利用蛋白质组学技术研究Z24对大鼠给药血浆蛋白质表达的改变

目的利用2-DE-MAIDI-TOFMS/MS技术研究Z24对Wistar大鼠连续5d灌胃给药血浆蛋白质表达的变化,进一步分析Z24对大鼠肝毒性的作用机制。方法雌性Wistar大鼠,每组6只,每天以不同剂量的Z24(0、50、100和200mg/kg),麻醉动物后取血,分离血浆,一部分用于生化指标检测,一部分用于血浆蛋白质组分析,处死动物后取肝组织做病理检查。2-DE分离血浆蛋白,考马斯亮蓝R-250染色,利用ImageMaster2DPlatinum5.0软件进行图像分析,确定发生表达变化的差异蛋白点(P<0.05),选取分离好且呈一定剂量关系的蛋白点进行质谱鉴定,MS/MS-MS方法获取差异蛋白的肽质量指纹图谱和序列信息,在IPI-RATv3.23数据库中进行搜索,以C.I.%>95%作为判断依据鉴定差异蛋白,检索差异蛋白的生物学功能,进一步分析Z24对大鼠肝毒性的作用机制。结果血浆生化检测结果显示,与对照组相比,50mg/kg组ALP、Tch含量升高(P<0.05),100mg/kg组ALP、TG、Tch含量升高(P<0.05),200mg/kg组ALT、AST、ALP、AL、TBI、TG和Tch含量升高(P<0.05);AST、ALP、TBI和Tch含量变化呈剂量-效应关系。肝组织病理结果显示,各给药组动物肝脏均发生了不同程度的肝细胞空泡变性及纤维组织增生,且病变程度随剂量增加而加重。以上结果表明本实验剂量下Z24已引起了大鼠肝损伤。2-DE结果显示,与对照组相比,50、100和200mg/kg组分别有90、111和160个蛋白点发生明显的表达改变(P<0.05),其中100和200mg/kg组同时改变的蛋白点有34个,50、100和200mg/kg组同时改变的蛋白点有38个;对其中的29个差异蛋白点进行了质谱分析,有16个蛋白点经数据库检索后鉴定出相应蛋白,去冗余后包括11种蛋白,包括表达上调的载脂蛋白E、精氨琥珀酸合成酶、血浆视黄醇结合蛋白前体、丛生蛋白前体、触珠蛋白、肌动蛋白前体以及表达下调的胎球蛋白等。结论载脂蛋白E表达上调提示脂类代谢出现紊乱,丛生蛋白与细胞凋亡有关,精氨琥珀酸合成酶与鸟氨酸循环有关,血浆视黄醇结合蛋白的功能是输送肝内储存的视黄醇(VitA)到周围组织,这些蛋白质表达的改变提示Z24的肝脏毒性作用与脂类代谢紊乱及细胞凋亡有关,进而引起了肝脏功能的改变。     

肾近端小管细胞系在药物肾毒性评价中的应用

肾脏是药物毒副作用的主要靶器官，而肾近端小管拥有庞大的转运系统和丰富的生物转化酶，对外源性毒物的损害特别敏感，是研究药物肾毒性可靠的细胞模型。利用肾近端小管上皮细胞系在药物开发早期优化筛选先导化合物，并比较结构相似化合物的相对肾毒性，是近年来药物发现毒理学研究的重点和热点。本文就国内外常用的几株肾近端小管上皮细胞系的生理生化特点、常见检测终点和指标及其在药物研究开发中的应用作一简要综述。     

毒理芯片技术在药物毒理学中的应用

近年来,生物芯片技术在生物学领域中得到了飞速的发展,并已开始用于药物毒理学领域包括基因芯片技术在药物毒理机制研究中的应用;发现毒理学中药物毒性的预测;化学物代谢特性分析与评价;化学致癌物筛选和识别,以及药物临床前安全性评价等.本文重点介绍了毒理芯片技术及其在药物毒理机制和药物毒性预测中的应用,并简单阐述了其在药物毒理上应用的局限性.     

