排序方式: 共有21条查询结果,搜索用时 0 毫秒
1.
目的:研究改良CVP联合rhG—CSF方案对血液肿瘤和实体瘤41例患者自体外周血干细胞移植(APBSCT)动员及造血重建效果。方法:2001年3月至2006年3月采用改良CVP联合rhG—CSF动员方案,完成APBSCT41例(血液肿瘤32例,实体瘤9例),平均年龄39.6岁(18岁~67岁)。WBC升至4.0×10^9/L左右采集单个核细胞(MNC)并计数MNC和CD34^+细胞数;预处理结束48h~72h回输MNC。结果:动员期间患者WBC均降至1.0×10^9/L以下,PLT 40×10^9以下。34例1次采集成功,7例(双次移植5例)作第2次采集。采集MNC数0.9×10^8/kg~8.3×10^8/kg(2.8±2.0×10^8/kg),CD34^+细胞1.1×10^6/kg~9.4×10^6/kg(3.2±2.6×10^6/kg)。预处理后所有病例均达到骨髓抑制,WBC恢复到1.0×10^9/L时间为+8~+16d(平均+11.3d);38例PLT恢复到50×10^9/L时间为+13~+22d(平均+16.8d),3例P1月恢复延迟,最长+35d。随访15~65个月,持续完全缓解19例(46.3%),部分缓解或好转13例(31.7%),总有效率78.0%,无效9例(22.0%),无1例发生移植相关死亡(其中5例带瘤生存,17例死亡)。结论:改良CVP联合rhG—CSF动员方案行APBSCT是一种安全有效的动员自体外周血造血干细胞的方法,临床疗效满意。 相似文献
2.
本研究探讨Notch配体Delta—likel(Dil1)对小鼠骨髓细胞来源的树突状细胞(dendriticcell,DC)分化及其抗原呈递功能的影响。在GM—CSF和IL4存在条件下,用OP9-Dil1和OPt).GFP细胞分别与小鼠骨髓细胞共培养8天,经肿瘤抗原刺激成熟。用流式细胞仪检测DC表面MHCII、CD80和CD86的表达情况,ELISA法检测肿瘤抗原刺激后DC培养上清细胞因子IL-12和IL110的水平,通过混合T淋巴细胞反应观察DC对T细胞的促增殖能力。结果表明:与GFP组相比,Dll1组的小鼠骨髓来源的树突状细胞明显增多(P〈0.05)。肿瘤抗原刺激后,Dll1组DC表面MHCII、CD80和CD86表达量更高。DC分泌的IL-12水平显著高于对照组(P〈0.05),而IL-10的水平显著低于对照组(P〈0.01)。Dll1组DC具有更强的促T细胞增殖活性。结论:OP9-Dll1促进小鼠骨髓细胞向DC分化并增强其抗原呈递功能。 相似文献
3.
目的:构建含有myc—RBPJ(R218H)(recombination binding protein—J)、myc—KyoT2融合基因片段的质粒,并在真核细胞中表达、鉴定。方法:由本科室保存质粒酶切分别得到RBPJ(R218H)和myc—Ky0T2基因片段,将RBPJ(R218H)基因插入载体PCMV—myc中,获得融合基因myc—RBP—J(R218H),将myc—RBPJ(R218H)和myc—KyoT2插入真核表达载体pIRES2-EGFP,构建真核表达载体myc—RBPJ(R218H)-IRES2-EGFP、myc—KyoT2-IRES2-EGFP。以其瞬时转染HEK293细胞,应用免疫印迹与流式细胞术检测融合蛋白与绿色荧光蛋白的表达。结果:正确获得myc—RBPJ(R218H)融合基因,DNA序列分析表明所构建的含myc—RBPJ(R218H)、myc—KyoT2融合基因的质粒与设计相同,myc—RBPJ(R218H)、myc—Ky0T2融合蛋白与绿色荧光蛋白均正确表达。结论:成功构建了含有myc—RBPJ(R218H)、myc—KyoT2融合基因的真核表达载体,并在真核细胞中正确表达,为进一步研究慢性粒细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。 相似文献
4.
目的:观察硼替佐米联合多柔比星脂质体方案治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的临床疗效和毒副反应。方法:MM患者69例,均给予硼替佐米联合多柔比星脂质体方案治疗6个疗程。结果:6疗程后69例患者中完全缓解(complete response,CR)为42.03%(29/69),总有效率为85.51%(59/69)。大于等于60岁患者和小于60岁患者临床疗效两组之间无显著性差异(P>0.05)。不同临床分型各组临床疗效之间无显著性差异(P>0.05)。治疗后血红蛋白较治疗前明显升高,骨髓浆细胞、血M蛋白明显降低,差异显著(P<0.05)。毒副反应程度均可耐受。结论:硼替佐米联合多柔比星脂质体方案治疗MM完全缓解率及总有效率高,对不同分型及年龄组疗效均显著,值得进一步临床观察和推广。 相似文献
5.
