微小RNA在人髓母细胞瘤中的初步表达分析

目的检测人髓母细胞瘤(MB)与非肿瘤脑组织中微小RNA(miRNA)的表达差异情况,为进一步探讨miRNA参与MB发病的可能分子机制打下基础。方法选取经手术切除的MB组织标本及瘤旁正常小脑组织,分别提取总RNA和小分子RNA,在miRNA微阵列芯片中杂交检测,通过芯片扫描和数据分析,获得该病异常miRNAs表达谱。结果利用miRNA微阵列芯片技术筛选出9个MB的相关miRNAs,其中表达上调4个,表达下调5个。结论miRNA微阵列分析技术是一种快速、高效的研究生物信息的分子生物学技术;筛选出的差异表达miRNAs可能参与MB发病,为此病诊治提供了新的思路,值得进一步研究。     

MiR-21 mediates the radiation resistance of glioblastoma cells by regulating PDCD4 and hMSH2

The purpose of this study was to investigate the molecular mechanism by which miR-21 and its target genes mediate radiation resistance of glioblastoma cells.Real-time PCR was employed to detect miR-21 expression in normal brain tissues,glioblastoma tissues and glioblastoma cell lines (A172,T98G and U87MG).T98G cells were transfected with anti-miR-21 oligonucleotides,or plasmids containing PDCD4 or hMSH2 (PDCD4-pcDNA3 and hMSH2-pcDNA3).The survival curve was obtained to investigate the sensitivity of T98G cells to radiation.Cell apoptosis was measured by using the Caspase-3/7 kit and cell cycle by flow cytometry.Western blotting was performed to detect the expression of hMSH2 and PDCD4 in miR-21-inhibiting T98G cells.The results showed that miR-21 expression in glioblastoma cells and tissues was conversely associated with the radiation sensitivity.Over-expression of miR-21 resulted in radiation resistance,while knockdown of miR-21 led to higher sensitivity of glioblastma cells to radiation.After miR-21 knockdown,the apoptosis of T98G cells was significantly increased and the G2 phase arrest was more significant.In addition,miR-21 knockdown increased the expression of endogenous PDCD4 and hMSH2,which contributed to the apoptosis and G2 arrest of T98G cells.The findings suggested that miR-21 may mediate the resistance of glioblastoma cells against radiation via its target genes PDCD4 and hMSH2.MiR-21 and its target genes may be used as potential molecular targets for clinical radiotherapy sensitization in the future.     

合并乙肝的实体瘤患者化疗期间预防性护肝治疗的意义研究

目的评价实体瘤患者化疗过程中预防性护肝治疗对患者肝功能损害的影响,评价预防性护肝治疗的价值。方法收集2008年2月～2012年7在我院接受化疗的实体瘤患者317例,并根据患者是否接受预防性护肝药物治疗、乙型肝炎病毒表面抗原（HBSAg）及HBV DNA状态进行分组。评价化疗后肝功能损伤的发生率及程度。结果 HBV DNA阳性乙肝患者肝功能损害发生率明显高于未合并乙肝患者（61.5%vs 34.0%,P〈0.01）;预防性使用护肝药物后,HBV DNA阳性乙肝患者肝功能损害发生率显著减少（61.5%vs 35.2%,P〈0.05）,与未合并乙肝感染的患者类似（35.2%vs 29.8%,P〉0.05）;其中轻度（Ⅰ、Ⅱ级）肝功能损害的发生率下降尤为显著（51.9%vs 28.3%,P〈0.05）。而对于未合并乙肝或HBV DNA阴性乙肝患者,预防性使用护肝药物也观察到肝功能损害发生率的下降趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在HBV DNA阳性的乙肝患者化疗过程中,建议在抗乙肝病毒药物基础上,预防性使用护肝药物治疗;而在HBV DNA阴性的乙肝患者以及无乙肝感染的患者中,预防性护肝治疗的作用尚有待进一步研究明确。     

