82例卵巢癌患者胚系 BRCAI/2基因突变分析及预后探索

目的∶初步探讨卵巢癌患者胚系 BRCAI/2 基因突变状态,分析其与临床病理特征的关系及对生存预后的影响。方法∶对 2015年1月至 2020年1月在南京医科大学第一附属医院妇科诊断为上皮性卵巢癌的82例患者进行 BRCA1/2基因序列突变检测,分析患者 BRCA1/2 基因致病性突变情况,探讨其与临床病理特征包括发病年龄、月经状态、FICO分期、组织学分级、病理类型、敏感性、CA125水平、淋巴结转移、大网膜饼,膈顶转移,结肠侵犯等的相关性。单因素及多因素COX 回归分析研究各因素对生存预后的影响。结果∶82例上皮性卵巢癌患者中,BRCA7 胚系致病性突变率为20.73%,BRCA2 胚系致病性突变率为9.75%,总突变率为30.48%。共发现 18个致病突变位点及2个意义未明的突变位点。单因素分析发现BRCA1/2基因突变与病理类型、铂敏感、新辅助化疗相关,具有统计学意义（P<0.05）;另外,BRCA1/2突变组与BRCA1/2野生组相比,中位无进展生存期（pmogression free survival,PFS）分别为18.6个月和12.8个月,突变组较未突变组中位 PFS延长了5.8个月（P<0,06）。多因素COX回归分析显示.铂敏感（P<0.001;HR=0.023;95% CI∶0.008~0.072）和是否存在结直肠侵犯（P=0.0065;HR=2.810;95% CI∶1.387~5.693）为卵巢癌 PFS的独立预后因素。结论∶上皮性卵巢癌患者中具有较高的BRCA1/2 基因突变率,且与恶性程度较高的浆液性癌病理类型有关;BRCA1/2基因突变的患者多对铂敏感,预后较好。然而,BRCA突变状态并非是上皮性卵巢癌 PFS的独立预后因素,还需更大规模的前瞻性对照临床研究对其对生存预后的影响进行探索。对突变位点的检测将有助于评估疾病风险和预测患者病情进展,具有一定的临床意义。     

卵巢上皮性癌类器官的建立及初步应用

目的探索卵巢上皮性癌(卵巢癌)类器官的建立方法及初步应用。方法收集2021年10月至2022年3月于南京医科大学第一附属医院行手术治疗的32例卵巢癌患者的新鲜癌组织标本, 通过组织酶解、消化、基质凝胶包埋等流程建立卵巢癌类器官。采用HE染色与免疫荧光染色验证卵巢癌类器官的形态结构与分子标志物的表达, 3D类器官细胞活性染色法检测卵巢癌类器官细胞的活性状态。在卵巢癌类器官培养液中分别加入不同浓度(5、10、20、40、80 μmol/L)的卡铂, 计算卵巢癌类器官对卡铂的50%抑制浓度(IC50)。结果 (1)32份卵巢癌组织标本中, 18份在体外产生可稳定传代的类器官, 体外稳定扩增时间均>3个月, 最长者达9个月;14份可短期传代的类器官, 连续扩增时间均<2个月。(2)HE染色显示, 卵巢癌类器官的细胞核呈明显的异型性, 且局部可形成微乳头状结构。免疫荧光染色显示, 卵巢癌类器官表达与原代卵巢癌相似的分子标志物, 如广谱细胞角蛋白(Pan-CK)、p53、配对盒基因8(PAX8)、Wilms瘤基因1(WT1)。(3)3D类器官细胞活性染色法检测显示, 卵巢癌类器官内部及...