焦炉工血清ras P21水平和外周血淋巴细胞SCE率检测

目的:为了解接触焦炉逸散物职业性人群遗传效应的改变,从分子水平揭示焦炉逸散物的遗传毒作用.方法:对25名焦炉工和12名正常对照分别检测了血清P21和外周血淋巴细胞姐妹染色单体互换(SCE)率.结果:发现焦炉工P21水平(3 774.2)、SCE率(11.43)明显高于对照组P21水平(1 270.7)和SCE率(6.37);焦炉工中,炉顶工血清P21均值(4 377.5)高于其它工种(3 300.1),炉顶工SCE(13.51)明显高于其它工种(10.07);对焦炉工按是否吸烟进行比较,未发现组间P21和SCE有差异显著性.结论:提示焦炉逸散物具有较强的遗传毒理学效应,可提高机体癌蛋白P21水平和SCE频率.     

IGF-1与矽肺纤维化的关系

目的了解胰岛素样生长因子１（ＩＧＦ１）与矽肺纤维化的关系。方法用免疫组化（ＳＡＢＣ法）技术对大白兔染石英尘后９０天、１８０天兔肺组织ＩＧＦ１表达及矽结节数目进行研究。结果染尘后９０天、１８０天兔肺组织ＩＧＦ１阳性表达率分别为７０％和１００％（Ｐ＜００１）,染尘后９０天、１８０天兔肺组织矽结节平均数分别为１９８±２０和３０３±１１（Ｐ＜０００５）,肺组织ＩＧＦ１阳性表达强度与肺纤维化程度存在明显相关（ｒ＝０６８５７）。结论ＩＧＦ１可能在矽肺纤维化形成过程中发挥重要作用。     

吸入式气管滴注法的建立

目的:建立一种廉价、高效的呼吸道给药或染毒方法。方法:24只雄性BALB/c小鼠随机平均分为两组,分别进行鼻腔滴注和吸入式气管滴注。24只雄性SD大鼠随机平均分为两组,分别给予非暴露式气管滴注和吸入式气管滴注。小鼠每只滴注50μL生理盐水,大鼠每只滴注100μL生理盐水;每组中取1只动物按相应方法滴注用生理盐水配制的含体积分数50%的蓝墨水,解剖观察肺部形态,评价滴注效果;记录操作时间(从麻醉结束至滴注完成)和成功率。结果:小鼠鼻腔滴注的操作时间为(92.6±5.4)s,吸入式气管滴注操作时间为(25.2±4.0)s;大鼠非暴露式气管滴注操作时间为(102.6±6.5)s,吸入式气管滴注操作时间为(39.9±3.3)s;吸入式气管滴注操作时间均明显较短(t=35.042、29.849,P<0.001)。吸入式气管滴注组小鼠和非暴露式气管滴注组大鼠的肺组织散在分布蓝色印迹,而鼻腔滴注组小鼠的肺部着色不明显;鼻腔滴注和吸入式气管滴注的成功率为100%,而非暴露式气管滴注的成功率为83.7%。结论:吸入式气管滴注兼具廉价、快捷、无创、高效的优点,可广泛应用于呼吸道给药或染毒实验以及疾病模型的建立。     

苦瓜核糖体失活蛋白MAP30基因的表达及特性分析

目的:克隆苦瓜MAP30蛋白基因的cDNA序列,并在体外进行原核表达和纯化,体外测定MAP30对镰刀菌的抑制作用并测定MAP30基因的表达模式.方法:利用RT-PCR技术扩增861 bp的苦瓜蛋白MAP30基因编码区序列,克隆至pMD18-T载体.构建苦瓜MAP30原核表达质粒pET-28a-MAP30,SDS-PAGE和Western blot检测MAP30的表达.采用镍离子亲合层析纯化MAP30,并采用真菌抑制实验检测对镰刀菌的抑制作用,Northern blot检测其表达模式.结果:克隆片段与基因库所登录的序列一致,表达的MAP30蛋白相对分子质量约为30 000,MAP30体外能抑制镰刀菌的生长,镰刀菌能诱导MAP30基因的表达.结论:MAP30基因可能参与植物早期的过敏反应并在植物的抗病中发挥重要的作用.     

煤焦沥青烟提取物致大鼠肺泡巨噬细胞DNA损伤作用

目的　研究煤焦沥青烟提取物致大鼠肺泡巨噬细胞 (AM )DNA损伤作用。方法　将大鼠肺泡巨噬细胞分 4组与不同浓度的煤焦沥青烟提取物共育 1h后 ,采用单细胞凝胶电泳技术检测大鼠肺泡巨噬细胞DNA断裂情况。结果　单细胞凝胶电泳后 ,对照组肺泡巨噬细胞无明显细胞拖尾现象 ,而经不同浓度的煤焦沥青烟提取物处理后 ,AM细胞有明显的拖尾现象 ,且随煤焦沥青烟提取物浓度增加 ,AM细胞彗星率上升 ,各组间差异有高度显著性 (P <0 .0 0 1) ,而且损伤的严重程度与作用物浓度呈相关关系 (Spearman相关系数为 0 .6 73,P <0 .0 0 1)。结论　煤焦沥青烟提取物作用于大鼠肺泡巨噬细胞可引起DNA链的断裂 ,单细胞凝胶电泳适于检测肺泡巨噬细胞的DNA链断裂     

