奈达铂对裸鼠MGC-803胃癌移植瘤抑制作用及对p53基因表达影响

目的 奈达铂(Nedaplatin,NDP)是第2代铂类化合物,抗肿瘤的机制与顺铂(Cisplatin,DDP)相同,其肾脏和胃肠道等不良反应均小于DDP,且无需水化,使用方便.本研究探讨NDP对裸鼠MGC-803胃癌移植瘤的抑制作用及对p53基因表达的影响.方法 制备MGC-803胃癌荷瘤裸鼠模型,MGC-803人胃癌细胞株接种裸鼠约1周时间,待肿瘤生长至直径约5～9 mm随机分为空白对照组、DDP组和NDP低、中和高剂量组,每组8只.分别予以腹腔注射生理盐水、顺铂、不同剂量奈达铂(1.0、2.0和3.0 mg/kg),采用蛋白质印迹法及RT-PCR法检测瘤体中p53基因的表达.结果 空白对照组、DDP组和NDP低、中和高剂量组p53 mRNA表达量分别为0.297±0.024、0.892±0.098、0.444±0.016、0.561±0.034和0.585±0.021.空白对照组、DDP组和NDP低、中和高剂量组p53蛋白表达量分别为0.295±0.027、0.541±0.032、0.316±0.034、0.408±0.028和0.525±0.041.p53mRNA及蛋白在DDP组和NDP组相对表达量均高于空白对照组,P＜0.05.与DDP组对比,p53 mRNA在NDP组均降低,P＜0.05;p53蛋白表达在NDP低剂量组和NDP中剂量组中均降低(P＜0.05),而在NDP高剂量组中表达差异无统计学意义,P＞0.05.NDP不同浓度化疗组间比较,p53 mRNA及蛋白表达水平呈量效关系,即随着药物剂量增大,其表达量增高.结论 NDP能增加MGC-803胃癌荷瘤裸鼠肿瘤组织p53 mRNA及蛋白表达水平,但与DDP相比未见明显优势.     

胃癌组织TGF-β对miR-200c/141表达影响的研究

目的 TGF-β能够诱导肿瘤细胞发生上皮间质转化,促进肿瘤发生侵袭转移.miR-200c/141能够抑制上皮间质转化的发生.但TGF-β在胃癌中的表达情况及其对miR-200c/141表达影响尚不清楚.本研究旨在探讨胃癌组织中TGF-β表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系,及对miR-200c和miR-141表达影响.方法 收集河北医科大学第四医院普外科2012-05-01-2013-01-01胃癌根治性手术切除标本64例,采用qRT-PCR技术检测TGF-β、miR-200c及miR-141在胃癌组织和配对癌旁非癌组织中的表达.分析TGF-β表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系及与miR-200c和miR-141水平的相关性.TGF-β处理胃癌细胞株SGC-7901,观察其对miR-200c和miR-141表达的影响.结果 TGF-β在胃癌组织中的表达上调率为66.67%,其在胃癌组织中的表达显著高于癌旁非癌组织[Median,Interquartile Range(2.50,2.43:0.84,0.42);P=0.005].miR-200a、miR-200b、miR-429、miR-200c和miR-141在胃癌组织中的表达下调率分别为53.13%、48.44%、50.00%、78.13%和76.19.miR-200c和miR-141在胃癌组织中的表达显著低于癌旁非癌组织,均P<0.001.miR-200c和miR-141的表达存在正相关关系,r=0.840,P<0.001.TGF-β表达水平与miR-200c和miR-141的表达水平呈显著负相关关系,均P<0.001.TGF-β能够诱导胃癌细胞株SGC-7901中miR-200c和miR-141表达显著降低.TGF-β的表达水平与淋巴结转移情况及脉管瘤栓情况存在显著相关性,与患者性别、年龄、组织学分级、TNM分期、肿瘤侵袭深度和肿瘤远处转移情况无相关性,均P>0.05.     

