全文获取类型
收费全文 | 140篇 |
免费 | 13篇 |
国内免费 | 7篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 3篇 |
儿科学 | 1篇 |
基础医学 | 18篇 |
口腔科学 | 3篇 |
临床医学 | 14篇 |
内科学 | 8篇 |
神经病学 | 3篇 |
特种医学 | 3篇 |
外科学 | 17篇 |
综合类 | 45篇 |
预防医学 | 22篇 |
眼科学 | 1篇 |
药学 | 10篇 |
中国医学 | 8篇 |
肿瘤学 | 4篇 |
出版年
2023年 | 9篇 |
2022年 | 4篇 |
2021年 | 4篇 |
2020年 | 4篇 |
2019年 | 3篇 |
2018年 | 3篇 |
2017年 | 2篇 |
2016年 | 10篇 |
2015年 | 2篇 |
2014年 | 8篇 |
2013年 | 13篇 |
2012年 | 10篇 |
2011年 | 7篇 |
2010年 | 5篇 |
2009年 | 7篇 |
2008年 | 1篇 |
2007年 | 14篇 |
2006年 | 8篇 |
2005年 | 3篇 |
2004年 | 5篇 |
2002年 | 3篇 |
2000年 | 3篇 |
1998年 | 4篇 |
1997年 | 3篇 |
1996年 | 4篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 1篇 |
1993年 | 1篇 |
1991年 | 5篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 2篇 |
1988年 | 2篇 |
1986年 | 2篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1980年 | 1篇 |
排序方式: 共有160条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 在原核表达系统中对HIVp2 4抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性。方法 利用PCR技术从HIV-1全基因质粒 (B2N)中扩增p2 4抗原基因 ,并克隆入T载体中。通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上 ,用此连接产物转化大肠埃希菌BL2 1,经IPTG诱导 ,表达p2 4抗原。利用固定化金属离子 (Ni2 )配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白。并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、WesternBlot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测。结果 PCR产物约为 6 90bp ,与预期p2 4抗原全基因片段大小一致。重组质粒T-p2 4和pRSET-p2 4经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,其插入的外源基因片段均为 6 90bp。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS PAGE电泳 ,均可见一条约 2 4× 10 3的外源基因表达带 ,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA试验 ,证明基因工程表达的p2 4抗原具有较高的特异性及活性。结论 成功构建了HIVp2 4表达载体pRSET-p2 4 ,并在原核细胞中高效表达 ,其表达产物具有良好的特异性及活性 相似文献
2.
3.
4.
目的:探讨对胃部胃肠间质瘤患者给予3D腹腔镜手术以及开腹手术进行切除治疗的临床效果。方法:选择我院在2017年12月~2018年12月所收治的108例胃肠道间质瘤患者作为本次实验的研究对象,根据临床上所采取的切除治疗的方式不同分为腹腔镜组和开腹组,每组患者分别为54例。腹腔镜组采取3D腹腔镜切除术进行治疗,开腹组采取开腹切除术进行治疗,对比两组患者术后情况。结果:腹腔镜组相关指标均优于开腹组,且对照均存在P0.05表示两组差异于统计学而言有意义。结论:对胃肠间质瘤患者行3D腹腔镜切除术进行治疗,更加利于手术的顺利进行,在一定程度上促进了患者的术后恢复。 相似文献
5.
目的观察在不同滚压参数下,滚压载荷生物反应器对BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化的作用。方法分离2.5月龄新西兰兔BMSCs,培养至第3代后与低熔点琼脂糖复合成凝胶块,并在自制模具中形成直径4 mm、高4 mm的圆柱形BMSCs-琼脂糖复合体。将样本分别在0.4 Hz、3 h/d基本参数下比较压缩量10%、20%、30%(分别为A1、A2、A3组),以及0.4 Hz、20%压缩量基本参数下比较20 min、3 h、12 h滚压时间(分别为B1、B2、B3组)对BMSCs向软骨细胞分化的作用,以静态培养作为对照组。在培养24 h及7、14、21 d时取各组标本进行死活细胞检测、实时定量PCR检测、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量检测及组织学染色观察。结果死活细胞检测:14、21 d时,A1、A2组活细胞比率均显著高于A3组,B1、B2组活细胞比率均显著高于B3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实时定量PCR检测:各实验组7、14、21 dⅡ型胶原及蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);14、21 d时,A1、A2组Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA表达均高于A3组,B1、B2组均高于B3组,差异有统计学意义(P<0.05)。以上指标A1、A2组间及B1、B2组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。GAG含量检测:14、21 d时,A1、A2组GAG含量均显著高于对照组和A3组,B1、B2组GAG含量也显著高于对照组和B3组,差异均有统计学意义(P<0.05);21 d时A1、A2组间差异均有统计学意义(t=2.830,P=0.027)。组织学观察:21 d时,A2组和B2组出现明显蓝染,可见软骨陷窝样结构;而A1、A3组和B1、B3组蓝染效果较差,分布稀少。结论滚压载荷生物反应器在0.4 Hz、20%压缩量、3 h滚压时间参数下,能更有效地促进BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化。 相似文献
6.
强制性使用疗法在慢性失语症康复治疗中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
一般认为大部分言语自发性恢复发生在脑卒中后最初几个星期内[1],到第一年底即完全结束,这一观点现在已遭到怀疑。近年来国内外学者利用强制性使用疗法(constraint-induced therapy,CIT)对慢性失语症患者进行训练,研究取得的进展可能有助于人们更全面和正确地认识慢性失语症的康复治疗。因为一些慢性失语症患者在经过了短期强化训练或长期训练后其结局明显不同。本文试就CIT在慢性失语症康复治疗中的应用及研究进展作一综述。[第一段] 相似文献
7.
8.
9.
10.
安氏隐孢子虫卵囊分离纯化方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立获取纯净的安氏隐孢子虫卵囊外培养模型。方法研究改进分离纯化安氏隐孢子虫卵囊的方法,采用蒸馏水稀释Sheather’s蔗糖溶液配制不同密度的蔗糖溶液,比较不同稀释比的Sheather’s蔗糖溶液漂浮卵囊的效果,并首次比较了蒸馏水和PBS稀释的Sheather’s蔗糖溶液分离纯化卵囊的活性,将两种方法分离纯化的卵囊37℃水浴1h进行脱囊率比较。结果2:1蔗糖溶液(2体积Sheather’s蔗糖溶液与1体积的蒸馏水)分离奶牛粪样中卵囊效果最好。漂浮三次即可获得大量卵囊,回收率为83.70%,三次漂浮的卵囊总数较Sheather’s蔗糖溶液高57.53%。蔗糖溶液多梯度密度纯化法纯化后的卵囊杂质较少,回收率为47.52%。蒸馏水稀释的蔗糖溶液分离纯化卵囊脱囊率为87.87%,PBS稀释的蔗糖溶液分离纯化卵囊的脱囊率为84.71%,差异无统计学意义P〉0.05)。结论2:1蔗糖溶液适用于分离安氏隐孢子虫卵囊,且用蒸馏水代替PBS稀释Sheather’s蔗糖溶分离纯化隐孢子虫卵囊其活性不受影响。可用于体外培养研究。 相似文献