苦瓜蛋白MAP30对大肠癌细胞株LoVo细胞生长及凋亡的影响

目的:观察苦瓜蛋白MAP30对大肠癌细胞株LoVo细胞生长及凋亡的影响.方法:采用MTT比色法分别观察20、40、60、80和100 mg/L MAP30处理48 h及40 mg/L MAP30处理24、36、48和72 h对LoVo细胞生长的影响,计算细胞生长抑制率.采用流式细胞仪检测40 mg/L MAP30处理24 h对LoVo细胞凋亡的影响.采用Northern blot和Western blot分别检测40 mg/L MAP30作用于LoVo细胞0～120 h,细胞bcl-2和bax基因和蛋白的表达.结果:MAP30可呈剂量、时间依赖性抑制LoVo细胞的生长(F=128.3,107.5,P＜0.05),促进LoVo细胞凋亡(F=92.7,P＜0.05).MAP30还可上调Bax基因与蛋白表达,下调Bel-2基因与蛋白的表达.结论:MAP30可影响LoVo细胞Bcl-2和Bax的表达,从而诱导细胞凋广,抑制细胞生长.     

NF-κB在香烟烟雾凝集物诱导人支气管上皮细胞IL-8表达中的作用

目的研究核因子κB(NF-κB)在香烟烟雾凝集物(CSC)诱导人支气管上皮细胞IL-8表达中的作用。方法利用IL-8促进子上NF-κB结合位点突变的BEAS-2B细胞株(IL-8mNF-κB-BEAS-2B细胞)和野生型BEAS-2B细胞株(IL-8 WT BEAS-2B细胞,其IL-8促进子上含有完整的NF-κB结合位点),经7.5%CSC处理后,用荧光定量PCR方法检测处理后细胞荧光素酶基因(luciferase,fLCF)mRNA水平的变化,并用荧光素酶报告基因活性检测试剂盒检测处理后细胞的荧光素酶活性大小。结果 7.5%CSC处理2种BEAS-2B细胞后,IL-8 WT BEAS-2B细胞的fLCF mRNA表达量和荧光素酶活性均高于IL-8mNF-κB-BEAS-2B细胞(P<0.001),其中fLCF mRNA表达量是IL-8mNF-κB-BEAS-2B细胞的1.32倍(P<0.001)。结论 NF-κB转录因子通过参与炎症因子IL-8表达,促进吸烟导致的呼吸系统炎症反应。     

视屏显示终端作业对女工神经行为功能的影响

目的 探讨视屏显示终端（VDT）作业对女工的早期危害,为女工劳动保护提供依据。方法应用WHO推荐的“神经行为功能核心测试组合（NCTB）”对某电信局寻呼台64名VDT作业女工的神经行为功能进行测试。结果接触组消极情绪状况中的紧张、愤怒、疲劳得分,均显著高于对照组（P〈0．05）;积极情绪状态得分,显著低于对照组（P〈0．01）;平均反应时、最快反应速度和最慢反应速度,均显著慢于对照组（P〈0．01）;数字译码、视觉持留记忆、手提转敏捷度测试中的惯用手和非惯用手操作、目标追击-Ⅱ测试中的正确打点数得分均显著低于对照组（P〈0．01）;数字广度测试中的顺序、总和项得分均显著高于对照组（P〈0．01）。在控制了年龄混杂因素条件下,简单反应时中的最慢反应速度,工龄≥5年组显著慢于工龄〈5年组（P〈0．05）;数字广度（总和）得分,工龄≥5年组显著低于工龄〈5年组（P〈0．05）。结论电信VDT作业对中枢神经系统有一定的抑制作用。     

氯化汞对去卵巢大鼠子宫增重及过氧化物酶活性的影响

目的 :评价氯化汞在体内的雌激素样作用。方法 :从整体水平 ,观察不同浓度的氯化汞对去卵巢SD大鼠子宫的诱导增生作用和对过氧化物酶活性的影响。结果 :每天 0 .0 4mg/kg、0 .2 0mg/kg及 1.0 0mg/kg连续 3d腹腔注射氯化汞能刺激大鼠子宫增生和过氧化物酶活性的增加。结论 :汞在体内具有雌激素样作用     

SOD对青石棉诱导BEAS-2B细胞产生过氧化物歧化酶的作用

目的:探讨SOD对青石棉诱导BEAS-2B细胞产生过氧化物歧化酶(ROS)的抑制作用。方法:采用台盼蓝吞噬实验和乳酸脱氢酶同工酶(LDH)试剂盒分别测定0mg/L、100mg/L、250mg/L、500mg/L青石棉作用后BE-AS-2B细胞成活率和培养上清LDH水平。分别采用双氢溴乙啶(DHE)和双氯荧光素双醋酸盐(DCF)荧光探针测定青石棉刺激BEAS-2B细胞后ROS的产生情况,同时使用200USOD与青石棉共孵育观察其对ROS产生的抑制作用。结果:100mg/L以下剂量的青石棉与BEAS-2B细胞共培养24h后细胞成活率为97%,未显示明显毒性;DHE荧光染色显示青石棉可诱导BEAS-2B细胞产生ROS,细胞呈深红染色,使用SOD后可抑制ROS产生,细胞染色减弱;且不同剂量青石棉作用BEAS-2B细胞不同时间后DCF染色差异无统计学意义(P>0.05)。结论:青石棉可诱导BEAS-2B细胞产生ROS,且该作用可被SOD抑制。