miR-21与消化系统肿瘤

microRNA（miRNA）是一类内源性非编码蛋白短链RNA,参与细胞增殖、分化、凋亡等多种重要活动的调控。近来研究发现miRNA具有癌基因或抑癌基因样作用,参与多种恶性肿瘤的演进,是肿瘤发生、发展过程中的重要分子,其中miR-21最受关注。miR-21在消化系统肿瘤如食管癌、胃癌、肝癌、胆管癌、胰腺癌、结直肠癌等的细胞或组织中表达上调,发挥着类似于癌基因的作用。miR-21通过对靶基因的调控,增强了肿瘤细胞的增殖、浸润及转移能力,并与消化系统肿瘤患者的无复发时间与总生存时间密切相关。目前体外研究证实,miR-21抑制物能够提高恶性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,使化疗药物的杀伤肿瘤效果更加明显,而miR-21类似物,可抵消一部分化疗药物的疗效,从而提示抑制miR-21的表达或阻碍miR-21与靶基因的相互作用在消化系统肿瘤的治疗中具有广阔的应用前景。本文就miR-21在消化系统肿瘤的调控机制、增殖与凋亡、侵袭、耐药与转移中的作用,及其临床价值作一综述。      

非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体突变与血清癌胚抗原和糖类抗原检测的关系

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA125、CA199)的关系,研究其对靶向治疗的价值。方法选择非小细胞肺癌患者193例,术前行血清CEA、CA125、CA199检测作为备用数据,术后对标本行EGFR检测,分析CEA、CA125、CA199与EGFR基因突变的关系及临床意义。结果全组患者中发生EGFR基因突变者共83例,基因突变率为43.0%;EGFR基因突变在女性、非吸烟及腺癌患者多见(P0.05);EGFR基因突变与CEA值呈正相关(P0.05);EGFR与CA125、CA199无相关性(P0.05)。结论非小细胞肺癌EGFR基因突变在女性、非吸烟及腺癌患者中多见,其突变与血清CEA水平升高有关。     

肠道弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的临床病理特征分析

目的:探讨肠道弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的临床病理特征。方法:回顾性分析2007年1月至2014年10月在山东第一医科大学附属济南人民医院确诊的136例DLBCL患者的临床特点、病理形态、免疫表型及EBER原位杂交等资料。共获取136例肿瘤样本,根据肿瘤部位分为十二指肠23例,回盲部63例,其他小肠29例,直肠7例和其他大肠14例。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并行Log-rank检验。结果:与肠道其他部位比较,回盲部和十二指肠以外的小肠部位的DLBCL患者主要为男性(P=0.042),国际预后指数较低(P=0.001),局限期肿瘤占比较高(P=0.015);回盲部乳酸脱氢酶升高的发生率更高(P=0.007),肠梗阻或穿孔率更高(P<0.001)。回盲部及其他小肠部位的DLBCL患者的5年总生存率、5年无进展生存率高于其他部位,但比较差异无统计学意义(P=0.135,0.459)。50%肠道DLBCL为生发中心B细胞样亚型。136例肿瘤样本中低度恶性B细胞淋巴瘤占比为21%,回盲部及其他小肠标本均占低度恶性B细胞淋巴瘤的29%,与其他部分比较差异有统计学意义(P=0.025)。136例DLBCL肿瘤样本中约16%表达滤泡性淋巴瘤,无黏膜相关淋巴组织淋巴瘤表型表达。十二指肠DLBCL的EBER1阳性率明显高于其他部位(5/23,22%vs 2/63,3%,P=0.001)。结论:肠道DLBCL以男性为主,回盲部为最常见的发病部位。回盲部和十二指肠以外的小肠DLBCL患者国际预后指数低,局限期肿瘤比例高,乳酸脱氢酶水平低,肠梗阻或穿孔的发生率高,惰性淋巴瘤发生率低。十二指肠DLBCL的EBER1阳性率较高。     

