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1.
2.
三氧化二砷抑制人膀胱癌 EJ细胞增殖及其作用机制探讨 总被引:2,自引:1,他引:2
背景与目的:观察三氧化二砷(Arsenictrioxide,As2O3)对人膀胱癌EJ细胞生长抑制作用,并探讨其作用机理。材料与方法:四甲基偶氮唑蓝(3_[4,5_dimethylthiazol_2_yl]_2,5diphenyltetrazoliumbromid,MTT)法检测EJ细胞增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡;免疫细胞化学染色观察caspase_3蛋白的表达。结果:As2O3 与EJ细胞生长抑制率之间有显著的浓度依赖关系,IC50 为22.51μmol/L;荧光显微镜下观察到经As2O3 作用后,EJ细胞出现凋亡现象;流式细胞术结果表明20μmol/L的As2O3 处理EJ细胞48h后,细胞周期变化无显著性差异,细胞凋亡率从对照组的3.37 %上升到19.07 %;免疫细胞化学染色结果显示,20μmol/L的As2O3 处理EJ细胞48h后,能够诱导caspase_3蛋白的表达。结论:As2O3 能显著抑制EJ细胞增殖,诱导caspase_3蛋白表达,并进一步诱导细胞凋亡。 相似文献
3.
4.
间接ELISA法测定转基因小鼠血清中核糖核酸酶抑制因子的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
[目的]建立间接ELISA法测定血清中核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)含量的方法,并测定在转RI基因小鼠血清中RI的表达情况。[方法]用血清样品包被酶标板,兔抗人RI抗体为一抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗,建立血清RI定量检测的间接ELISA法;取转染了RI基因的小鼠的血清,用上述建立的间接ELISA法测定不同时相小鼠血清中RI的表达水平。[结果]定量检测血清RI的间接ELISA法最适反应条件为一抗最佳稀释度为1∶4000,二抗的最佳稀释浓度为1∶2000。转基因小鼠第2、3周血清中RI含量较低(0.556±0.080),1个月左右达到最高值(0.836±0.113),3个月时明显下降(0.640±0.100)。[结论]间接ELISA法可以用于测定血清中的RI抗原含量。 相似文献
5.
目的:通过对临床高龄鼻饲病人的进食体位的探讨,确立高龄鼻饲的最佳体位以提高其鼻饲质量.方法:将36例高龄卧床鼻饲患者随机编入对照组(传统方法常用体位:抬高床头15~30度角进食)和实验组(抬高床头40~50度角)进行鼻饲和护理,观察两种不同体位鼻饲期胃潴留、呕吐、呛咳发生情况并进行营养状况评估.结果:实验组发生胃潴留、呕吐、呛咳情况显著低于对照组(P<0.05),具有统计学意义,且营养支持状况又与对照组(P<0.01~0.05).结论:采用抬高床头40~45度角行鼻饲更安全且具有实际意义. 相似文献
6.
目的:探讨间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测核糖核酸酶抑制因子(RI)在恶性肿瘤患者血清中的表达。方法:建立检测血清RI含量的间接ELISA法,检测和比较正常人、恶性肿瘤患者(乳腺癌、胃癌、肺癌、肝癌)、乳腺良性肿瘤患者血清中RI的表达水平。结果:所建立的间接ELISA法特异性高;恶性肿瘤患者血清中RI表达均明显低于正常人(P<0.05),乳腺癌亦明显低于乳腺良性肿瘤(P<0.05)。结论:RI表达的降低可以作为肿瘤良、恶性鉴别的指标之一。 相似文献
7.
恶性肿瘤患者血液中核糖核酸酶及核糖核酸酶抑制因子活性测定 总被引:4,自引:0,他引:4
本文测定了26例正常中老年人(40~61)岁)、78例初诊恶性肿瘤患者和8例术后恶性肿瘤患者(均为40~60岁)的血清酸性核糖核酸酶(ACR)及游离碱性核糖核酸酶(fAKR)的活性。测定了16例正常人(40~60岁)、50例同龄的恶性肿瘤患者、10例卵巢囊肿及7例胃溃疡患者红细胞中核糖核酸酶抑制因子(RI)的活性。结果表明,恶性肿瘤患者血清RNase活性显著高于正常对照组;恶性肿瘤组与正常组比较,红细胞中RI活性显著下降。胃溃疡及卵巢囊肿患者红细胞中的RI活性,与正常组比较,无明显差异。 相似文献
8.