背景:Fms 样酪氨酸激酶3配体(Flt3配体)是一种重要的生长因子,通过激活特定的酪氨酸激酶受体,调控造血细胞的生长、生存和/或分化,具有促进造血干细胞体外扩增的应用潜力。
目的:构建pET32a(+)-hFLext原核表达载体,表达、纯化hFLext蛋白,观察其对脐血CD34+细胞的扩增作用。
方法:克隆hFLext,构建pET32a(+)-hFLext重组表达载体。转化大肠杆菌 BL21,IPTG诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白。磁珠分选脐血CD34+细胞,单独加入hFLext或联合干细胞因子、血小板生成素孵育1周,观察体外扩增作用。
结果与结论:成功克隆hFLext,并构建了pET32a(+)-hFLext重组表达载体。在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hFLext融合蛋白,经8 mol/L尿素变性包涵体蛋白,逐步透析复性,镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hFLext融合蛋白。Trx-hFLext融合蛋白不仅具有维持及轻度刺激CD34+细胞体外扩增的作用,并且与干细胞因子及血小板生成素具有协同作用,为造血干/祖细胞体外扩增研究奠定了基础。 相似文献
6.
目的:构建研究H-Ras12V突变蛋白的表达载体,并在体外进行表达和检测.方法:从细胞中分离提取RNA,通过RT-PCR扩增获得人的正常H-RascDNA,测序鉴定.通过PCR介导的定向突变的方法,在其第12位氨基酸处引入一个错义突变G→V,连入测序载体进行鉴定.应用DNA重组技术,将获得的H-Ras12VcDNA插入真核表达载体pEGFP-C2,使用限制性酶切反应鉴定.通过脂质体将重组质粒转染入Hela细胞,使用Western Blot对其融合蛋白进行检测.结果:经过XhoI和BamHI的双酶切以及测序鉴定证实成功构建了pEGFP-H-Ras12V融合蛋白表达载体,克隆基因与GenBank登陆结果一致并成功实现其第12位氨基酸G→V的突变.WesternBlot证实融合蛋白特异性表达,并在转染的细胞系中观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:成功构建了pEG-FP-H-Ras12V融合蛋白的表达载体,并在体外鉴定EGFP-H-Ras12V融合蛋白的表达. 相似文献
7.
目的:构建含有myc-RBPJ(R218H)(recombination binding protein-J)、myc-KyoT2融合基因片段的质粒,并在真核细胞中表达、鉴定。方法:由本科室保存质粒酶切分别得到RBPJ(R218H)和myc-KyoT2基因片段,将RBPJ(R218H)基因插入载体PCMV-myc中,获得融合基因myc-RBP-J(R218H),将myc-RBPJ(R218H)和myc-KyoT2插入真核表达载体pIRES2-EGFP,构建真核表达载体myc-RBPJ(R218H)-IRES2-EGFP、myc-KyoT2-IRES2-EGFP。以其瞬时转染HEK293细胞,应用免疫印迹与流式细胞术检测融合蛋白与绿色荧光蛋白的表达。结果:正确获得myc-RBPJ(R218H)融合基因,DNA序列分析表明所构建的含myc-RBPJ(R218H)、myc-KyoT2融合基因的质粒与设计相同,myc-RBPJ(R218H)、myc-KyoT2融合蛋白与绿色荧光蛋白均正确表达。结论:成功构建了含有myc-RBPJ(R218H)、myc-KyoT2融合基因的真核表达载体,并在真核细胞中正确表达,为进一步研究慢性粒细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。 相似文献
8.
9.
目的构建pET32a(+)-hDll1DSL原核表达载体,表达、纯化hDll1DSL蛋白,观察其对脐带血CD34+细胞的体外扩增作用。方法克隆hDll1DSL,构建pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。转化大肠杆菌BL21,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白。重组信号结合蛋白(RBP-J)报告基因实验及Notch下游分子Hes1检测证实hDll1DSL活性。磁珠分选脐带血CD34+细胞,加入hDll1DSL或联合干细胞因子(SCF)、Flt3配体(FL)、血小板生成表(TPO)孵育1周,观察体外扩增作用。结果成功克隆hDll1DSL,并构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hDll1DSL融合蛋白,经镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hDll1DSL融合蛋白。配体活性实验显示,可溶性的Trx-hDll1DSL蛋白可以激活RBP-J报告基因,并且能上调Notch下游分子Hes1的表达,证明其能够激活Notch信号通路。此外,Trx-hDll1DSL融合蛋白与SCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用。结论成功构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体,表达、纯化了具有生物学活性的Trx-hDll1DSL融合蛋白,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用,为造血干/祖细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础。 相似文献
10.
目的:研究色素上皮衍生因子(PEDF)对缺氧状态下非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:体外培养NSCLC细胞A549,氯化钴(CoCl2)100 μmol/L 模拟缺氧环境。实验分为4组:正常对照组(A组)、氯化钴干预组(B组)、氯化钴+PEDF 50 ng/ml干预组(C 组)及氯化钴+PEDF 200 ng/ml干预组(D组)。MTT检测各组细胞增殖能力,进行划痕实验,在光镜下观察实验组和对照组细胞的移行情况;进行Transwell小室侵袭实验,计算细胞穿透数;进行ELISA法检测各组细胞培养液上清中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平。结果:细胞增殖能力:B组较A组增加,C组较B组降低,D组较C组降低,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05);细胞迁移能力:B组较A组增加,C组较B组降低,D组较C组降低,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05);细胞穿透数:B组较A组增多,C组较B组减少,D组较C组减少,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05);HIF-1α和VEGF的表达水平:B组较A组升高,C组较B组下降,D组较C组下降,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:肺癌A549细胞在缺氧环境较常氧具有更强的增殖力和移行能力;可以分泌HIF-1α,HIF-1α对VEGF的表达有一定的促进作用。PEDF对缺氧状态下A549细胞高表达的VEGF具有一定抑制作用,且该抑制作用可能与PEDF调控HIF-1α有关。 相似文献