姜黄素和环氧合酶-2抑制剂NS-398对肝星状细胞时效的双向调节体外实验研究

【目的】观察抗氧化剂姜黄素（Cur）与选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398两种药物同时联用或分时联用对大鼠肝星状细胞（HSC）生长的影响。【方法】体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6，接种96孔板，分为5组。I：单独姜黄素系列浓度组（0、20、30、40μmol／L）；单独NS-398系列浓度组（0，20,40，80μmol／L）；Ⅱ：单独NS-398系列浓度组（ABS1）和NS-398系列浓度组＋姜黄素20μmol／L（,4BS2）对大鼠HSC增殖的影响。Ⅲ：两种药物同时加药组；Ⅳ：两种药物先后6h加药组：先加姜黄素20μmol／L作用HSC6h后加NS-398系列浓度组（0、20、40、80wmol／L）；先加NS-398系碉浓度（0、20、40、80Vunol／L）作用HSC6h后加姜黄素20μmol／L组，V：析因分析组。各组设不加药物的细胞对照组，与HSC共同培养，以MTT法检测姜黄素、NS-398单用或同时、分时联用对HSC生长的影响。LDH法检测各组对HSC的细胞毒性舴用。[结果]单独NS-398系列浓度组和单独姜黄素系列浓度组有抑制HSC的作用，但姜黄素的作用比NS-398强；同时加两药组比分时加药组有明显不同，先加NS-398作用HSC6h组比先加姜黄素作用HSC6h组的抑制率明显降低。【结论】时间因素导致两药联用是双向调节，同时加药或先加姜黄素作用HSC6h组后加NS一-98时呈正调节作用，抑制率升高，而先加黼98作用ItSC6h后加姜黄素呈负调节作用，抑制率降低。NS-398对HSC作用一定时间后有抑制姜黄素对HSC起生物效应的作用。     

人乳头状瘤病毒与宫颈癌

在全世界 ,宫颈癌的病死率位于所有妇女癌症病死率的第 2位 ,每年新诊断的宫颈癌患者估计有 5 0万人。人乳头状瘤病毒 (ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｏｕｓ,ＨＰＶ)至今已发现至少 80余种 ,其中 2 0余种已证实与人类的宫颈肿瘤相关联[1] ,90 %以上的宫颈癌有ＨＰＶ感染 ,而且不同类型的ＨＰＶ所致宫颈癌的预后和患病年龄也不相同[2 ] 。 2 0世纪 80年代Ｚｕｒ Ｈａｕｓｅｎ首先提出ＨＰＶ为宫颈癌的主要病因的假说 ,近 2 0年来 ,随着分子生物学和分子病毒学技术的不断发展 ,大量研究发现ＨＰＶ16、18型等高危型ＨＰＶ与宫颈癌的发生和…     

骨髓间充质干细胞促进骨-肌腱结合部愈合的初步观察

[目的]观察骨髓间充质干细胞对骨-肌腱结合部愈合的影响.[方法]采用骨髓穿刺、全骨髓培养法获取兔骨髓间充质干细胞.36只18周龄新西兰大白兔随机分为2组,实验组将骨髓间充质干细胞与Pluronic F-127载体材料结合后,植入兔髌骨部分切除模型,对照组只进行手术,不植入细胞.在术后6、12、18周进行X线片、大体和组织学观察评估.[结果]X线片显示术后6、12、18周实验组骨-肌腱结合部新生骨面积显著大于对照组（P＜0.01）.大体观察可见实验组骨-腱结合部愈合较早.HE染色显示实验组术后6周有大量的纤维母细胞和类软骨细胞增生,并可见新骨形成;12周,髌腱与松质骨接触面软骨细胞移行带形成;18周,纤维软骨移行带排列更有序.Safranin 0染色显示实验组术后6周,基质染色较深,部分骨-腱结合处可见相对浓染区;12周,基质染色范围明显减少,沿类软骨细胞走行分布;18周,类软骨细胞集中的区域染色较12周有所减退.组织学检查显示实验组术后6、12、18周骨-腱结合部组织愈合明显,较对照组迅速.[结论]骨髓间充质干细胞可以促进骨-肌腱结合部细胞增生,促进其早期愈合.     

