环孢菌素A体外对再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征患者造血祖细胞作用的研究

目的　观察了环孢菌素A(CSA)体外对 18例再生障碍性贫血 (AA) ,17例骨髓增生异常综合征 (MDS)和 10例正常对照粒系和红系祖细胞 (CFU GM、CFU E)的作用。方法　采用RPMI16 4 0琼脂和McCoy’S5A甲基纤维素半固体平皿法。 结果　 (1)AA和MDS患者的CFU GM和CFU E较正常对照明显减低 (P <0 0 0 0 1) ;(2 )CsA能明显促进AA和MDS患者CFU GM、CFU E的增殖 ,这种促增殖作用随CsA剂量增加而增加 ;(3)SAA患者CFU GM和CFU E对CsA的有效率较CAA高 ;(4)MDS RAEB和RAEB T型患者CFU GM、CFU E对CsA有效率较RA、RAS高 ;(5 )MDS和AA患者中CFU GM、CFU E值重、中度减低者对CsA有效率较零者高。结论　CsA体外可促进部分AA和MDS患者CFU GM、CFU E的增殖     

基因重组人红细胞生成素对骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血患者红系祖细胞的作用

观察大剂量基因重组人红细胞生成素(rh-Ep)体外对10例正常人,17例骨髓增生异常综合征难治性贫血(MDS-RA),19例再生障碍性贫血(AA)患者红系祖细胞(CFU-E)的作用。结果MDS-RA和AA患者的CFU-E明显低于正常人(P均＜0．01),随rh-Ep剂量加大,各组红系祖细胞(CFU-E)均有不同程度增高,至100u/ml达最高值,并接近或超过正常值。结果表明,大剂量rh-Ep可促进部分MDS-RA趾和AA患者CFU-E增殖。     

白细胞介素-6单独或与其他细胞因子联合应用对白血病细胞的影响

目的;观察ｒｈＩＬ－６对急性白血病原代细胞体外生长的作用。方法：应用ＭＴＴ,ＣＦＵ－Ｌ及间接免疫荧光法对１８例急性病进行观察。结果：ＩＬ－６体外单独应用对急性白血病原代细胞无明显促增殖及诱导分化作用,但与Ｇ－ＣＳＦ联合则常可抑制原代白血病细胞增殖。结论;ＩＬ－６与Ｇ－ＣＳＦ联合用于化疗,放疗后的骨髓抑制更安全。     

人不同来源CD+34造血细胞bcl-2、bax、Fas、Fas-L及p53的表达及意义

目的：探讨人不同来源正常CD34^ 造血干／祖细胞bcl-2,bax,Fas,Fas-L及p53的表达及意义。方法：分别收集了正常人骨髓、动员后外周血及脐带血,制备成单个核细胞后采用Mini MACS免疫磁珠分离法纯化CD34^ 造血干／祖细胞,再应用免疫组化SP法观察分离纯化的CD34^ 造血干／祖细胞bcl-2,bax,Fax,Fas-L及p53的表达。结果：所分离纯化的CD34^ 细胞经PACS分析,其纯度为≥98%,p53及Fas呈弱阳性或阴性,Fas-L及bcl-2呈强阴性或阳性染色,bax在脐血及骨髓为弱阳性,在外周血为阳性表达。结论：在不同来源的正常CD34^ 细胞bcl-2,bax,Fas,Fas-L及p53的表达相似。     

IL-6及其与其他细胞因子联合应用对白血病细胞体外增殖的影响

目的 观察ＩＬ－６对急性白血病原代细胞体外生长的作用。方法 应用ＭＴＴ、ＣＦＵ－Ｌ及间接免疫荧光法以ＩＬ－６及其与其他细胞因子联合应用对１８例急性白血病鹗２骨髓细胞的作用进行观察。结果 ＩＬ－６体外单独应用对急性白血病原代细胞无明显促增殖及话导分化作用,但与Ｇ－ＣＳＦ联合应用则常可抑制原代白血病增殖。结论 ＩＬ－６与Ｇ－ＣＳＦ联合用于化疗、放疗后的骨髓抑制可能更为安全 。     

活体动物体内成像技术及其在生物医学中的应用进展

活体动物体内成像是近年来新兴的检测活体动物体内基因表达及细胞活动的光学成像技术，具有操作简便，直观性强的特点。这项技术包括生物发光成像和荧光成像，采用报告基因产生的生物发光、荧光蛋白质或染料产生的荧光作为体内生物光源，与新型冷CCD成像相结合，实时探测活体动物体内生理或病理条件下的细胞和分子事件。本文简要综述了活体动物体内成像技术的原理、应用领域及发展前景。     