R-CDOP方案治疗初治DLBCL伴预后不良因素患者的疗效及安全性

目的:探讨R-CDOP方案对初治DLBCL伴预后不良因素患者临床疗效的影响。方法:收集并回顾性分析本院2013年10月-2018年2月收治的初治DLBCL共94例临床资料。均给予患者R-CDOP方案治疗,统计疗效、生存获益及安全性指标,并根据临床特征进行总生存(OS)和无进展生存(PFS)分析。结果:94例患者经治疗后,CR共73例,PR共14例,SD 2例,PD 4例,ORR为92. 55%; 1年OS率和PFS率分别为94. 68%(89/94),85.11%(80/94),中位OS和PFS均未达到。不同年龄、Ann-Arbor分期、IPI评分、结外肿物数量、肿物直径、Ki-67、LDH水平及组织受累情况、患者累积OS率和PFS率比较,均无显著性差异(P 0. 05);结外肿物0-1个和≥2个患者的1年OS率和PFS率比较差异无显著性(P 0. 05);肿物直径7. 5和≥7. 5 cm患者1年OS率和PFS率比较差异无显著性(P 0. 05)。结论:对初治DLBCL伴预后不良因素患者采用R-CDOP方案治疗可有效改善早期疗效,延长生存时间,且安全性良好,但远期预后仍有待观察.     

DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷的抗胃肠道肿瘤机制研究

目的观察DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对胃癌细胞生长的影响。方法将野生型P53人胃癌细胞株AGS细胞,加入不同浓度的5-Aza-CdR,体外培养至不同时间。MTT法检测细胞增殖活性;平板细胞克隆形成实验检测细胞长期增殖活性(0~2.5μM);流式细胞仪检测细胞周期变化(25μM,0、12、48、96 h);Annexin V/PI双染实验检测细胞凋亡情况(2.5μM,0、12、48、96 h);比色法检测Caspase-3活力、Western blot检测Caspase-3前体蛋白及PARP(poly ADPribose polymerase,PARP)蛋白的含量(2.5μM,0、12、48、96 h)。结果随着5-Aza-CdR浓度增加,对肿瘤细胞的抑制作用亦增强,在50μM作用72 h时,细胞存活率达最低值(31.9%);随着药物处理时间的延长,胃癌AGS细胞凋亡增多,96 h的2.5μM 5-Aza-CdR作用下,细胞的生长抑制达到了最高峰(44.4%),且其抑制作用表现为浓度和时间依赖性。5-Aza-CdR对肿瘤细胞长期生长有影响,克隆形成抑制率呈线性增加。流式细胞仪分析结果显示,随5-Aza-CdR作用时间延长,G2期细胞比例从0 h的(5.7±0.2)%增加到96h的(28.5±0.2)%。随着药物作用时间的累加,其凋亡率逐渐增加,各时间组的细胞凋亡率与空白对照组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,Caspase-3活力在药物处理48、96 h后显著提高(P<0.05),但12 h AGS细胞的Caspase-3活力无变化;48 h Caspase-3前体比12 h和未用5-Aza-CdR时明显减少,96 h减少最为明显;PARP在AGS细胞内经5-Aza-CdR作用48 h后亦被活化,96 h后几乎检测不到PARP的存在。结论 5-氮杂-2’-脱氧胞苷,能增强肿瘤细胞对化疗药的敏感性,可作为一种有效的抗胃肠道肿瘤药,。     

CXCL13激活Akt促进肺癌放疗抵抗CSCD

目的探讨CXCL13在肺癌放疗抵抗中的作用及分子机制。方法利用公共数据库分析了CXCL13和CXCR5在肺癌组织中的表达水平,及其表达水平与放疗患者预后的关系。Western blot检测不同浓度CXCL13和Akt抑制剂LY294002对人肺癌H1975细胞Akt表达活化的影响;CCK-8法、流式细胞术和克隆形成实验检测CXCL13和LY294002对辐射处理后H1975细胞增殖、凋亡、克隆形成能力的影响。结果肺癌组织中CXCL13和其受体CXCR5表达水平明显高于正常组(P<0.003),CXCL13高表达与患者不良进展后生存期(PPS)密切相关。100 ng∕ml CXCL13处理辐射后的H1975细胞,细胞增殖水平显著高于对照组(P=0.015),细胞凋亡水平显著低于对照组(P=0.001),细胞克隆形成能力显著高于对照组(P=0.014);100 ng∕ml CXCL13显著激活Akt;8 Gy辐射处理后,20μg/ml的LY294002联合CXCL13处理组的细胞增殖水平显著低于CLCX13单独处理组(P=0.019),细胞凋亡水平显著高于CLCX13单独处理组(P=0.003),20μg/ml的LY294002联合CXCL13处理组的细胞克隆形成能力显著低于CLCX13单独处理组(P=0.001)。结论CXCL13通过激活Akt介导肺癌放疗抵抗。