一种新的胃癌相关抗原的研究

 取含胃癌单抗MG₉的小鼠腹水，经DEAE—52离子交换层折后，获得纯化的MG₉（IgG₁）56.8mg，与溴化氢活化的Sepharose4B偶联制备免疫吸附剂，用亲和层析的方法从胃癌组织中纯化出MG₉相应抗原，经外源性凝集素识别，高碘酸氧化，电泳考马斯蓝染色，乙酰苏丹黑10B染色，免疫印渍及氨基酸组成分析等实验证实MG₉相应抗原是一种新的胃癌相关糖蛋白，分子量110～120kd．血清ELISA法检测结果提示对胃肠肿瘤的临床诊断有一定意义．     

胃癌中性糖脂的分离及纯化

作者应用甲醇氯仿抽提胃癌总脂,经sephadex-A25离子交换层析,florisil层析的方法从28g胃癌组织中分离纯化出中性糖脂(?)1.1mg,经高效薄层色谱分析,与标准品对照证实,条带清楚,纯度可靠。为胃癌中性糖脂抗原的研究打下了基础。     

耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞c-myc的表达上调及与耐药的关系

目的观察耐药乳腺癌细胞c-myc表达及其反义寡核苷酸对耐药的逆转效应,探讨c-myc在耐药调控中的作用。方法运用流式细胞仪检测乳腺癌耐药细胞MCF-7/Adr和其药敏亲本系MCF-7的c-myc表达水平。MTT法测定阿霉素作用于上述细胞的药物半数抑制浓度(IC50)。结果MCF-7/Adr耐药细胞c-myc的表达率为70.48%,其亲本药敏细胞系MCF-7c-myc表达率仅46.02%,前者显著高于后者(P<0.05)。阿霉素单独作用于MCF-7/Adr,IC50值为(22.00±1.92)μmol/L,但与4μmol/Lc-myc反义寡核苷酸共孵育后,阿霉素的IC50值则显著下降为(9.60±1.04)μmol/L。结论与其亲本药敏细胞相比较,MCF-7/Adr的c-myc表达显著上调,抑制c-myc的过表达可部分逆转MCF-7/Adr的阿霉素抵抗,提示c-myc参与肿瘤耐药的发生。     

副神经－胸锁乳突肌蒂瓣环构后肌植入的实验研究

本文通过应用副神经。胸锁乳突肌蒂瓣植入环杓后肌的动物实验，使失神经支配的环杓后肌重新获得功能，探索治疗喉返神经麻痹的新方法。实验表明副神经－胸锁乳突肌蒂瓣有实际应用价值。肌电图检查再生神经的动作电位恢复对声带活动的观察意义不大。组织学检查可见到神经纤维再生。要恢复呼吸与发音功能尚待进一步研究。     

皮肤角朊细胞与表皮干细胞双向电泳图谱的建立及差异分析

目的 建立皮肤角朊细胞与表皮干细胞的双向电泳图谱,并分析二者表达蛋白质的差异,为进一步研究体外调控表皮十细胞的增殖、分化提供线索.方法酶消化法获取单个表皮细胞悬液.Ⅳ型胶原快速贴壁法分选表皮干细胞.利用舣向电泳技术(2-DE)建立两种细胞的蛋白质表达图谱,并用Imagemaster 2D elite 5.0软件分析两种细胞的差异表达蛋一点.结果两种细胞的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性.皮肤角朊细胞与表皮干细胞的电泳图谱平均蛋白质点数分别为(982 ±18)个和(930 ±15)个,匹配点数为(850±13)个和(798±11)个,匹配率是86.56%和85.81%;两种细胞蛋白质间匹配点数是(886 ±8)个,匹配率是76.98%.找到差异蛋白点11个,其中只在表皮下细胞中表达或高表达的有8个;只在皮肤角朊细胞中表达或高表达的有3个.结论利用双向电泳法得到了分辨率较高儿重复性好的皮肤角朊细胞与表皮干细胞蛋白质组图谱,且二者存在有一定的差异.     

c—myc异常表达与KB细胞多药耐药性的关系及其意义

目的 了解ｃ－ｍｙｃ基因异常表达与ＫＢ细胞多药耐药性（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）的关系。方法 将含Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因的真核细胞表达克隆转染ＫＢ细胞,应用免疫组织化学方法及流式细胞术检测经抗ｍｄｒｌ－ｒｉｂｏｚｙｍｅ处理前后ＫＢ细胞中ｃ－ｍｙｃ基因产物Ｍｙｃ蛋白及多药耐药基因ｍｄｒｌ产物Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐ－ｇｐ）表达的改变。结果 耐药株ＫＢｖ和敏感株ＫＢ均有Ｍｙｃ蛋白表达,但ＫＢｖ强于ＫＢ,经抗ｍｄｒ１－ｒｉｂｏｚｙｍｅ部分逆转ＭＤＲ表型后,ＫＢｖ／５ｍＲ３及５ｍＲ３ Ｍｙｃ蛋白表达减弱;耐药株逆转前后Ｐ－ｇｐ表达有明显变化,而敏感株则无明显改变。结论 在ＭＤＲ状态下,Ｍｙｃ蛋白表达增高与肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性有关,ｃ－ｍｙｃ参与了ｍｄｒ１的调控。Ｍｙｃ蛋白