ANXA2敲除的A549细胞系的构建及其对H1N1和H9N2流感病毒复制的影响北大核心CSCD

目的旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建ANXA2敲除的A549细胞,并探索ANXA2敲除对流感病毒复制的影响。方法本研究设计了3对靶向ANXA2基因外显子的特异性sgRNAs,分别将sgRNAs构建到LentiCRISPRv2载体上获得重组质粒,与辅助质粒共转染293T细胞包装成慢病毒后感染A549细胞,通过嘌呤霉素压力及有限稀释法筛选ANXA2基因敲除的单克隆细胞株,用靶基因测序及Western-blot验证ANXA2的敲除效果,并通过CCK-8试验比较ANXA2敲除细胞和野生型A549细胞的细胞活力。再分别用人流感病毒WSN(H1N1)和禽流感病毒SD98(H9N2)感染ANXA2敲除和野生型A549细胞,经TCID_(50)检测ANXA2敲除对流感病毒复制的影响。结果成功获得了ANXA2敲除的A549细胞系,且与野生型A549细胞相比,细胞活力无显著差异;ANXA2敲除后WSN(H1N1)和SD98(H9N2)流感病毒的病毒滴度均升高,其中ANXA2对SD98(H9N2)流感病毒的影响要大于WSN(H1N1)。结论本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了ANXA2敲除的A549细胞,并发现ANXA2敲除促进了流感病毒的复制,本研究为流感病毒复制和致病机制的研究奠定了基础。     

颅内动静脉畸形的外科治疗

资料与方法 我于2007年7月～2008年7月于昆明医学院第一附属医院神外科进修期间收治颅内动静脉畸形（AVM）患者12列。其中男7例,女5例;年龄10～66岁,平均31．7岁。术前均行全脑IADSA明确其供血动脉及引流静脉等血流动力学。其中癫痫有3例（25．0％）,突然剧烈头痛、呕吐、意识模糊等自发性出血症状7例（58．3％）,头晕、头痛等其他症状2例（16．7％）。病变主体位于额顶叶5例（41．6％）,     

脑囊虫病42例临床分析

４２例经手术后病理检验或经皮下结节活检证实的脑囊虫病患者，其中脑实质型３８例占９０．５％，多以癫痫、肢体运动障碍，精神障碍为首发症状；脑室型４例，占９．５％，常以头痛、呕吐、眩晕，视乳头水肿等症状多见。作者认为若有以下标准之一可诊断为脑囊虫病，（１）头颅ＣＴ见典型囊虫结节或多数散在小异常钙化点；（２）头颅ＣＴ所见加皮下囊虫结节或绦虫感染史；（３）头颅ＣＴ所见加血囊虫间凝试验或其它免疫学试验阳性。     

Luque─Hartshil矩形框在枕颈部手术中的应用

Ｌｕｑｕｅ┐Ｈａｒｔｓｈｉｌ矩形框在枕颈部手术中的应用李世和１龚跃昆１赵学凌１杨志敏２李玉保２倪师今２杨志勇２田芳镇２为预防枕颈部手术后局部失稳而产生的并发症，我院自１９９０年７月开始，对７例枕颈部手术的病人，使用Ｌｕｑｕｅ－Ｈａｒｔｓｈｉｌ矩形框进...     

全食管、全胃切除、结肠代食管、代胃术治疗颈段食管、胃并存癌1例

患者男,60岁。因进行性吞咽困难5个月求诊,经X线钡餐拍片检查见颈段食管有一长3.5cm充盈缺损;贲门轻度狭窄,扩张度差。食管脱落细胞学检查见有鳞癌细胞和腺癌细胞并存。再次分段拉网距门齿25cm内见有鳞癌细胞。经肠道准备后于1987年3月3日在静脉复合麻醉下分颈腹两组同时探查,见颈段食管有4×2×1.5cm的肿瘤;胃为     

