微囊化转mIFN-γ基因CHO细胞皮下移植促进荷瘤小鼠TH1/TH2的漂移

目的：通过观察微囊化转mIFN-γ基因CHO细胞皮下移植对荷瘤小鼠TH1／TH2类细胞因子的影响，进一步了解外源性IFN－γ对TH1／TH2平衡的调节作用，同时验证微囊化基因工程细胞移植治疗恶性肿瘤的可行性。方法：将mIFN-γ基因转染到正常细胞CHO，然后进行微囊化，移植到荷瘤小鼠的皮下，2周后，测定小鼠血清TH1和TH2类细胞因子IFN－γ、IL－2、IL－12、IL－4、IL－10的水平，并与对照组相比较。同时测量肿瘤的平均直径，以观察肿瘤的生长速度，并观察荷瘤小鼠的生存期。结果：经微囊化转mIFN-γ基因CHO细胞皮下移植干预治疗后，小鼠血清TH1类细胞因子IFN－γ、IL－2、IL－12水平明显升高，而TH2类细胞因子IL－4、IL－10变化不明显；小鼠肿瘤的生长速度明显减慢，生存期明显延长。结论：外源性IFN－γ促进荷瘤小鼠TH1细胞的分化，使TH1／TH2向着TH1方向漂移；微囊化基因工程细胞的移植，有望替代基因工程药物，成为治疗恶性肿瘤的又一新平台。     

肝癌组织中诱导型一氧化氮合酶的表达及其与血管形成、bcl-2和细胞增生的关系

一氧化氮合酶 (NOS)是NO合成的关键限速酶 ,它的生物学活性直接决定着NO的合成量。NOS有两个异构体 ,即结构型NOS(cNOS)和诱导型NOS(iNOS)。通常iNOS与肿瘤的免疫相关 ,且产生NO的能力较cNOS高出 10 0～ 10 0 0倍。NOS活性的增高与肿瘤血管形成关系密切[1] 。另有研究显示 ,iNOS产生的NO可通过bcl 2介导途径抑制细胞凋亡并有利于生长停止的肿瘤细胞的存活[2 ] 。我们采用免疫组织化学法检测肝细胞性肝癌中iNOS、血管内皮生长因子(VEGF)、CD34标记的微血管密度 (MVD)及凋亡相关蛋白bcl 2和p5 3蛋白的表达。同时应用流式…     

原发性支气管肺癌患者止血、凝血功能检测及其临床意义

我们对 39例原发性支气管肺癌患者的止血、凝血功能进行了检测 ,旨在探讨其临床意义。资料与方法 :本文观察组为 39例原发性支气管肺癌患者 ,其中男 2 5例 ,女 14例 ;年龄 2 6～ 77岁 ,平均 46 .5岁。经X线胸片及 CT检查 ,诊断为中心型肺癌 30例 ,周围型肺癌 9例 ;2 3例行纤维支气管镜及活组织病理检查 ,诊断为腺癌 6例 ,小细胞未分化癌 4例 ,鳞状上皮癌 13例。 39例患者均有纵隔或肺门淋巴结转移 ,2例发生胸膜转移 ,4例发生锁骨上窝或腋窝淋巴结转移 ,2例合并上腔静脉压迫综合征。肝功能检查未见异常。确诊后应用 1 2 5 放射免疫 (RIA)…     

天门冬酰胺酶致一过性糖尿病1例

患者,女,11岁,因游走性关节痛50天于1998年2月25日入院,经骨髓细胞学检查示原幼淋巴细胞092,诊断:急性淋巴细胞性白血病(ＡＬＬＬＬ2)。2月27日给予ＶＤＬＤ方案联合化疗1疗程,其中ＬＡＳＰ(左旋门冬酰胺酶)共应用8万ＩＵ。3月12日复查骨髓示幼淋0.02。后循序行ＣＡＴ方案巩固治疗→ＨＤＭＴＸ方案,每10天1次,共3次。庇护所预防→ＶＡ方案强化治疗及ＶＤ方案 6Ｍｐ维持治疗。9月1日始给予ＶＤＬＤ方案强化治疗。4日始用门冬酰胺酶1万ＫＵ(日本协和发酵工业株式会社)加液静滴,每日1次。6日晨出现多尿、多饮,且渐加重。7日(第4日)晨急查尿示尿…     

原发性肝癌止血凝血障碍变化及其临床意义

1994年以来,我们对43例原发性肝癌患者进行止血凝血障碍及其病理变化的临床意义进行了研究总结如下。1　资料与方法1.1　一般资料　43例初诊原发性肝癌患者,男28例,女15例,年龄35～66岁,平均51.8岁。43例患者均行CT、B超、AFP以及X线检查,其中合并门脉性肝硬化28例。43例患者血HBsAg均呈阳性,ALT>40U37例,AFP≥400ng/m132例,AFP<400ng/ml(>20ng/ml)11例,影像学检查显示所有初诊病人均有肝或和伴腹膜后淋巴结及肺转移。1.2　方法　对于初诊明确原发性肝癌诊断患者,于未行针对性治疗前行血浆血栓烷B2(TXB2)、血浆血管性假血友病因子…     