度洛西汀对多西他赛化疗所致大鼠神经病理性疼痛的影响

目的 研究度洛西汀对多西他赛化疗所致大鼠神经病理性疼痛的作用。方法 24只SD雄性大鼠随机分为4组（n=6）：正常对照组、度洛西汀组、多西他赛模型组及度洛西汀治疗组。在治疗后第8天,检测大鼠的机械性痛阈、热痛阈、冷痛阈,以及L4~6脊髓背根神经节（dorsal root ganglia, DRG）P物质（substance P, SP）的释放。结果 多西他赛能够产生机械性痛觉异常（P=0.009）、热痛觉过敏（P<0.001）、冷痛觉异常（P<0.001）,以及L4~6脊髓DRG的SP释放（P=0.018）。而连续8天口服度洛西汀能有效降低多西他赛导致的神经病理性疼痛,减轻机械性痛觉异常（P=0.037）,热痛觉过敏（P=0.001）和冷痛觉异常（P=0.002）,但并没有减少P物质的释放（P=0.653）。结论 度洛西汀可能是一种潜在的有效减轻化疗诱导神经病理性疼痛的药物。     

光学表面监测系统在胸部肿瘤调强放疗的初步应用

目的 探讨光学表面监测系统在胸部肿瘤调强放疗的摆位精度及其应用价值。方法 选取28例胸部肿瘤患者,应用体表标记与激光灯进行治疗前摆位,治疗前行锥形束CT（CBCT）扫描,扫描时通过光学表面监测系统获取表面影像,并与参考影像配准,记录x（左右）、y（头脚）与z（前后）轴的平移误差与旋转误差;扫描后CBCT图像与计划CT图像配准并记录x、y与z轴的平移误差与旋转误差,校正误差后治疗。应用Pearson法分析两组摆位误差的相关性,计算两组摆位误差的系统误差（Σ）与随机误差（σ）;应用Bland-Altman法评估两种影像系统的一致性,并计算95%的可信区间。结果 两组摆位误差有较好的相关性,相关系数在x、y、z轴分别为0.79、0.62、0.53,光学表面监测系统（OSMS）的Σ/σ（mm/mm）在x、y与z轴分别为0.7/1.5、0.9/1.8、0.9/1.5;CBCT的Σ/σ（mm/mm）在x、y与z轴分别为0.8/1.6、1.3/1.9、0.7/1.5;95%的可信区间在x、y与z轴的平移方向分别为（-2.0~2.3）、（-3.4~3.6）与（-3.3~2.4）mm,旋转方向分别为（-2.0~1.6）°、（-2.0~1.4）°与（-1.6~1.6）°。结论 OSMS是一种有效的图像引导工具,能快速准确地验证患者位置,提高摆位精度,可用于胸部肿瘤患者调强放疗的治疗摆位。     

手指操联合温针灸治疗乳腺癌化疗致周围神经病变的疗效观察

目的观察手指操联合温针灸治疗乳腺癌化疗致周围神经病变(CIPN)患者的疗效。方法采用随机数字表法将48例乳腺癌化疗致CIPN患者分为观察组及对照组, 每组24例。2组患者均给予常规干预, 包括练习写字、在家人陪伴下快走及手指操锻炼等, 观察组患者在此基础上辅以温针灸治疗, 每周治疗5 d为1个疗程。于治疗前、治疗1个月后分别采用改良Barthel指数量表(MBI)、Berg平衡量表(BBS)、癌症治疗功能评估/妇科肿瘤组神经毒性问卷(FACT/GOG-NTx)、美国国立癌症所-药物常见毒性分级标准(NCI-CTC)对2组患者疗效进行评定。结果治疗后2组患者MBI、BBS及FACT/GOG-NTx评分均较治疗前明显改善(P<0.05), 并且观察组患者MBI、BBS及FACT/GOG-NTx评分[分别为(88.75±3.52)分、(52.75±3.38)分及(15.41±5.27)分]亦显著优于对照组水平(P<0.05)。治疗后2组患者周围神经毒性分级程度均低于治疗前水平(P<0.05), 并且观察组周围神经毒性分级程度亦较对照组明显减轻(P<0.05)。结论手指...     