白眉蝮蛇去整合素rAdinbitor对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞黏附与增殖的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
背景与目的:蛇毒去整合素是一类从多种蛇毒和水蛭中分离到的含RGD(Arg—Gly—Asp)或KGD(Lys—Gly—Asp)模体的小分子蛋白质,其由于能竞争性地结合细胞表面的整合蛋白受体,阻断肿瘤细胞与细胞外基质的黏附,从而发挥抗肿瘤转移的作用。rAdinbitor是我实验室采用基因克隆方法从大连产白眉蝮蛇(Gloydius blomhoffi brevicaudus)的毒腺中获得的一种含有RGD模体的去整合素。本实验的目的是探讨rAdinbitor对人肝癌细胞系SMMC-7721黏附、增殖的抑制作用,为rAdinbitor抗肿瘤转移的作用机制提供实验依据。方法:以细胞黏附实验观察纤连蛋白(FN)基质对SMMC-7721细胞黏附的影响。分别采用结晶紫染色法和MTT比色法测定重组蛋白rAdinbitor对SMMC-7721向FN黏附的影响,及对已黏附于FN上的SMMC-7721的影响。以MTT比色法检测不同浓度的rAdinbitor对SMMC-7721细胞增殖的影响;HE染色观察200μg/ml Adinbitor诱导SMMC-7721细胞36h凋亡的形态变化;采用流式细胞仪检测rAdinbitor对细胞凋亡的诱导作用。结果:①rAdinbitor对SMMC-7721细胞在FN基质上的黏附有一定的抑制作用,并呈浓度依赖关系,25、50、100、200μg/ml浓度组rAdinbitor的黏附抑制率分别为4.90%、11.73%、22.84%、37.28%,各组差异有显著性(P〈0.05)。②rAdinbitor作用后,已黏附的SMMC-7721细胞变圆、脱落,各浓度组黏附细胞的存活率的平均值分别为98.89%、90.01%、63.37%、35.13%,细胞的增殖受到明显抑制(P〈0.05)。③rAdinbitor对SMMC-7721细胞的增殖具有较强的抑制作用,且随着药物浓度的增加,其抑制作用增强(P〈0.05)。rAdinbitor对SMMC-7721细胞作用48h的IC50值为177.83μg/ml。④200μg/ml rAdinbitor作用SMMC-7721细胞36h呈现早期细胞凋亡的形态改变,凋亡率达20.68%,明显高于未经处理的对照组的2.38%(P〈0.05)。结论:重组白眉蝮蛇去整合素rAdinbitor能够剂量依赖性地抑制SMMC-7721细胞在FN上的黏附,并促使已黏附的SMMC-7721细胞脱落,剂量依赖性抑制SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡。 相似文献
9.
破坏泛素依赖的蛋白水解通路对p53转录激活的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :研究功能性泛素化及蛋白酶体水解过程对p5 3转录激活的影响。方法 :通过瞬时转染报告基因法 ,测定内源、外源性p5 3或p5 3转录活性片断的转录能力 (荧光素酶活性 ) ;Western blot法测定细胞内p5 3及其靶蛋白p2 1waf1 的表达水平。结果 :抑制蛋白酶体水解过程 ,细胞内源、外源性p5 3及p5 3转录活性片断的转录能力均降低 ;泛素化途径缺失时 ,p5 3转录能力被显著抑制 ,虽然细胞内p5 3蛋白堆积 ,但其下游靶蛋白p2 1waf1 的表达却无增加。结论 :p5 3泛素蛋白酶体水解途径与其转录激活过程存在功能性联系 相似文献
10.