介绍一种快速、简便测量细胞大小的方法

在细胞形态学描述中,细胞大小是首先要描述的重要参数之一,是一种客观、量化的指标,对于判断某些异常细胞的来源,及以此为基础的实验室和临床诊断都具有一定参考价值,如MDS、ITP中小巨核细胞的判定[1-3].以往测量细胞大小需要同时使用目镜测微计、镜台测微计,首先校正目镜测微计,然后计算目镜测微计刻度中每格相当于多少μm,再进行实际细胞测量[4],既不方便,结果也不十分精确.如今,基于计算机及相应软件的骨髓细胞电子成像系统越来越普及,为快速、精确地测量细胞大小提供了条件,而且只采用镜台测微计即可完成,不需要使用目镜测微计,简便、快速.现就这一方法介绍如下,供大家参考.     

小儿急性巨核细胞白血病1例

患儿男,５岁。主因双下肢皮肤紫癜２０余天于１９９７年５月２２日入院。于入院前２０天发现双下肢皮肤少量出血点,１０天前碰伤后出现大片瘀斑,在当地经骨髓检查诊断为急性非淋巴细胞白血病转来我院住院。体检：发育营养中等,轻度贫血貌。双下肢皮肤大量出血点和片状紫斑。浅表淋巴结不大,心肺未见异常,腹平软,肝右肋下２ｃｍ,剑下４ｃｍ,脾左肋下１ｃｍ。四肢及神经系统未见异常。实验室检查：Ｈｂ９１ｇ／Ｌ,ＷＢＣ７３×１０９／Ｌ,Ｎ０１６,Ｓ００４,Ｌ０５６,幼稚巨核细胞０２４,血小板１７×１０９／Ｌ。尿…     

233例儿童急性白血病免疫表型结果的分析

免疫分型检查为白血病的诊断提供了一种客观的指标 ,提高了白血病诊断、分型的正确率。我院从 1997～ 1999年运用三色流式细胞技术对 2 33例儿童急性白血病进行了免疫分型检查 ,为探讨其中的规律 ,现总结如下。1　材料和方法1 1　材料　 2 33例标本取自 5个月至 14岁患儿的骨髓或静脉血 ,经骨髓形态学检查确诊为急性白血病或慢粒急性期 ,并有细胞化学染色结果的支持。1 2　试剂　所用单克隆抗体为ＦＩＴＣ标记或ＰＥ标记 ,包括ＭｓＩｇＧ1(同型对照 )和 14个细胞表面标志 ,即ＣＤ10、ＣＤ19、ＣＤ13、ＣＤ33、ＣＤ34、ＣＤ41、ＣＤ6 4、ＣＤ…     

携带AML1/ETO+融合基因儿童急性髓细胞白血病患者骨髓细胞形态学特点

目的探讨携带急性髓细胞白血病1／821（acute myeloid leukemia 1／eighttwenty-one。AMLl／ETO）融合基因的儿童急性髓细胞白血病（AML）的形态学特点。方法对46例经多重逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测AML1／ETO融合基因阳性的儿童AML骨髓片用瑞特染液或与姬姆萨染液一起染色后，按照国内AML分型标准进行观察分析，同时，对免疫分型及细胞化学染色结果也进行了回顾分析。结果46例AML1／ETO融合基因阳性患儿中M2a、M2b、M4EO、M4、M5b分别占67．2％、19．6％、2．2％、6．6％、4．4％，其中M2b的构成比显著低于文献报道。免疫分型、细胞化学结果均支持形态学分型。结论儿童AML患者AML1／ETO融合基因阳性不能提示形态学是否可诊断为M2b；AMLl／ETO融合基因对儿童M2b没有成人特异。     

两种不同的渗透剂对髓过氧化物酶测定的比较分析

在白血病免疫分型中,胞浆抗原的检测,如髓过氧化物酶myeloperoxidase, MPO、胞浆CD22CyCD22及胞浆CD3CyCD3等,因其特异性强、灵敏度高等优点对确定白血病细胞的系别起源具有重要作用[1、2]。但也应注意到,用于检测胞浆内抗原的渗透剂及方法对结果会产生很大影响,选择不当会导致结果出现很大的偏差。本文就两种不同的渗透剂对MPO检测的影响做了配对比较分析。 1 材料与方法 1．1 标本来源：20例骨髓标本采自我院住院患儿,经形态学、免疫分型及细胞化学检查确诊为急性淋巴细胞白血病ALL。 1．2 试剂来源：渗透…     