原代胃癌干细胞CD44表达意义探讨

目的 肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)在恶性肿瘤的发生发展中起着重要作用,且是肿瘤耐药及复发的根源.本研究探讨CSCs表面标记蛋白CD44在分离及鉴定胃癌干细胞中的重要作用.方法 收集2015-11-06-2015-12 01华中科技大学同济医学院附属同济医院3例胃癌患者手术标本.首先采用胶原酶消化法获取胃癌细胞,部分细胞分别贴壁及悬浮培养,并采用免疫荧光及流式分析的方法检测胃癌球形体中CD44的表达情况.部分细胞采用流式细胞仪分选得到CD44+及CD44胃癌细胞,并通过无血清悬浮培养法比较两群细胞的球形体形成能力.结果 免疫荧光显示,CD44蛋白在球形体中高表达;流式分析发现,贴壁的原代胃癌细胞中CD44+细胞的比例为(30.73±7.6)％,而球形体中CD44+细胞的比例高达(56.4±5.58)％,差异有统计学意义,P=0.009.球形体形成实验结果表明,与CD44-细胞相比,CD44+胃癌细胞具有更强的球形体形成能力,1 000个CD44+及CD44-胃癌细胞分别形成(14.33±2.52)和(1.67±0.58)个球形体,差异有统计学意义,P=0.001.通过比较发现,球形体培养对胃癌干细胞的富集效率为0.3％,而CD44对胃癌干细胞的富集效率为1.4％.结论 CD44是胃癌干细胞的表面标记蛋白,其可能成为胃癌靶向治疗的可靠靶标.     

体验式教学在新护士临终关怀教学中的应用研究

目的 观察体验式教学法在新护士临终关怀教学中应用的效果。 方法 选取2015年9-12月华中科技大学同济医学院附属同济医院新进护士80名,将其分成常规教学组和体验式教学组。常规教学组采用传统的教学方法,即由一位具有教学资格的临床护士带教一名新护士,带教护士根据教学任务就临终患者临床典型症状、常见护理问题进行讲述和分析的方法进行教学。体验式教学组则按照体验式教学法的要求将护士分组,每个小组由护士自荐或推选出1名组长,负责组织小组成员病例收集、查阅资料、护理实施等。每组护士在经过体验式教学法培训后的临床指导老师的指导下,模仿责任护士对患者进行全方位的护理体验,护理体验中,指导老师定期组织护士分析讨论体验中存在的问题并加以改进。教学完成后,分别观察2组护士在师生交流、表达沟通、护患关系、团队合作、评判性思维、护士满意度的差异,并评估2组护士护理的患者满意度的差异。 结果 体验式教学组中有85.0%、82.5%、77.5%的护士认为体验式教学能有效提高护士自身表达沟通能力、团队合作能力、评判性思维能力,护士对教学方式的满意度明显高于对照组(P<0.05)。同时,体验式教学组患方的满意度也明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。 结论 在新护士的临终关怀教学中使用体验式关怀教学法能有效提高教学效果,并能有效提高患方满意度,值得在临床的护理带教中推广。      

曲妥珠单抗抑制辐射诱导下的乳腺癌细胞系SKBR3细胞的Her-2核转运过程研究

 【摘要】　目的　观察曲妥珠单抗对乳腺癌SKBR3细胞中Her-2的入核过程和核内DNA损伤修复的影响,探讨曲妥珠单抗的放疗增敏机制。方法　克隆形成实验检测曲妥珠单抗对辐射后细胞存活分数（SF）的影响,荧光共聚焦观察曲妥珠单抗对DNA 双链断裂（DSB）损伤标志物γH2AX表达和Her-2核转运过程的影响,免疫印迹法检测曲妥珠单抗对辐射诱导细胞的胞核内Her-2蛋白、DNA依赖蛋白激酶（DNA-PK）功能亚单位DNA-PKcs的表达量的改变。结果　细胞克隆形成实验中,曲妥珠单抗干预组接受2 Gy时SF（SF2）为0.321±0.022,单纯照射组为0.547±0.046（P＝0.000）;辐射后γH2AX的荧光灰度表达提高,曲妥珠单抗干预组为85.40±25.63,单纯照射组为18.53±44.32（P＝0.000）;Her-2蛋白入核灰度表达降低,单纯照射组为52.80±19.74,曲妥珠单抗组为21.41±10.55（P＝0.000）;免疫印迹实验表明曲妥珠单抗干预组辐射后早期核内DNA-PKcs及Her-2的表达下降。结论　曲妥珠单抗能够抑制辐射诱导的Her-2入核过程,并减少核内Her-2和DNA-PKcs的表达,从而可能提高辐射后早期的DSB损伤。