海洛因致机体组织器官超微结构变化的研究进展

海洛因是当今最为广泛滥用的一种毒品。通过动物实验模型研究和尸体检查中证实，其病理损害影响到机体的各个系统。目前，对海洛因病理损害的研究己经深入到超微结构层次。笔者收集了有关海洛因致机体组织器官超微结构变化的报道资料，并对其研究进展作一简要介绍。     

3-AP:一种新型核糖核苷酸还原酶抑制剂

近年来高通量筛选、组合化学和基因工程等先进技术的应用加速了抗肿瘤药物的研发进程。对新靶点的药物和传统机制的更加有效的细胞毒性药物成为研究的热点。3-氨基吡啶．2-甲醛硫代缩氨基脲(3-AP)是一种新的核糖核苷酸还原酶(RR)抑制剂，属于2-杂环甲醛硫代缩氨基脲的衍生物；该类化合物是目前为止最强的RR抑制剂，     

大鼠出生前接触苯妥英和(或)褪黑素对学习记忆的影响

目的　探讨褪黑素对苯妥英诱发的仔代学习记忆功能发育异常的影响。方法　Wistar孕大鼠于妊娠d 11～ 14ig苯妥英 10 0 ,2 0 0mg·kg- 1·d- 1或合并ig褪黑素 4 0mg·kg- 1(每日 3次 ) ,观察F1代仔鼠的味觉回避反射、穿梭反射和Morris水迷宫空间识别能力。结果　出生前染毒仔鼠成年后味觉回避反射、主动回避反射及空间识别等学习和记忆能力下降。褪黑素和苯妥英合并用药组仔鼠上述 3种学习和记忆能力均有不同程度的改善。结论　褪黑素对苯妥英诱发的大鼠仔代学习记忆功能发育异常具有拮抗作用 ,该效应可能与其拮抗胚胎脑组织中氧化应激反应有关。     

大鼠出生前接触苯妥英和褪黑素对仔代反射功能发育及自发运动的影响

目的 :探讨苯妥英 (DPH)神经发育毒性与胚胎脑组织中自由基产生和氧化应激反应的关系。方法 :Wistar孕鼠于妊娠d 11～ 14经 0 ,10 0 ,2 0 0mg·kg-1DPH或合并 4 0mg·kg-1褪黑素 (MT)染毒处理 ,研究MT对DPH的仔代反射功能发育及自发运动损害作用的拮抗效应。结果 :孕鼠在染毒期及染毒后增重下降 ,仔代体重减轻 ,哺乳期死亡率增高 ;DPH染毒仔鼠的转身运动增多 ,空中翻正反射及游泳能力发育延迟 ,成年后行走次数、站立次数、刻板动作等自发活动增多 ,旋转手比率增多 ,对阿朴吗啡“激发”反应性增强。MT和DPH合并处理可明显拮抗上述DPH仔鼠的行为异常。结论 :氧化性损伤在DPH神经发育毒性发生中发挥重要作用 ,而MT可拮抗其毒性作用。     

清醒Beagle犬呼吸和循环系统功能监测模型建立及生物学特性分析

目的:应用植入式遥测技术,建立Beagle犬清醒动物呼吸和循环系统功能检测模型,应用遥测技术对Beagle犬生理参数进行长时程采集和分析,为临床前药物安全性评价试验提供重要的生理基础参考值。方法:通过外科手术,在Beagle犬体内埋植TL11M3-D70-PCTP遥测传感器,以DSI遥测生理信号采集系统连续记录并分析Beagle犬在无束缚条件下24 h生理信号,分析其昼夜节律,并以特非那定作为阳性药物进行验证。结果:成功建立了Beagle犬植入式清醒动物模型,Beagle犬的生理活动具有明显的昼夜节律性,早上09:00左右是多项生理指标的最高点,特非那定能够明显延长Beagle犬的QTc间期。结论:试验获得了本中心GLP试验室饲养条件下动物的基础值,可为其在药物临床前试验中的应用提供重要的参考数据。     

MAPO致突变作用研究

三一(2-甲基-1-氮丙啶)磷化氧(MAPO)是一种昆虫不育剂,在工业上亦有诸多用途。本文用CHO细胞微核试验、染色体畸变分析。SCE试验和CHO/HGPRT基因位点正向突变方法,分别在加S_9活化和非活化条件下检测了MAPO的致突变作用。在建立CHO/HGPRT位点正向突变试验     

生物技术药物临床前安全性评价的进展

生物技术药物是指用DNA重组、杂交瘤和细胞培养等现代生物技术所生产的医药产品和为诊断、治疗或免疫目的所合成的多肽和核酸。近年来，随着现代分子生物学、免疫学技术的蓬勃发展，生物技术药物的研究开发势头异常迅猛。据估计，目前全球市场上大约有近百种生物技术药物，另有数百种正处于后期开