红细胞裂解液对CD34^＋细胞相对计数的影响

摘要为了研究红细胞裂解液对CD34^＋细胞相对计数结果的影响,对37份外周血干细胞采集物进行CD34一PE及CD45一FITCx／．色免疫荧光染色后用FACS裂解液（FACS^TM lysingsolution,FACS）、IOTest3裂解液（IOTest3lysingsolution,IOTest）及自配裂解液溶解红细胞,采用洗涤程序和运用ISHAGE设门策略,检测CD34^＋细胞相对数,同时记录细胞的前向散射（forwardscatter,FSC）、侧向散射（sidescatter,sSC）信号及CD45^＋细胞百分比。结果表明,FACS处理的样本CD34^＋细胞百分比低于IOTest（0．50±0．42v30．92±0．59,P=0．004）;而IOTest与自配红细胞裂解液处理结果的差异无统计学意义（0．92±0．59VS0．95±0．64,P=0．902）。经IOTest裂解后细胞的Fsc、SSC信号均显著高于FACS（P〈0．01）。IOTest裂解后的样本CD45^＋细胞百分比低于FACS。WBC数的多少与CD34^＋细胞百分比不存在相关关系（rs=0．192,P=0．357）。结论：某些红细胞裂解液对CD34等抗原阳性细胞的相对计数确有不良影响,用流式细胞术检测或计数时应慎重选择红细胞裂解液。     

282例小儿急性白血病的分型

通过２８２例急性白血病患儿细胞形态学，细胞化学和免疫分型结果统计了急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞白血病各个亚型的分布情况；ＡＬＬ的ＦＡＢ分型以Ｌ２型为主，免疫分型以Ｃ－ＡＬＬ型为主，前前Ｂ型次之；ＡＭＬ的ＦＡＢ分型以Ｍ２型为主，其余各型匀无统计学意义。     

白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型分析

目的　探讨少数白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型特点及其性质。方法　采用多参数流式细胞术(multiparameterflowcytometry ,MCF)及CD4 5 /SSC双对数散点图设门技术分析 10例白血病患儿骨髓样本中各群细胞的抗原表达情况。结果　 10例样本中均检测到两群幼稚细胞群体 ,一群构成比较高 (优势群体 ,8.5 %～ 76 .9% ) ,其中有 7例样本存在抗原的异常表达 ,包括早期、晚期抗原的非同步性表达、错位表达及抗原的缺失 ;另一群构成比较低 (0 .7%～ 13.9% ) ,所有样本均表达B淋巴细胞抗原 ,为正常的幼稚B淋巴细胞 ,其中有 3例存在抗原的非同步性表达。有 7例样本流式细胞术检测的白血病细胞 (优势群体 )构成比低于形态学结果 (P <0 .0 1)。结论　少数白血病患儿的骨髓除存在白血病细胞之外也可存在数量不等的正常幼稚B淋巴细胞 ,有时可伴有抗原的异常表达 ,需与混合白血病相鉴别。在白血病免疫分型中 ,流式细胞术对幼稚细胞的定性分析比定量分析更具有临床意义。     

高有核细胞移植物中白细胞的确定

目的探讨准确计数外周血干细胞移植物白细胞的方法。方法在移液器枪头外表面划一细线,以保证每次移液量的一致,对外周血干细胞移植物标本进行精确稀释后计数白细胞,之后再乘以稀释倍数还原,算出原标本白细胞数。做两次不同倍数的稀释,进行质量控制。结果 30例样本有24例样本平均值超出血球分析仪线性范围(<99.9×109/L),占80%,最高值达到434.0×109/L。两个稀释度还原值之差最低为0.5×109/L,最高为9.0×109/L。结论该方法能够准确计数高有核细胞移植物中白细胞,在控制好各种因素后可以得到令人信服的结果,为下一步工作打下坚实的基础。     

流式细胞术白血病免疫分型中CD45设门的重要性

免疫分型在急性白血病的诊断中起着重要作用 ,它具有特异性强、客观等优点 ,从而降低了急性白血病形态学的误诊率。但也应注意到 ,所用的试剂质量、标本处理及染色方法等对结果会产生很大的影响 ,如不进行监测有可能导致结果的失真。本文就流式细胞术 (ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ,ＦＣＭ )白血病免疫分型中ＣＤ45设门的重要性谈些体会。运用ＦＣＭ检测白血病细胞免疫表型普遍采用ＣＤ45 /ＳＳＣ双对数散点图 (ｄｏｔｐｌｏｔ)对幼稚细胞设门来分析其抗原表达情况。白血病标本在ＣＤ45 /ＳＳＣ双对数散点图上一般可见到三群细胞 ,即成熟淋…