星形神经胶质细胞对PC12神经元突起生长发育的影响

背景星形细胞对神经元有提供营养、支持及调节突触活性作用,但它对神经元发育的影响还尚不清楚.目的探讨体外培养的Sprague Dawley大鼠大脑皮质星形细胞对PC12神经元突起生长发育的作用.设计完全随机设计,对照实验研究.方法以培养的星形细胞与PC12神经元按不同细胞数目比例(501～11)共同培养,并用其制备的条件培养液培养PG12细胞.主要观察指标用快速灵敏的MTT'比色法测定PC12神经元的细胞活力,用光学相差显微镜观察PC12细胞形态学变化.结果①星形细胞条件培养液可增强PG12细胞活力(MTT测定的A值由0.255±0.012提高到0.510±0.036,P＜0.001),却不能促使PC12神经元突起的生出.②当将星形细胞与PC12细胞按301～11的比例共同培养时,既可提高PC12细胞折光性和光晕又可促使其突起的生长;但按501～401的比例共同培养时,只观察到提高PC12细胞折光性和光晕,而无促使其突起生长发育的作用.结论PC12神经元细胞活力的提高与星形细胞分泌到条件培养液中的可溶性因子有关,而PC12神经元突起生长发育可能是和与星形细胞的直接接触以及二者的细胞数目比有关.     

限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究

目的探讨限制性显示(restriction display,RD)技术在制备丙型肝炎病毒(HCV)分型芯片探针的可行性.方法用限制性内切酶Sau3A I消化HCV1a、1b、2a亚型全长cDNA,所得的限制性内切酶片段与通用接头相连,通过10个选择性引物进行分组PCR,使得各片段得以扩增并分布于10个亚组中,经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离.切胶回收后作3次PCR,得到较纯净的HCV cDNA限制性片段.对这些片段做分子克隆,并测序鉴定.结果由HCV 3个亚型1a、2a、1b的全长cDNA得到66个大小相对均一(200～900bp)的限制性片段,平均每个亚型约22个.测序结果表明,属于HCV基因,可以作为HCV分型芯片的探针.结论RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段,适合于分型诊断基因芯片探针的收集.     

碘油与不同栓塞剂组合对子宫肌瘤疗效的影响

目的研究以碘油为主组合不同栓塞剂型治疗子宫肌瘤的疗效。方法36例子宫肌瘤患者,随机分为3组,采用与碘油不同栓塞剂组合,行双侧子宫动脉栓塞(UAE)治疗。Ⅰ组碘油 无水乙醇;Ⅱ组碘油 平阳霉素;Ⅲ组碘油 平阳霉素 无水乙醇 明胶海绵粒。术后随访观察月经恢复情况、瘤体大小、有无并发症发生等。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组UAE治疗后,子宫肌瘤缩小>50%分别为3、4、8例,Ⅰ、Ⅱ组间无显著性差异(P>0.05);Ⅰ、Ⅱ组与Ⅲ3组之间有显著性差异(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组间并发症发生率无统计学差异(P>0.05)。结论碘油与无水乙醇、平阳霉素、明胶海绵粒联合栓塞子宫肌瘤其疗效优于其它组合剂型。     

siRNA抑制HPV18 E6 基因对HeLA细胞凋亡的影响

目的 研究特异小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒（human papillomavirus, HPV）18型 E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响。方法 针对HPV18 E6 基因设计siRNA序列，经PCR方法体外扩增，得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物，利用LipofectamineTM2000脂质体转染HeLa细胞，在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA。针对转染后不同时间点采用四唑盐（MTT）比色法测定细胞活力，流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率，RT-PCR测定HPV18 E6 mRNA变化。结果 转染siRNA后细胞活力受到显著抑制（P＜0.05），光镜下出现明显的凋亡形态，72h 的凋亡率达到55.8%。RT-PCR结果显示，细胞转染24、48和72h后HPV18 E6 mRNA分别减少了57％、78％和40%，而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著。结论 siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa 细胞内HPV18 E6基因的表达，从而可诱导肿瘤细胞凋亡。     

p53基因在RA诱导SH-SY5Y细胞分化后低表达

全反式维甲酸(RA)的抑制肿瘤细胞生长和调控细胞分化的作用是一项重要的研究课题。而p53基因是一个重要的肿瘤抑制基因,在RA的作用中是否涉及到p53的作用尚有待阐明。本文用低浓度的RA(10 μmol/L)作用于SH-SY5Y细胞,每2d换一次液,在作用9 d后,用光学显微镜观察SH-SY5Y细胞的形态学变化,并提取细胞质总RNA进行RT-PCR反应半定量检测p53基因表达。结果显示,SH-SY5Y细胞经RA诱导后,细胞生出较长的突起,具有神经元的形态;而对照组保持成纤维细胞的形态、无明显的形态学变化。RT-PCR半定量显示,在细胞诱导后,p53基因表达明显下调。本文结果提示,RA的作用可能独立于p53基因途径,p53基因的表达变化可能是继发于RA的作用。     

头孢曲松和头孢克肟胶囊治疗下呼吸道感染的临床疗效研究

目的：比较头孢曲松、头孢克肟治疗下呼吸道感染的安全、有效性及医疗经济学意义。方法：选择100例下呼吸道感染病人,随机分为头孢曲松、头孢克肟序贯治疗组（A组）和单用头孢曲松组（B组）。每组受试者50例,A组使用头孢曲松1g静脉滴注每日2次,疗程7d,病情缓解后,转换为头孢克肟胶囊200mg,每日二次,再治疗7d。B组单用头孢曲松1g静脉点滴,每日2次,疗程14天。最后比较两种治疗方法的疗效差异。结果：A组的临床疗效和细菌清除率分别为80％和76％;B组的临床疗效和细菌清除率分别为86％和75％。二组疗效比较无显著性差异（P＞0．05）。两组不良反应不常见面轻微。结论：头孢曲松、头孢克肟序贯治疗临床疗效确切可靠、经济、方便。     

病态嗓音基频和音域的变化

目的：研究４种发音方式下基频（Ｆｏ）和真假声音域的关系。方法：用电子计算机分别测试真声最低音、舒适音、真声最高音、假声最高音的Ｆｏ值。结果：病态嗓音的真声最低音Ｆｏ值升高,假声最高音Ｆｏ值下降;真假声音域缩窄,假声音域变化更明显。结论：病态嗓音的假声最高音基频下降,假声音域变窄。     

锰超氧化物歧化酶过表达对H2O2诱导PC12细胞凋亡的影响

目的 揭示锰超氧化物歧化酶（MnSOD）在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用及机制。方法 转染人正义和反义MnSOD基因的PC12细胞,用50 mmol H2O2攻击已转染的细胞系,并采用MTT法、流式细胞术和 Hoechst染色方法研究H2O2的细胞毒作用。结果 转染正义MnSOD的细胞比原细胞的MnSOD酶活性提高1.3倍,而转染反义MnSOD细胞的酶活性降低67%。结论 H2O2对PC12细胞毒作用是通过诱发PC12细胞凋亡作用来实现的;MnSOD具有抑制H2O2诱导PC12细胞凋亡作用,涉及线粒体的损伤,导致氧化还原失衡继而诱发细胞凋亡。     

SARS的鉴别诊断与早期中医症状学特征

在2003年4月下旬至5月上旬,我院发热门诊在18天之内共接诊了1605人次的发热病人,最终确诊为SARS的病人有12例.以下就我院所诊治的发热病人的病因学进行分析,并探讨SARS与常见发热疾病的鉴别诊断要点及针对不同病因发热的应对措施,以提高诊断正确率.