环孢素A对再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征造血祖细胞的作用

近年来国内外相继报告临床应用环孢素Ａ(ＣｓＡ)对再生障碍性贫血 (ＡＡ)有较好疗效 ,ＣｓＡ用于骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)亦有个别报道 ,为研究ＣｓＡ的治疗作用 ,我们观察了ＣｓＡ在体外对 18例ＡＡ ,17例ＭＤＳ患者粒单细胞集落生成单位 (ＣＦＵ ＧＭ) ,红系集落生成单位 (ＣＦＵ Ｅ)的作用。一、材料及方法1 骨髓来源 :18例ＡＡ按《血液病诊断及疗效标准》所制定的标准 ,其中重症ＡＡ(ＳＡＡ) 6例 ,慢性ＡＡ(ＣＡＡ) 12例。ＭＤＳ17例诊断标准采用ＦＡＢ诊断和分型标准 ,其中 (1)难治性贫血 (ＲＡ) 10例 ;(2 )环形铁粒幼细胞性贫血 (…     

干涉Gankyrin基因表达对小鼠乳腺癌转移的影响

目的 建立稳定干涉癌基因Gankyrin的4T1-luc细胞株,探讨Gankyrin对小鼠乳腺癌转移的影响.方法 采用慢病毒感染和抗性筛选方法获得稳定干涉Gankyrin的乳腺癌细胞株4T1-luc/shGankyrin,通过蛋白质印迹和实时定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测Gankyrin的干涉效果;选用BALB/c小鼠进行4T1细胞原位种植,利用活体成像技术实时观测小鼠体内肿瘤生长和肿瘤转移情况,并对小鼠肺转移瘤进行病理学分析.结果 采用免疫印迹和实时定量PCR,检测稳定敲低Gankyrin 4T1细胞在蛋白质水平和mRNA水平的表达,均明显低于对照细胞,与对照细胞相比,不同干涉序列的4T1细胞mRNA水平分别为对照细胞的4.9％、25.1％、69.8％.利用活体成像进行细胞数与细胞发光强度的检测,选择细胞数与发光强度基本一致的#2细胞株进行小鼠原位种植,其产生的转移瘤进行实时观测,结果显示敲低Gankyrin的4T1细胞诱导的肺转移瘤荧光强度为3.02×106,而对照细胞为10.9×106,同时病理学证实了对照细胞产生的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阳性,而敲低Gankyrin的4T1细胞的肺转移瘤免疫组织化学Gankyrin染色阴性.结论 采用慢病毒感染的方法可以有效建立稳定敲低Gankyrin表达的细胞株;Gankyrin稳定干涉后对小鼠乳腺癌转移具有明显的抑制作用.Gankyrin有可能成为新的肿瘤治疗靶点.     

采用活体成像技术监测肿瘤生长及转移模型的建立

目的 采用活体成像技术监测稳定高表达荧光素酶报告基因的肿瘤细胞在小鼠体内生长及转移情况,为肿瘤治疗的药物研发提供新的有用工具.方法 采用lipofectamine2000介导的基因转染方法,将pcDNA3.1/Luc载体转染小鼠高转移乳腺癌细胞株4T1、EMT-6及结肠癌细胞株CT26,经G418抗性筛选及有限稀释法获得可稳定高表达荧光素酶的单克隆细胞;MTT法测定各转染细胞对不同化疗药物的抗性,并采用活体成像的方法检测各转染细胞在小鼠体内的成瘤和转移.结果 获得了可稳定高表达荧光素酶基因的单克隆细胞株,该单克隆细胞株具有与亲本细胞系相同的对化疗药物的敏感性;将单克隆细胞株植入小鼠皮下,可采用活体成像技术准确监测肿瘤细胞体内生长及转移.结论 采用活体成像技术构建的肿瘤动物模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型.     

白细胞介素-6单独或与其他细胞因子联合应用对白血病细胞的影响

目的 观察rhIL-6对急性白血病原代细胞体外生长的作用。方法 应用MTT、CFU-L及间接免疫荧光法对18例急性白血病进行观察。结果 IL-6体外单独应用对急性白血病原代细胞无明显促增殖及诱导分化作用,但与G-CSF联合则常可抑制原代白血病细胞增殖。结论 IL-6与G-CSF联合用于化疗、放疗后的骨髓抑制更安全。