固相配体文库降低血清高低丰度蛋白浓度差异

目的 探讨固相配体文库技术富集血清低丰度蛋白及提高质谱鉴定低丰度蛋白敏感性.方法 3组混合血清标本采用蛋白富集珠(ProteoMiner)处理,一维或二维电泳图谱分析比较处理前后血清图谱中的差异条带或蛋白质斑点,并于处理后血清的二维电泳图谱中显著增加的蛋白质斑点进行高效液相色谱法电喷雾串联质谱鉴定.结果 一维及二维电...     

Foxp3 对肺癌细胞增殖及成瘤的影响

目的:研究转录因子Foxp3 在肺癌细胞中的高表达对肺癌细胞增殖及成瘤的影响。方法:利用脂质体转染法建立稳定高表达Foxp3 的NCIH-hFoxp3 肺癌细胞株。MTT 法观测NCIH-hFoxp3 及对照细胞的增殖。ELISA 法检测NCIH-hFoxp3 及对照细胞IL-8、IL-10 的分泌。建立移植瘤小鼠模型,观察成瘤情况。结果:成功建立高表达Foxp3 的NCIH-hFoxp3肺癌细胞株;与阴性对照相比,NCIH-hFoxp3 细胞增殖减慢,但成瘤能力强。NCIH-hFoxp3 细胞培养上清IL-8 表达量减低,IL-10 表达量升高。结论:高表达Foxp3 的肺癌细胞可能通过表达细胞因子改变局部生长的微环境,逃逸免疫监视,而促进肿瘤细胞的成瘤和发展。     

急性心肌梗死113例溶栓治疗和介入治疗效果分析

目的探讨经皮冠脉内介入治疗(PCI)和静脉溶栓治疗对113例急性心肌梗死(AMI)患者的疗效差异。方法将开封市中心医院急诊科2012年1月份至2013年12月份收住的113例急性心肌梗死患者随机分为2组,PCI组77例,溶栓组36例。比较不同组患者的抢救有效率,住院期间严重并发症的发生率,随访6mon梗死复发率。结果 PCI组的抢救有效率高于溶栓组,PCI组住院期间的严重并发症发生率明显低于溶栓组,PCI组6mon随访期间梗死复发率明显低于溶栓组,有统计学意义(P<0.05)。结论 AMI时的PCI治疗优于溶栓治疗,适合临床推广。     

形态学实验教学体系的改革及实践

随着医学教育的发展和教育改革的不断深化,"建特色课程,育创新人才"是课程建设的主要目标。发挥学生的主观能动性,培养和提高实践能力和创新意识,从而提高教学质量就成为实验教学及加强素质教育的关键。为此,开设一门形态学实验课程,设计涵盖多学科的形态学基础性实验、综合性实验和创新性实验,使学生学到综合性、系统性的人体形态学知识。形态学实验课程的开设为培养学生分析问题、解决问题的能力,建立医学科学思维方式,开发创造能力搭建了一个平台。     

支持向量机预测食管鳞癌患者术后生存期

目的 应用支持向量机（support vector machine, SVM）建立食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）术后生存期预测模型并评估该模型判断ESCC生存期的效能。方法 随访168例接受根治性手术治疗的ESCC患者,分析ESCC临床病理特征和14-3-3σ、热休克蛋白gp96、巨噬细胞移动抑制因子（migrationinhibitory factor, MIF）等3个蛋白的表达规律与ESCC生存期的相关性;应用Matlab软件进行SVM运算,对训练组128例ESCC患者建立最优预后分类模型ESCC-SVM,并用测试组40例患者验证分类效率,ROC曲线分析ESCC-SVM及其他预后相关因子对高低死亡风险ESCC的识别能力。结果 ESCC-SVM由性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期、14-3-3σ和gp96等7个最优属性组成,该模型区分训练组和测试组ESCC五年整体生存率的最大AUC分别为0.96、0.86、准确率分别为97.7%、90.0%,明显优于目前临床应用的TNM分期（准确率分别为62.5%、67.5%）及其他各临床病理属性。Cox多因素比例风险回归模型分析发现年龄、T分期、gp96和ESCC-SVM是影响ESCC术后生存期的独立因素。ESCC-SVM与性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期和14-3-3σ均显著相关。结论 本研究建立的ESCC-SVM为预后评估、临床治疗方案选择及个体化治疗提供了理论依据。     

