转化生长因子β1血清浓度及基因多态性与煤工尘肺的关系

目的探讨血清中转化生长因子β1(TGF-β1)的浓度与其-509位点基因多态性的关系在煤工尘肺发生发展中的作用。方法选择110例汉族煤工尘肺患者和110例煤尘接触者为研究对象,采集外周静脉血,应用TGF-β1酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清TGF-β1浓度,应用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TGF-β1基因-509位点基因型。结果病例组煤工尘肺患者血清TGF-β1平均浓度为(65.108±29.354)pg/L,对照组为(57.296±16.603)pg/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。病例组与对照组内各基因型组血清TGF-β1平均浓度差异有统计学意义(P<0.05)。进一步用q检验两两比较,各组差异均有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1-509位点为C/C、C/T基因型的两组血清TGF-β1的平均浓度之间差异无统计学意义(P>0.05);TGF-β1-509位点为T/T基因型的两组血清TGF-β1的平均浓度之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论煤工尘肺患者血清TGF-β1浓度与TGF-β1基因-509位点多态性可能有关。     

肺癌组织中黑色素瘤抗原-A3基因mRNA的表达及其序列点突变分析

目的检测肺癌组织中黑色素瘤抗原-3基因(MAGE-A3)mRNA的表达。方法用逆转录-套式聚合酶链反应(RT-PCR)对31例肺癌患者癌组织和相应癌旁组织MAGE-A3mRNA表达情况进行测定;PE-377DNA测序仪对5例10个RT-PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA序列测定。结果31例肺癌患者癌组织中26例表达MAGE-A3mRNA,阳性率为83.9%;相应的癌旁组织均未表达。DNA序列测定证明PCR扩增产物中目的基因片段均为MAGE-A3cDNA序列,所测5例样本中4例样本有两个相同位置的碱基发生了点突变(C2773→T2773;G2807→A2807),导致一个氨基酸残基改变(E143→K)。结论MAGE-A3mRNA在肺癌中呈高比例表达,提示此抗原有可能作为肺癌患者免疫治疗的靶抗原。我国肺癌患者中存在MAGE-A3基因个别位点的变异。     

PM2.5对BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤作用

目的 用大气细颗粒物(PM_2.5)刺激人支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞),探讨其脂质过氧化作用。方法 PM_2.5采自河南省郑州市;实验细胞为人支气管上皮细胞。用0、12.5、25 μg/mL的PM_2.5刺激BEAS-2B细胞4 h后,使用流式细胞仪检测其活性氧(ROS)水平;刺激BEAS-2B细胞8 h,用丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶活性测定试剂盒分别检测细胞裂解液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果 PM_2.5作用于BEAS-2B细胞4 h,12.5、25 μg/mL染毒组ROS水平分别为(6 074.69±41.65)、(7 338.58±168.34),均明显高于对照组的(5 816.66±114.69)(P<0.01);刺激BEAS-2B细胞8 h,12.5、25 μg/mL染毒组MDA含量分别为(195.44±35.58)、(334.11±26.75) μmol/mg,均明显高于对照组的(71.14±4.21) μmol/mg(P<0.01),同时染毒组SOD活力分别为(100.08±7.54)、(80.03±7.61) U/mg,均低于对照组的(159.91±10.59) U/mg(P<0.01)。结论 PM_2.5可以引起BEAS-2B细胞脂质过氧化损伤。     

TaqMan PCR技术同步检测沙眼衣原体及肺炎衣原体的DNA

我们自行设计了针对沙眼衣原体、肺炎衣原体的特异性引物、Taq Man荧光探针,对这2种病原体核酸进行双重扩增荧光探针杂交检测,取得满意结果。     

快速蛋白液相色谱系统纯化肺癌组织热休克蛋白70及其鉴定

目的:从肺癌组织中纯化并鉴定热休克蛋白70(HSP70),为研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗奠定基础.方法:用组织蛋白裂解液从肺癌组织中提取总蛋白,应用ConA-sepharose亲和层析和快速蛋白液相色谱系统(FRLC)连续分离、梯度洗脱获得蛋白,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-blot进行蛋白相对分子质量及免疫原性鉴定.结果与结论:所获蛋白的相对分子质量为70 000,经Western-blot鉴定为HSP70.     

