人细胞色素P450酶基因多态性与白血病

白血病发病机制及治疗的相关性研究历来是人们关注的焦点。作为人体内主要Ⅰ相代谢酶的细胞色素P450酶在血液系统恶性肿瘤发生、发展及转归方面的作用已经成为本领域中新的研究靶点。本文论述基因多态性与恶性肿瘤发生及治疗的相关性,尤其是与血液系统恶性肿瘤的关系,重点介绍国外近年有关细胞色素P450酶基因多态性及其与白血病易感性和治疗的相关研究进展。     

桂皮酸诱导K562细胞凋亡及其机制的初步研究

目的探讨桂皮酸对K562细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法应用MTT测出 IC50,应用免疫荧光显微镜,DNA Ladder,流式细胞仪,检测凋亡的发生,应用RT-PCR琼脂糖凝胶电泳检测bcl-2基因表达的差异。结果经MTT检测发现IC50为1 mmol／L,24 h后药物基本达到了较佳的效果,且免疫荧光显微镜、DNA Ladder、流式细胞仪检测均有凋亡的发生,RT-PCR结果显示,经桂皮酸处理24h后,bcl-2基因表达明显降低。结论1 mmol／L的桂皮酸作用24 h后可以引起K562 细胞发生凋亡,并且bcl-2基因表达下调是引起凋亡的原因之一。     

耗散结构与骨髓干细胞移植

论述了“耗散结构”理论及其对生命科学研究的指导作用和意义。应用耗散结构理论深入分析骨髓移植对机体功能的维持和恢复，并从不同角度和层面剖析在更深层面上耗散结构作为开放系统进行物质与能量吸收和交换的含义，提出在一定条件下相似耗散结构之间可以存在熵的转移，纵向分析了骨髓移植所体现出的系统与子系统间的熵变关系，深化和扩展了耗散结构中熵的概念。     

耗散结构与骨髓干细胞移植

论述了"耗散结构"理论及其对生命科学研究的指导作用和意义.应用耗散结构理论深入分析骨髓移植对机体功能的维持和恢复,并从不同角度和层面剖析在更深层面上耗散结构作为开放系统进行物质与能量吸收和交换的含义,提出在一定条件下相似耗散结构之间可以存在熵的转移,纵向分析了骨髓移植所体现出的系统与子系统间的熵变关系,深化和扩展了耗散结构中熵的概念.     

烷化剂耐药基因真核表达质粒的构建及在K562细胞中的表达

目的克隆烷化剂耐药基因MGMT，构建真核表达质粒并导入真核细胞进行表达，筛选稳定表达的细胞系。方法从人肝组织中克隆MGMT基因后重组构建真核表达粒质pIRES2-MGMT—EGFP并鉴定。通过脂质体法将目的基因导入K562细胞，应用RT—PCR及Western blot检测目的基因的表达并筛选稳定转染的细胞克隆。结果成功克隆MGMT并构建了真核表达质粒pIRES2-MGMT—EGFP。转染细胞后MGMT在mRNA及蛋白水平均有表达，而对照组则为阴性。结论含烷化剂耐药基因MGMT真核表达质粒的构建及转染后表达的成功为烷化剂耐药基因的相关研究奠定了良好的基础。     

