发育性髋关节发育不良的发生与防治研究进展

发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip, DDH)是小儿骨科最常见的疾病之一。DDH发病因素复杂, 对其发生与发展的分子调控机制目前尚不清楚。了解髋关节发育过程的分子调节机制与形态学变化, 对DDH发病机制的探究、早期筛查与诊疗策略的制订具有重要意义。近年来, 随着发育生物学、分子生物学、基础医学以及临床医学的发展, 对DDH发生、发展的风险因素以及潜在的致病机制有了更新的认知。本文综述了目前在髋关节进化过程、人类髋关节发育过程中解剖结构的变化、参与骨发育中软骨内成骨的基因及信号通路等方面的研究进展;分析了可能发生发育不稳定的时间节点, 并对DDH发病的危险因素、临床筛查以及诊疗现状进行了总结。胚胎发育过程中股骨头和髋臼的相互作用决定了髋关节的形态发生, 在怀孕5～12周开始出现髋关节软骨雏形, 之后经历初级和次级骨化过程, 发育形成具有完整结构的髋关节。调节骨发育中成软骨和成骨过程的SOX9和RUNX2等因子受到HIF、WNT、FGF及PTHRP等一系列信号通路的调控作用介导髋关节的发育进程。通过临床DDH病例基因检测(全基因组测序...     

胃癌组织中PTEN，DcR3，CyclinE的表达及其相互关系

目的：研究PTEN,DcR3,CyclinE在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法：收集75例随访资料完整的胃癌手术切除标本及15例正常胃组织标本,常规HE染色及应用免疫组织化学方法检测PTEN,DcR3,CyclinE在胃癌组织中的表达。结果：PTEN在胃癌组织中低表达,并随肿瘤浸润深度的加深、淋巴转移的发生及临床分期的增高而降低;DcR3及CyclinE在胃癌组织中高表达,并随肿瘤浸润深度的加深、淋巴转移的产生、临床分期的提高、肿瘤病理分化程度的降低而升高。结论：PTEN与DcR3,CyclinE在胃癌的发生发展中有相互制约或促进作用;各自都可以作为胃癌生物学行为和判断预后的指标。     

胃癌组织中PTEN,DcR3,Cyclin E的表达及其相互关系

目的:研究PTEN,DcR3,Cyclin E在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展的关系.方法:收集75例随访资料完整的胃癌手术切除标本及15例正常胃组织标本,常规HE染色及应用免疫组织化学方法检测PTEN,DcR3,Cyclin E在胃癌组织中的表达.结果:PTEN在胃癌组织中低表达,并随肿瘤浸润深度的加深、淋巴转移的发生及临床分期的增高而降低;DcR3及Cyclin E在胃癌组织中高表达,并随肿瘤浸润深度的加深、淋巴转移的产生、临床分期的提高、肿瘤病理分化程度的降低而升高. 结论:PTEN与DcR3,Cyclin E在胃癌的发生发展中有相互制约或促进作用;各自都可以作为胃癌生物学行为和判断预后的指标.     

FMNL2通过Rho信号通路促进胃癌细胞的侵袭和迁移

目的:研究同源形成素样蛋白2（FMNL2）是否通过Rho信号通路促进胃癌细胞的侵袭和迁移。方法:利用Oncomine数据库中的大数据分析FMNL2在胃癌及癌旁组织中的表达水平。运用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测胃癌细胞系中FMNL2 mRNA和蛋白的表达情况,使用shFMNL2质粒和空载质粒转染胃癌细胞系,并分为敲减组和对照组。采用 CCK8法、划痕实验、Transwell侵袭实验分析细胞的生物学功能,包括增殖、迁移及侵袭能力,利用Western blot方法检测两组细胞经Rho信号通路抑制剂Y27632处理后的E-cadherin、Vimentin及Rho信号通路相关蛋白的表达情况。结果:经生物信息学分析发现FMNL2在胃癌组织中高表达。同样FMNL2在胃癌细胞中表达水平升高。划痕实验和Transwell侵袭实验结果表明敲减组的迁移和侵袭能力显著下降。Western blot结果显示与对照组相比,E-cadherin在敲减组表达上调,Vimentin、RhoA、ROCK在敲减组表达下调。加入通路抑制剂Y27632后,EMT相关蛋白表达可被逆转。结论:下调FMNL2的表达可抑制胃癌细胞的侵袭迁移能力,并且可通过抑制Rho信号通路来实现。     

斑马鱼notch1a对pka报告基因转录调控作用

目的通过双荧光素酶报告基因研究斑马鱼notch1a对pka的转录调控作用。方法利用NCBI数据库获得斑马鱼notch1a基因序列,克隆notch1a基因的胞内段NICD(Notch intracellular domain),构建pCMV-N1aICD表达载体,利用蛋白质印迹法检测N1aICD蛋白的表达水平;利用加州大学圣克鲁兹分校基因组浏览器数据库获得斑马鱼pka基因的启动子序列,构建pGL3-pka报告基因载体,然后在HEK293T细胞系中证实构建的报告基因载体具有活性;将重组荧光素酶报告载体和N1aICD表达载体共转染HEK293T细胞,用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性,验证notch1a胞内段对pka基因转录水平的调控作用。结果经测序验证克隆成功后,蛋白质印迹法检测N1aICD蛋白能够正常表达,且蛋白大小与预测结果一致。双荧光素酶报告基因显示,pGL3-pka组活性为pGL3空载组的3.25倍。转染pGL3-pka和pCMV-N1aICD组活性为转染pGL3-pka和pCMV空载对照组的0.31倍。结论斑马鱼notch1a对pka启动子具有转录抑制作用。在骨形成和骨重建中,Notch通路可能通过调控pka来参与成骨与破骨细胞的分化。