者疾病类型为ABC-DLBCL型、PgP阳性中占比高于A20基因未突变者,差异有统计学意义（P<0.05）。MYD88/A20基因双突变者疾病类型为ABC-DLBCL者高于MYD88/A20基因均未突变者,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗有效组17...     

国产利妥昔单抗治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的临床疗效和安全性

目的：分析国产利妥昔单抗治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的临床疗效和安全性。方法：回顾性分析2019年5月-2021年10月江苏省徐州市中心医院血液科收治的43例弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床资料。使用国产利妥昔单抗治疗的21例为观察组,使用原研利妥昔单抗治疗的22例为对照组。患者均采用R/H-CHOP方案(原研/国产利妥昔单抗、环磷酰胺、蒽环类、长春碱类、糖皮质激素)治疗,比较两组患者治疗效果及安全性。结果：两组患者客观缓解率(ORR)比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者白细胞减少、血小板减少、转氨酶升高、胃肠道反应、感染、发热发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论：国产利妥昔单抗治疗弥漫大B细胞淋巴瘤临床疗效和安全性良好,可成为更多患者的治疗选择。     

集束化护理在预防低分子肝素皮下注射不良反应中的效果

目的探讨集束化护理干预预防低分子肝素皮下注射不良反应的效果。方法选取我院神经内科收治的行低分子肝素皮下注射治疗的患者126例作为研究对象。按照数字随机分组的方式,将其分为观察组与对照组,每组各63例。对照组患者予以常规皮下注射及护理,观察组患者予以集束化护理干预,观察两组患者用药治疗过程中不良反应发生情况。结果观察组患者皮下出血、皮下硬结、局部疼痛的发生率均低于对照组患者,观察组患者不良反应总发生率为7.9%,低于对照组患者的22.2%,组间比较,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论集束化护理干预能够有效预防低分子肝素皮下注射不良反应的发生。     

survivin 反义RNA的克隆及慢病毒载体的构建

目的 克隆小鼠survivin cDNA,构建survivin反义RNA的慢病毒载体.方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从肾癌786-0细胞中扩增出survivin cDNA,反向克隆到慢病毒载体转移质粒pLO134中.结果 RT-PCR扩增出约370 bp片段,经酶切鉴定显示survivin反义RNA慢病毒载体（survivin pLO134）构建成功.结论 survivin反义RNA与已发表的的序列相同,我们已成功地把survivin反义RNA克隆到慢病毒载体转移质粒pLO134中.     

骨髓增生异常综合征合并炎症性肠病3例报告

2007年以来,我们共收治骨髓增生异常综合征(MDS)合并炎症性肠病(IBD)患者3例。现报告如下。临床资料:例1男,50岁。因"反复皮肤紫斑、乏力半年,发热1d"入院。查体未见明显异常。血常规正常。骨髓活检结果示造血细胞成分稍增生,造血细胞中三种成分均存在,骨髓中可见出血,网状纤维略增多。诊断为MDS(RCMD)。予     

地西他滨对伴有DNMT3A、TET2基因突变的老年骨髓增生异常综合征患者甲基化水平的影响

目的 观察地西他滨在伴有DNA甲基转移酶(DNMT)3A基因、TET2基因突变的老年骨髓增生异常综合征(MDS)患者去甲基化治疗中的作用.方法 回顾性分析2014年1月至2019年10月使用地西他滨治疗的100例老年MDS患者临床资料,将其中无基因突变的68例MDS患者纳入对照组,将伴有DNMT3A基因突变的10例MD...