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探讨3‘-甲基-4-二甲氨基偶氮苯诱发大鼠肝癌过程中肝脏磷脂代谢的变化。用3’-Me-DAB诱发Wistar大鼠肝癌,同时辅以低胆碱饮食,TLC分离磷脂组分,Rouser法测定第6,9,12,16,20周肝脏中总磷脂及各磷脂组分含量。结果:发现诱癌组总磷脂和磷脂酰胆碱的含量不断下降,且两者变化一致; 相似文献
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骨纤维结构不良和骨化性纤维瘤的组织病理及免疫组化研究 总被引:1,自引:1,他引:1
对140例骨纤维结构不良和70例骨化性纤维瘤的临床资料及组织病理进行了复习,其中对近期病例中各15例的组织。作了6种有关的免疫组化染色进行观察。本文对骨纤维结构不良和骨化性纤维瘤的诊断、鉴别诊断及其病变的性质进行了讨论。还对6种免疫组化染色在显示某些组织成分,特别对骨连结蛋白在显示骨母细胞及新生骨质的意义作了探讨。 相似文献
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目的 探讨骨肉瘤基因治疗的可行性。方法 采用逆转录病毒介导的HSV-TK基因转移和GCV治疗的方法进行研究。结果 成功构建含HyTK基因的重组逆转录病毒载体DORHyTK;采用DOTAP将其转入PA317细胞中进行包装,筛选,并进行病毒滴度测定。收获病毒上清体外感染骨肉瘤细胞株OS732和SAOS-2。分别用PCR和RNA斑点杂交的方法证明假病毒中不含有复制活性病毒,HSV-TK基因已整合到宿主细胞基因组中,并获得表达,MTT比色法测定结果显示GCV对OS732TK和SAOS-2TK细胞均有明显的杀伤作用。且前者强于后者,旁观者效应在高细胞密度接种条件下强于低细胞密度,在SAOS-2细胞中的作用强于OS732。结论 HSV-TK/GCV基因治疗系统可为骨肉瘤的治疗提供新途径。 相似文献
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骨肉瘤中Rb、p16、CDK4、cyclinD1蛋白的表达及其意义 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 探讨骨肉瘤中Rb、p16、CDK4、cyclinD1的蛋白表达、相互关系及其意义。方法 应用免疫组化方法对40例骨肉瘤组织中Rb、p16、CDK、cyclinD1的蛋白表达状况进行检测。结果 40例骨肉瘤Rb、p16蛋白表达缺失分别为72.5%(29/40和)22.5%(9/40);11例pRb阳性的骨肉瘤中的8例p16阴性,29例pRb阴性的骨肉瘤中28例p16阳性;52.5%(21/40 相似文献
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目的:利用基因工程技术生产人骨形态发生蛋白-1的高保守区多肽, 为进一步产生广谱型BMP-1抗体提供有效的抗原蛋白。方法:通过分析BMP-1类各种分子的基因序列及蛋白结构, 选择其中的一个片段作为目的基因。从人骨肉瘤细胞株Saos-2中提取总RNA, 用RT-PCR扩增目的基因片段并克隆到原核表达载体pMALc2中, 构建成重组质粒BMP-1(322-588aa)-pMALc2。将该重组质粒转化大肠杆菌DH5-α, 经过筛选鉴定获得数个阳性克隆, 再进行DNA序列测定。最后用IPTG诱导宿主菌表达融合蛋白。结果:BMP-1基因片段被成功地克隆到pMALc2载体中, 在IPTG的诱导下能高效表达, 融合蛋白的表达量占细菌蛋白总量的(66-72)%。结论:所获得的重组蛋白包含BMP-1的几个完整的重要结构域(2个CUB区和1个EGF区), 为BMP-1类分子所共有的高度保守区。该重组蛋白作为抗原, 可进一步用于产生能有效、特异地识别人类BMP-1类分子的广谱型BMP-1抗体。 相似文献