肺癌患者谷胱甘肽S-转移酶P1基因Ile105Val多态性分析

目的:分析肺癌患者谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)基因Ile105Val单核苷酸多态性.方法:采用病例-对照研究方法,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术,检测121例正常对照和121例肺癌患者GSTP1基因Ile105Val多态性基因型分布,并比较各基因型与肺癌易感性的关系.结果:肺癌患者中,携带GSTP1突变等位基因的基因型Ile/Val Val/Val的频率为51.2%,高于对照组的33.1%(P=0.004);至少携带一个Val等位基因的个体发生肺癌风险是Ile/Ile基因型个体的2.13倍(95%CI1.27～3.58),且病理分型分析显示风险增加主要在鳞癌组.经吸烟分层后,仅增加吸烟者的风险.结论:GSTP1基因Ile105Val多态可能与中国人肺癌易感性有关,可用于对肺癌易感个体的预警和预防.     

人肺腺癌A549细胞株中HSP70多肽复合物的分离与纯化

目的:探讨肺腺癌细胞中热休克蛋白70多肽复合物分离及纯化的方法.方法:采用裂解液裂解、超声破碎、ConA-Sepharose亲和层析、ADP-agarose亲和层析结合DEAE阴离子交换层析方法,从体外培养的热休克(43℃)处理后的人肺腺癌细胞株A549中分离纯化HSP70多肽复合物,通过SDS-PAGE电泳、Western-blot检测获得蛋白.结果:获得蛋白的相对分子质量约为70 000,能与抗HSP70特异单抗结合.结论:采用ConA-Sepharose亲和层析、ADP-agarose亲和层析结合DEAE阴离子交换层析从肺腺癌细胞株A549中可获得高纯度的HSP70多肽复合物,为进一步研究以HSP70多肽复合物为基础的肺癌免疫治疗提供了依据.     

煤工尘肺患者血清转化生长因子β1、成纤维细胞生长因子含量检测

目的:探讨转化生长因子(TGF-β1)和成纤维细胞生长因子(FGF)在煤工尘肺发生发展中的意义.方法:分别采用双抗体夹心ELISA法、ABC-ELISA法测定50例煤工尘肺患者和50例健康对照人群血清TGF-β1、FGF的含量.结果:煤工尘肺患者血清TGF-β1、FGF的含量分别为(60.24±17.57)μg/L、(209.72±59.71)ng/L,高于对照组的(42.81±11.01)μg/L和(77.58±52.82)ng/L.Ⅰ期煤工尘肺患者2指标血清水平与Ⅱ、Ⅲ期患者比较,差异无统计学意义(P＞0.05).尘肺患者血清TGF-β1与FGF水平呈正相关(r=0.419,P＜0.05).结论:TGFβ1和FGF可能与煤工尘肺的发生发展有关.     

血清P53蛋白检测对职业性肺癌的预报价值

目的：探讨血清Ｐ５３蛋白作为职业性肺癌早期监测指标的可能性和应用价值。方法;对长期接触多环芳烃混合物（ＰＡＨＳ）的２３名焦炉工和１８名沥青工进行外周血淋巴细胞染色体畸变检查初筛,检出染色体畸变者各１６名,然后采用双抗夹心酶联免疫吸附试验方法９Ｓａｎｄｗｉｃｈ－ＥＫＬＩＳＡ）测定畸变者血清Ｐ５３蛋白水平。以１２名正常献血员为对照组。结果：焦炉工和沥青工血清Ｐ５３水平均值高于对照组（Ｐ〈０．０５）,其     

郑州市某地表水源藻类与环境因子回归分析

目的了解郑州市某地表水源藻类与环境因子的关系，并建立预测模型。方法2004年3～10月间，在该水源设2个采样点，采用标准方法监测：水温（WT）、透明度（SD）、水深（WD）、高锰酸盐指数（CODMn）、总氮（TN）、总磷（TP）、叶绿素a（Chla）和藻类细胞密度（ACD）8项指标，应用直线相关分析和多元回归方法探讨CNa和ACD与环境因子之间的关系，并初步建立叶绿素a和藻类细胞密度的预测模型。结果直线相关分析显示，该水源标准化叶绿素a与wT、CODMn、TP呈显著正相关，与SD呈显著负相关；标准化藻类细胞密度与WT、TP呈显著正相关。与SD、WD呈显著负相关。多元回归统计分析显示，WT、TP和CODMn为该水源标准化叶绿素a的显著相关因子。WT和TP为该水源标准化藻类细胞密度的显著相关因子，应用回归方程计算出来的预测值能够较好地与实测值拟合。结论建立的多元回归方程能够较好地预测Chla和ACD的变化趋势；削减TP和CODMn含量在控制Chla和ACD方面具有现实意义。