SELDI-TOF/MS分析原发性肝癌TACE治疗前后血清蛋白质差异表达谱

目的分析原发性肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗后血清蛋白质指纹图谱的变化。方法应用SELDI-TOF/MS技术和IMAC 30蛋白质芯片采集50例肝癌患者TACE治疗前后肝癌患者的血清蛋白质质谱,Biomarker Wizard软件分析差异表达蛋白质峰,应用支持向量机(support vector machine,SVM)建立TACE治疗前后分类模型,ROC评价各差异蛋白质峰和SVM分类模型的分类效率。结果在0~20 000m/z质荷比范围内,共采集到199个蛋白质峰,Biomarker Wizard软件鉴定出13个差异表达蛋白质峰(P<0.05),包括TACE治疗24 h后7个高表达蛋白质峰和6个低表达蛋白质峰。2 883、11 535和11 687等3个蛋白质峰区分TACE治疗前后HCC的敏感性和特异性分别为80%、76%、62%和80%、60%、62%,AUC为0.8;SVM分类模型区分TACE治疗前后HCC的敏感性和特异性均为100%。结论应用SELDI-TOF/MS技术可分析TACE治疗后血清差异表达蛋白质谱,SVM分类模型能有效区分TACE治疗前后HCC。     

二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白

目的 鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。 方法 采用刀豆凝集素A(ConA)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱、生物信息学等技术鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证了转录调控肿瘤蛋白(TCTP)、上皮细胞黏附分子（EpCAM）和膜联蛋白A2（annexin A2）在肝永生化及HCC细胞和HCC及癌旁组织中的表达规律,体外侵袭实验检测TCTP沉默后对SNU449的侵袭力影响。 结果 质谱、生物信息学等技术共鉴定出42个差异表达的蛋白质分子/异质体（HCC细胞中高、低表达的蛋白/异质体分别为14个、28个）,代表32个蛋白质分子,其中的22个蛋白含有至少1个N糖基化位点（NetNGlyc 1.0预测）。这些差异表达的蛋白主要参与氧化还原内稳态维系、碳水化合物/能量代谢、糖酵解、抗凋亡等生物学过程。Western blotting检测表明,TCTP、EpCAM和annexin A2在6个肝癌细胞系PLC5、HepG2、SNU449、Huh7、HCC7721和SNU473及肝癌组织中表达显著升高,siRNA介导的TCTP沉默明显抑制了HCC细胞系SNU449的体外侵袭能力。 结论 TCTP、EpCAM和annexin可能参与了HCC发生发展过程,TCTP可能成为HCC靶向治疗的分子靶点之一。     

应用蛋白质组技术筛选人食管癌细胞系9706顺铂耐药相关蛋白

目的应用蛋白质组技术筛选人食管癌(esophageal cancer,EC)顺铂耐药相关蛋白。方法采用顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)浓度递增法、间歇作用方式建立EC9706顺铂耐药细胞系(EC9706/CDDP),应用细胞培养稳定同位素标记(cell culture and stable isotope labeling,SILAC)、质谱(mass spectrometry,MS)筛选和鉴定食管癌耐药相关的蛋白。结果共鉴定出耐药相关的74种差异表达蛋白,其中53种在EC9706/CDDP中表达显著升高和21种表达明显降低。结论筛选的EC9706/CDDP耐药相关蛋白对进一步阐明肿瘤多药耐药分子机制具有重要理论意义和应用价值,并为逆转多药耐药表型的药物设计提供了新的分子靶点。