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目的:胰腺囊腺癌是一种低度性肿瘤,临床非常少见,本文着探讨其影像学特点及临床应用价值。材料方法:分析1例手术和病理证实的胰腺囊腺癌的影像学的表现,腹平检查7例,上消化道检查8例,B超及CT检查11例。结果:腹部平片上消化道检查可见胃体缓压移位,B超可以显示肿瘤大小,位置轮廓及了解厚薄,分离情况。增强后囊肿不强化,囊壁实性结节及分离均可见明显强化。结论:熟悉胰腺囊腺癌的影像直接间接征象及临床特点,有利于其诊断及鉴别诊断。 相似文献
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目的:将外源性野生型p53基因导入人骨肉瘤细胞株,研究野生型p53蛋白在诱导瘤细胞凋亡中的作用。方法:用DNA转染技术将7重组野生型p53基因PM47质粒导入人骨肉瘤细胞株HOS8603中,用PCR技术监测外源性p53基因在瘤细胞中存在的稳定性;用免疫组化方法检测在地塞米松的诱导下瘤细胞中p53的表达情况;用相差显微镜去观察凋亡瘤细胞的形态特点;用细胞凋亡原位检测技术标记并统计凋亡的瘤细胞数。结果:成功地将重组野性型p53基因PM47质粒导入人骨肉瘤细胞株HOS8603中,在gpt选择培养基中培养两周后,分离生长出阳性细胞克隆;经PCR证实外源性p53基因在瘤细胞内稳定存在并可随瘤细胞分裂而传给子代;当向培养液中加入1μmol/L地塞松(Dex)后,8h即可用免疫组化方法检测到p53蛋白的表达并可观察到瘤细胞出现凋亡的一系列形态学改变,转染后的瘤细胞凋亡率高达90%。结论:当人骨肉瘤细胞株中重组野生型p53基因诱导过表达时,瘤细胞呈现凋亡,本实验为骨肉瘤的基因治疗提供了理论依据。 相似文献
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重组野生型p53基因转染人骨肉瘤细胞株体外实验 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:将外源性野生型p53基因导入人骨肉瘤细胞株,研究野生型p53蛋白在诱导瘤细胞凋亡中的作用。方法:用DNA转染技术将7重组野生型p53基因PM47质粒导入人骨肉瘤细胞株HOS-8603中,用PCR技术监测外源性p53基因在瘤细胞中存在的稳定性;用免疫组化方法检测在地塞米松的诱导下瘤细胞中p53的表达情况;用相差显微镜去观察凋亡瘤细胞的形态特点;用细胞凋亡原位检测技术标记并统计凋亡的瘤细胞数。结 相似文献
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目的:探讨Rb和HSV-TK基因共转染增强HSV-TK/GCV系统“旁观者效应”的可能性及其机制。方法:构建含长度为1.65kb Rb基因的真核表达质粒pcDNA3.1-Rb,用DOTAP将pcDNA3.1-Rb以及携带HSV-TK基因的质粒tgCMV/HyTK分别或共同导入骨肉瘤细胞株OS732。应用RT-PCR和Northern blot检测TK和Rb基因的表达;用细胞计数、流式细胞仪分析和软琼脂克隆形成实验观察细胞的生长状况;用半定量RT-PCR法、Western Blot和罗氏黄荧光传输法检测裂隙连接蛋白基因Connexin43的表达和细胞间裂隙连接信息通讯的能力;用MTT法和混合共培养实验分别检测各种细胞对GCV的敏感性HSV-TK/GCV系统的“旁观者效应”。结果:成功地构建了真核表达质粒pcDNA3.1-Rb;得到三种转基因的细胞株OS732TK、OS732Rb、OS732RbTK;并在mRNA水平检测到OS732TK和OS732RbTK细胞内HSV-TK基因的表达,在OS732Rb和OS732RbTK细胞内存在内源性和外源性Rb基因的表达;与OS732相比,OS732Rb和OS732RbTK细胞的形态发生改变,其生长速度减慢,软琼脂形成集落能力降低,细胞周期阻滞于G0G1期;OS732Rb细胞的Tonnexin43表达和细胞间信息通讯能力增强;仅TK阳性细胞OS732TK和OS732RbTK的存活率与GCV的浓度存在剂量依赖性关系,但在与TK阴性细胞混合共培养实验中,OS732和OS732Rb细胞增显示对GCV的敏感性,在相同处理条件下,OS732Rb细胞的存活率明显低于OS732细胞。结论:Rb基因通过抑制骨肉瘤细胞的生长和提高细胞间信息通讯能力来增强HSV-TK/GCV系统的“旁观者效应”。 相似文献