PTEN／MMAC1基因表达与星形细胞瘤细胞增殖的相关性研究

目的研究人脑星形细胞瘤中PTEN/MMAC1基因编码蛋白的表达和星形细胞瘤增殖的关系,探讨PTEN/MMAC1基因突变在人脑星形细胞瘤增殖中的作用。方法应用PCR-SSCP、SP免疫组织化学法检测了52例星形细胞瘤中PTEN/MMAC1基因突变及表达情况,和肿瘤细胞核增殖抗原(PCNA)增殖程度;并用SPSS10.0统计软件分析PTEN/MMAC1基因表达与PCNA的关系。结果52例人脑星形细胞瘤中,PTEN/MMAC1蛋白表达缺失率约40.4%(21/52)。PTEN/MMAC1表达与肿瘤病理分级有显著关系,其中Ⅰ-Ⅱ级阳性率约80.0%,Ⅲ级约55.0%、Ⅳ级为33.3%,各级别组PTEN/MMAC1表达的差异有显著性(P<0.01);PTEN/MMAC1表达程度与星形细胞瘤的增殖呈显著负相关(r=-0.846,P<0.01)。结论PTEN/MMAC1表达与星形细胞瘤的恶性程度有关系,恶性程度越高,病人预后越差,该蛋白水平越低,肿瘤细胞的恶性增殖越明显。     

伴骨骼畸形的巨大头皮神经纤维瘤病1例

患者男性 ,14岁 .10余年前发现右枕部有一头皮肿物 ,约乒乓球大小 .3ａ前撞伤右颞枕部 ,之后即发现肿物逐渐增大并累及额颞、颈部 .肿物质软 ,有坠胀感 .其数年前行右胫骨下段假关节自体骨植入术 .体检 :智力正常 ,胸背部可见散在多数咖啡斑及雀斑样色素斑 ,其中较大者约 1 0ｃｍ ,右额颞顶枕部悬垂袋状巨大头皮肿物 ,约 30ｃｍ× 10ｃｍ× 5ｃｍ ,境界清楚、质软、无压痛及波动感、无血管杂音 ,局部头皮粗糙、松驰 ,毛发正常 .右下肢短缩畸形 ,右小腿及右足内翻畸形 .Ｘ线片 :右枕部骨质密度减低 .ＭＲＩ:额顶部皮下病灶 ,Ｔ1ＷＩ等信号、…     

RNA干扰GCF2基因沉默对人肝癌BEL-7404细胞侵袭能力的影响

目的 探讨沉默GCF2基因表达对人肝癌BEL-7404细胞侵袭能力的影响.方法 实验分为GCF2-siRNA组、NC-siRNA组及MOCK组,GCF2-siRNA组转染靶向GCF2基因的RNA干扰序列GCF2-siRNA,阴性对照组转染阴性对照序列NC-siRNA,MOCK组不转染任何序列.将靶向GCF2基因的RNA干扰序列 (GCF2-siRNA) 瞬时转染BEL-7404细胞以沉默GCF2表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,体外侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)-9及GCF2靶基因MMP-23蛋白表达.结果 转染GCF2-siRNA使GCF2表达下调,后者导致BEL-7404增殖受阻;GCF2-siRNA组的穿膜细胞数较阴性对照组(NC-siRNA)及未转染组(MOCK)明显减少(穿膜细胞数分别为41.5±0.95、61.3±1.57、64.5±1.65,P<0.05);MMP-9和MMP-23蛋白表达较两个对照组明显下降(P<0.05).结论 下调GCF2表达能抑制BEL-7404侵袭能力, 提示GCF2促进肝癌细胞的侵袭可能是其参与肝癌发展进程的重要途径.     

枕大孔区肿瘤的显微外科治疗

目的研究枕大孔区肿瘤的诊断与手术疗效。方法回顾性分析9例枕大孔区肿瘤的临床表现和MRI影像,手术技巧和预后。结果全切5例,次全切3例,部分切除1例。结论熟悉枕大孔区解剖,运用显微外科技术,选择合适手术入路,注重术后处理,都与疗效密切相关。     

颅内外动脉吻合术治疗缺血性脑血管病五例报告

脑血管病是危害人民健康的常见多发病,病残率及死亡率均高,据北京等地近几年的死亡统计中,脑血管病居首位。而脑血管病中,又以缺血性脑血管病为最多,过去一般采用内科治疗,部份病例疗效不佳。19G7年 Yasargil 及 Donaphy 先后报导颞浅动脉与大脑中动脉吻合成功(7)。国内新疆医学院1976年最先开展了此种手术(1)。继后全国各地也相继开展(2.3.4)。我科经过数十次动物试验后,已成功地为五例病员作了手术,获得较好效果,初步报导如下: