射频消融早期抑制兔肝VX2肿瘤细胞增殖实验研究

目的:观察射频消融早期对兔肝VX2肿瘤细胞增殖的影响.方法:将试验兔分为2组:A组(对照组)不行射频消融治疗;B组(射频消融组、残瘤组).观察射频消融后不同时期的病理表现及肺转移情况.结果:射频消融后2,7d,B组增殖细胞核抗原指数明显低于同期A组,2组比较差异有统计学意义(P<0.05).射频消融后14 d B组增殖细胞核抗原指数较前增加,但与A组比较差异无统计学意义(P>0.05).射频消融后2,14 d,2组肺转移率差异无统计学意义(P>0.05).射频消融后7 d,2组肺转移率差异有统计学意义(P<0.05).结论:射频消融早期对残余肿瘤细胞增殖及肺转移有抑制作用.     

线粒体自噬的信号通路及其在肿瘤中的研究进展

线粒体自噬是真核生物细胞中广泛存在的清除功能失调或者多余线粒体的一种高度保守的细胞进程,能很好地调整线粒体数目并维持细胞能量代谢的稳定。该过程较复杂,多种信号通路参与其中来诱导或抑制线粒体自噬,从而以多重角度监测它的正常进行。而在恶性肿瘤中,线粒体自噬涉及到癌细胞的异常活化与增殖,提示它既可在癌细胞内发挥促癌效应,又可在正常细胞中发挥抑癌效应,二者之间的平衡可以决定肿瘤的进展或凋亡。从这个角度可以形成一条抗癌治疗新思路,既可抑制癌细胞中的线粒体自噬发挥抑癌效应,又可增强正常细胞中的线粒体自噬,清除损伤线粒体,维持线粒体基因组稳定与正常功能,从而发挥抑癌作用。本综述主要探讨线粒体自噬中涉及的多种信号通路及发挥关键作用的分子,并阐述线粒体自噬与恶性肿瘤的关系。     

Glypican-3过表达对A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨glypican-3对人肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法采用glypican-3 cDNA瞬时转染A549细胞,Western blot方法检测转染前后glypican-3在A549细胞中的表达水平,分别采用MTT、流式和Transwell小室研究glypican-3 cDNA对A549细胞增殖、凋亡和迁移的作用。结果转染后glypican-3在A549细胞中表达上调,细胞增殖和迁移能力增强,细胞凋亡率降低（均P〈0.05）。结论 A549细胞中glypican-3过表达促进细胞增殖和迁移,抑制细胞凋亡,可能对A549细胞的生长和存活具有重要作用。     

PRDM14在肺癌细胞系中的表达

目的检测PRDM14在肺癌细胞系中的表达及分布情况。方法采用RT-PCR技术和免疫荧光方法分别检测人支气管上皮细胞系(HBE)和6个肺癌细胞系中PRDM14mRNA和蛋白的表达。结果 RT-PCR结果显示PRDM14与GAPDH电泳条带的平均光密度比值在肺癌细胞系中显著高于HBE细胞系(P0.001);免疫荧光结果显示PRDM14蛋白表达的平均荧光强度在肺癌细胞系中高于HBE细胞系(P0.05),PRDM14蛋白荧光信号主要定位于细胞浆。结论 PRDM14在HBE细胞系低表达,在肺癌细胞系高表达,主要分布于细胞浆,PRDM14可能在肺癌的发生发展中发挥作用。     

TrkB在结肠癌中的表达及其对LoVo细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨tropomysin相关激酶B(TrkB)在结肠癌中的表达及其对LoVo细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 采用western blot方法检测TrkB在30例结肠癌和相应癌旁组织中的表达水平.分别采用MTT、流式和Transwell小室研究转染TrkB-siRNA对结肠癌细胞LoVo增殖、凋亡和侵袭的作用.结果 TrkB在结肠癌组织中表达上调,特异性siRNA干扰TrkB表达后,转染细胞凋亡率增加,但细胞增殖和侵袭受到抑制.结论 结肠癌中TrkB过表达可能通过抑制细胞凋亡,促进细胞增殖和侵袭,从而对结肠癌的发生发展具有重要作用.     

Expression of SOCS3 and Pyk2 and their correlation in non-small cell lung cancer

Objective To investigate the expression of SOCS3 and Pyk2 and their correlations in non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods The expression of SOCS3 and Pyk2 was detected in 100 cases of NSCLC,human bronchial epithelial cells(HBE) and 6 lung cancer cell lines by immunohistochemistry     

Ca2＋荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3测定H2O2刺激的A549细胞中ca2＋浓度变化

目的：本研究旨在观察ca2＋荧光蛋白探针Cameleon和荧光染料探针fluo-3在H2O2刺激的A549细胞中的应用，实时测定细胞质ca2＋浓度（[ca2＋]i），并比较两种ca2＋探针在荧光曲线及[ca2＋]i测定值等方面的差异。方法：采用Ca“荧光蛋白探针CameleonYC3．6转染A549细胞，24h后用50mmol／LH2O2刺激细胞，激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[ca2＋]i变化。采用ca2＋荧光染料探针fluo-3负载细胞，1h后用50mmol／L H2O2刺激细胞，激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[ca2＋]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果：采用Cameleon探针转染的细胞中，反映[ca2＋]i变化的R值曲线迅速升高后逐渐降至刺激前水平，通过公式计算发现[ca2＋]i变化范围是33．1—596．1nmol／L。采用fluo-3探针负载的细胞中，反映[ca2＋]i变化的荧光强度F值曲线逐渐升高至稳定，通过公式计算得到[ca2＋]i变化范围是131．8—695．6nmol／L。同时发现经H2O2刺激后，凋亡细胞百分比显著增加（P〈0．01）。结论：ca2＋荧光蛋白探针Cameleon YC3．6和荧光染料探针fluo-3均检测到H2O2诱导的细胞内[ca2＋]i变化．Cameleon YC3．6可能更灵敏地反映快速变化的钙信号。     

Twist在肺癌中高表达并与肺癌的分化有关

背景与目的 转录因子Twist是上皮-间质转变(EMT)过程中的重要调控因子,在肿瘤进展中发挥重要作用.本研究的目的是检测Twist在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测68例肺癌及8例癌旁肺组织中Twist的表达;采用RT-PCR方法检测人支气管上皮细胞系(HBE)和8个肺癌细胞系Twist1和Twist2 mRNA的表达水平;应用免疫荧光方法检测HBE和8个肺癌细胞系中Twist蛋白的表达和亚细胞定位.结果 8例癌旁肺组织中Twist弱表达,在68例肺癌组织标本中,9例为Twist弱表达(13.24%),51例为Twist中高表达(75.00%),癌旁肺组织Twist弱表达.Twist高表达与肺癌分化程度(P=0.002)和患者年龄(P=0.012)有关.Twist1和Twist2的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达水平均有差异(P＜0.05).免疫荧光显示Twist蛋白在HBE细胞系中弱表达,而在肺鳞癌和腺癌细胞系中高表达,主要定位于细胞浆.结论 Twist在正常肺组织中低表达,在肺癌中高表达,其表达水平与肺癌的分化有关,可作为肺癌进展的生物学标志.     

Sonic hedgehog促进血管外膜成纤维细胞表型转化并发生增殖迁移

目的 研究sonic hedgehog(shh)在血管外膜成纤维细胞增殖、迁移、表型转化中的作用.方法 体外培养血管外膜成纤维细胞,免疫荧光、激光共聚焦显微成像、免疫印迹以及实时定量聚合酶链式反应检测蛋白和基因表达,Ki67、细胞生长曲线评价细胞增殖情况,划痕实验观察细胞迁移情况,α-肌动蛋白评价细胞表型转化情况.结果 shh在体外培养的血管外膜成纤维细胞中有表达,加入外源性的shh后(3.5μg/ml),Ki67~+的成纤维细胞增多,划痕区域的细胞覆盖率增大、成纤维细胞内出现α-肌动蛋白的表达;加入cyclopamine(40μmol/L)抑制内源性的shh信号通路后,Ki67~+的成纤维细胞减少,划痕区域的细胞覆盖率减小.结论 shh能够促进成纤维细胞增殖、迁移、向肌成纤维细胞转化.