冠心病患者血浆Jagged1蛋白与冠状动脉侧支循环形成的关系

目的:探讨冠心病患者血浆中Jagged1蛋白水平与冠状动脉侧支循环(CCC)形成的关系。方法:根据冠状动脉造影结果入选我院左前降支、左回旋支或右冠状动脉中至少有一支血管直径狭窄≥95%的冠心病患者89例(冠心病组)和造影结果无明显异常的患者30例(正常对照组)。根据Rentrop分级评分将冠心病组患者再分成侧支循环良好亚组(Rentrop分级≥2级,n=42)与侧支循环不良亚组(Rentrop分级≤1级,n=47)。采用酶联免疫吸附法检测所有入选患者血浆中Jagged1蛋白及血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,并进行相关性分析。结果:与正常对照组相比,冠心病组患者血浆Jagged1蛋白[(38.74±10.60)ng/L vs(23.04±8.97)ng/L]及VEGF[(113.98±30.80)pg/L vs(72.73±14.55)pg/L]水平均明显升高(P均0.01)。侧支循环良好亚组与侧支循环不良亚组比血浆Jagged1蛋白[(46.77±8.49)ng/L vs(31.56±6.26)ng/L]及VEGF[(128.10±20.24)pg/L vs(92.43±21.09)pg/L]水平均显著升高(P均0.01)。冠心病患者血浆Jagged1蛋白与VEGF水平呈正相关(r=0.730,P0.01)。多元回归分析显示,Jagged1蛋白(OR=1.318,P=0.000)和VEGF(OR=1.043,P=0.043)是影响CCC形成的独立预测因素。结论:侧支循环良好亚组血浆Jagged1蛋白水平较侧支循环不良亚组明显升高,表明Jagged1蛋白在CCC形成过程中可能起重要作用,这为冠心病患者临床治疗提供新的研究方向。     

MGMT基因导入对真核细胞保护作用的实验研究

目的克隆六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（MGMT）基因并构建表达载体，导入真核细胞表达，研究MGMT对真核细胞保护作用。方法利用RT—PCR克隆人肝细胞MGMT基因并重组构建真核表达载体。脂质体法导入K562细胞及人外周血单个核细胞（PBMNC），用实时定量PCR法检测目的基因的表达。MTT法检测转基因细胞对烷化剂耐药性的改变。结果成功克隆人MGMT基因，转染K562细胞和PBMNC后，转基因组MGMTmRNA表达水平分别是转染空载体组的13．4倍（P〈0．01）和4倍（P〈0．01）。Western blot结果显示MGMT蛋白表达在转基因组中明显高于转空载体组及对照组。耐药性实验结果显示目的基因导入后，K562稳定转染细胞和PBMNC瞬时转染细胞对烷化剂的半数抑制浓度分别提高到原来的7倍和2倍。结论MGMT基因导入可使真核细胞对烷化剂的耐药性得到不同程度的增强，从而对细胞起到保护作用。     

人细胞色素P450酶基因多态性与白血病

白血病发病机制及治疗的相关性研究历来是人们关注的焦点。作为人体内主要I相代谢酶的细胞色素P450酶在血液系统恶性肿瘤发生、发展及转归方面的作用已经成为本领域中新的研究靶点。本文论述基因多态性与恶性肿瘤发生及治疗的相关性．尤其是与血液系统恶性肿瘤的关系，重点介绍国外近年有关细胞色素P450酶基因多态性及其与白血病易感性和治疗的相关研究进展。     

扩张型心肌病慢性心力衰竭患者血浆Periostin蛋白水平的变化

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)慢性心力衰竭(心衰)患者血浆中Periostin蛋白与心衰严重程度的关系。方法:选取84例临床诊断为DCM慢性心衰患者为DCM心衰组,根据纽约心功能分级(NYHA)分为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,30例健康体检者为正常对照组。收集两组的临床资料,超声心动图检测左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室射血分数(LVEF)。酶联免疫吸附法检测各组血浆Periostin蛋白、转化生长因子(TGF)-β1水平,并进行相关性分析。结果:与正常对照组相比,DCM心衰组患者Periostin蛋白、TGF-β1水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。DCM心衰组患者随着心功能恶化,血浆Periostin蛋白、TGF-β1水平逐渐升高,不同心功能患者组间差异均有统计学意义(P0.05)。血浆Periostin蛋白与TGF-β1、BNP呈正相关(r=0.636,P0.05;r=0.580,P0.05)。结论:DCM慢性心衰患者血浆Periostin蛋白水平显著升高,并与TGF-β1、心衰的严重程度关系密切,可能为DCM患者心衰的诊断、治疗及预后提供新的指导方向。