溃疡性结肠炎患者外周血中性粒细胞凋亡与粘附分子水平的关系及意义

目的　探讨溃疡性结肠炎 (U C)患者外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡机制。方法　采用流式细胞术检测 32例 UC患者外周血 PMN凋亡 ,EL ISA法检测 P-选择素 (P- sel)和细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)的水平。结果　活动期 UC患者 PMN凋亡率明显低于对照组和缓解期 UC患者 (P<0 .0 1)。不同病情活动期 U C患者 PMN凋亡有显著性差异 (P<0 .0 1)。活动期 UC患者外周血中 P- sel和 ICAM- 1水平均高于对照组和缓解期 U C患者(P<0 .0 1或 (P<0 .0 5 ) ,且与 PMN凋亡呈负相关 (r值分别为 - 0 .72 38和 - 0 .5 2 13,P均 <0 .0 1) ,与病情呈正相关。结论　各种免疫细胞粘附分子表达上调可能是导致 UC患者 PMN凋亡延迟的重要机制     

急性白血病患者血浆Fas和NO的检测及临床意义

目的 探讨急性白血病患者血液中可溶性Fas(sFas)和一氧化氮水平的变化。方法 采用ELISA法检测47例急性白血病患者血浆sFas的含量，比色法检测NO的含量。结果 急性白血病患者血浆sFas的水平显著高于正常对照组，而NO的含量显著低于正常人对照组。结论 提示急性白血病患者血液中sFas和NO水平的变化与白血病细胞逃避机体免疫杀伤作用有一定关系。     

P-选择素与氧化修饰型低密度脂蛋白在冠心病中的作用

目的探讨冠心病心绞痛及急性心肌梗死(AMI)患者血浆可溶性P-选择素(SP-S)及氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)的变化。方法用ELISA法检测50例稳定型心绞痛(SA),不稳定型心绞痛(UA)及AMI患者SP-S及OX-LDL。结果冠心病患者SP-S及OX-LDL比正常对照组显著增高,且UA及AMI患者SP-S与OX-LDL比SA显著增高。而SP-S与OX-LDL呈正相关系。结论SP-S及OX-LDL参与冠心病的病理过程,SP-S及OX-LDL相互促进作用对冠心病早期起着关键作用,并有较高的诊断价值。     

不同浓度乙二胺四乙酸在产ESBLs多重耐药肺炎克雷伯菌对哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星与左旋氧氟沙星3种药物体外敏感性的恢复作用

目的 探讨不同浓度乙二胺四乙酸(EDTA)在恢复产超广谱β -内酰胺酶(ESBLs)多重耐药肺炎克雷伯菌对哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星与左旋氧氟沙星3种药物体外敏感性中的作用.方法 选取我院2018年1月至2019年12月产ESBLs多重耐药肺炎克雷伯杆菌感染患者36例.配置低、中、高3种不同浓度的EDTA,添加入调好的...     

基于深度学习构建大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的快速诊断模型

目的 构建一种基于深度学习的革兰染色图像自动分类模型EKNet,实现对泌尿系统感染常见的大肠埃希菌(Eco)和肺炎克雷伯菌(Kpn)的快速诊断.方法 将预处理后的细菌图像输入残差网络模型,计算交叉熵损失,通过反向传播算法进行参数优化,获得预训练模型EKNet.共采集368例Eco和292例Kpn显微图像,其中272例E...     

4种血清型登革病毒多表位重组抗原的表达及血清学初步评价

目的在原核表达系统中对登革病毒包膜蛋白(E蛋白)和非结构蛋白1(NS1)融合的B细胞抗原表位进行表达、纯化及血清学评价。方法将B细胞抗原表位用形成α螺旋的连接肽(EAAAK)2作为接头,串联合成1条全新的多表位融合重组基因rE,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白,用镍柱对重组蛋白纯化,并用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物。以融合蛋白为抗原,用间接ELISA检测登革热病人血清IgM抗体。结果重组表达载体pET28a-rE构建成功,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,用镍柱纯化获得高纯度的目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测结果显示蛋白分子量大小与预期结果相符,建立的间接ELISA具有较高的准确性。结论原核表达的登革病毒多表位融合蛋白具有良好的血清学检测价值。     

小鼠BTLA慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定.方法 以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒.PCR技术和基因测序对重组质粒进行鉴定.荧光显微镜观察重组慢病毒感染293T细胞形态学变化.RT-PCR和Western blot法鉴定BTLA在重组慢病毒感染293T细胞中的表达.50％组织培养感染剂量法(TCID5o法)检测重组慢病毒滴度.结果 成功构建的pMD18-T-mBTLA质粒和pSL6-mBTLA质粒,经双酶切电泳后均出现大小约为1 kb的条带与mBTLA编码序列的大小相符.基因测序并比对分析进一步证实mBTLA编码序列成功整合到质粒载体.病毒上清PCR扩增和293T细胞形态学观察证实Lenti-mBTLA慢病毒包装成功.TCID50法测定Lenti-mBTLA慢病毒滴度为1.3×108 pfu/mL.RT-PCR和Western blot法证实Lenti-mBTLA慢病毒能有效表达mBTLA mRNA和蛋白质.结论 成功构建了表达小鼠BTLA的慢病毒.     

上腹部手术患者外周血中性粒细胞凋亡及Bcl—2表达的变化

目的　观察上腹部手术患者围手术期外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡及Bcl 2基因表达的变化。方法　选择 2 5例择期行上腹部手术患者 ,采用流式细胞术检测术前和术后不同时点外周血PMN凋亡及Bcl 2基因的表达。结果　手术患者术前PMN凋亡率明显低于对照组 ,而Bcl 2的表达明显高于对照组。术后 1、3、12、2 4hPMN凋亡呈进行性下降 ,72h时有所升高 ;Bcl 2基因的表达在术后 1、3、12、2 4h呈进行性升高 ,72h时有所降低。结论　手术应激可致手术患者外周血PMN凋亡延迟 ,可能是术后炎症反应的原因之一。Bcl 2基因表达上调是PMN凋亡延迟的分子机制之一     

CD4+ CD25+调节性T细胞在免疫性血小板减少性紫癜中的调节作用

目的检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后CD4 CD2 5调节性T细胞(Treg)的比例以及变化规律,探讨Treg在ITP发病机制中的作用。方法收集42例ITP患者治疗前、后外周血标本,分离血单个核细胞,采用流式细胞术检测ITP患者治疗前后Treg的比例以及变化。结果ITP患者治疗前Treg比例明显低于正常对照组(P<0.01),治疗后Treg比例显著升高,明显高于治疗前,但仍低于正常对照组(P<0.01);治疗有效组ITP患者Treg比例显著高于治疗无效组(P<0.01),治疗显效组显著高于良效和进步组(P<0.01),良效和进步组与治疗无效组比较差别无显著性。(P>0.05)。结论ITP患者外周血Treg比例降低,提示Treg可能参与了ITP的发病机制。