IL-18基因转染人乳腺癌细胞系的建立及其表达的研究

目的　建立转人白细胞介素 -18(h IL -18)基因的乳腺癌细胞株 ,并研究 h IL -18的表达情况。方法　将携带人白细胞介素 -18的质粒 pc DNA3 .1-h IL -18转导入人乳腺癌细胞系 Bcap3 7中 ,通过药物 G-418进行筛选 ,利用 RT-PCR和 EL ISA法对白细胞介素 -18(IL-18)的表达进行检测。结果　 IL-18基因成功地转导入 Bcap3 7细胞中并能顺利表达。RT-PCR电泳结果显示 IL -18基因在 m RNA水平有表达 ;EL ISA结果显示 ,10 6个转导细胞在 2 4小时内分泌 IL-18的含量为 (186.3± 15.7) pg;空载体转染的细胞未检测到 IL-18。结论　人 IL-18基因成功地整合到乳腺癌细胞系 Bcap3 7细胞基因组中 ,且能持续大量表达     

大肠癌组织endostatin的表达与血管生成的关系

目的　探讨内皮抑制素 ( endostatin)蛋白在大肠癌组织中的表达及其与 VEGF、微血管密度 ( MVD)的关系。方法　应用免疫组化 S- P法 ,检测 6 8例大肠癌及其正常大肠组织 endostatin表达、VEGF表达及 MVD。结果　 endostatin蛋白可在大肠癌组织的肿瘤细胞、内皮细胞及浸润淋巴细胞中表达。 endostatin表达与 Dukes分期密切相关。endostatin高表达组的 MVD( 12 .35± 4.96 )明显低于 endostatm低表达组 ( 16 .38± 6 .2 8)。 VEGF染色阳性组与阴性组的 endostatin蛋白表达差异无显著性。结论　 endostatin在大肠癌组织的不同类型细胞中出现 ,与大肠癌血管生成密切相关 ,endostatin的表达水平随着 Dukes分期的进展而降低反映了血管生成促进因子和抑制因子之间平衡的转变。     

微囊化转mIL-12基因细胞介导荷瘤小鼠TH1/TH2的漂移

目的　观察微囊化mIL 1 2基因修饰的 (中国仓鼠卵巢 )CHO细胞皮下移植对荷瘤小鼠TH1 TH2 类细胞因子的影响 ,进一步了解外源性IL 1 2对TH1 TH2 平衡的调节作用 ,同时探讨微囊化基因工程细胞移植治疗恶性肿瘤的可行性。方法　将mIL 1 2基因转染到正常细胞CHO ,然后进行微囊化 ,移植到荷瘤小鼠的皮下。 2 0d后 ,测定小鼠血清TH1 和TH2 类细胞因子IFN γ、IL 2、IL 1 2和IL 4、IL 1 0的水平。结果　经微囊化mIL 1 2基因修饰的CHO细胞皮下移植干预治疗后 ,小鼠血清TH1 细胞因子IFN γ、IL 2、IL 1 2水平明显升高 (P <0 .0 5) ,而TH2 类细胞因子IL 4、IL 1 0则明显降低 (P <0 .0 5)。结论　外源性mIL 1 2促进荷瘤小鼠TH1 细胞的分化 ,使TH1 TH2 向着TH1 方向漂移 ;微囊化基因工程细胞的移植 ,有望替代基因工程药物 ,成为恶性肿瘤生物免疫治疗的平台     

SRRS方剂抑制消化道恶性肿瘤P53基因突变的实验研究

 目的：从分子水平探讨SRRS方剂治疗消化道癌的可能机制。方法：选用Lovo结肠腺癌细胞裸小鼠移植瘤模型,观察中药SRRS方剂抑制移植瘤生长的作用,并用PCR-SSCP银染色法研究SRRS方剂对Lovo移植瘤生长过程中P⁵³基因突变的影响情况。结果：对照组有50%(5/10)发生P⁵³基因第七外显子突变,SRRS方剂治疗组无(0/10)此现象(P<0.05)。结论：提示SSRS方剂能抑制lovo移植瘤生长过程中P⁵³基因的突变,即SRRS方剂可对肿瘤生长过程中肿瘤细胞的基因水平有影响作用。     

微囊化小鼠白介素12基因工程细胞的长效抗肿瘤作用

目的　探讨通过微囊化能否获取长效抗肿瘤的小鼠白介素 12 (mIL 12 )基因工程细胞。方法　构建pcDNA3.1/mIL 12重组表达质粒 ,然后稳定转染CHO细胞 ,采用海藻酸钠微囊制作技术 ,将mIL 12基因修饰的CHO细胞包裹。观察微囊化mIL 12基因工程细胞的mIL 12释放 ,并将微囊化细胞植入荷瘤小鼠体内 ,测定小鼠的抗肿瘤免疫功能及抑瘤效应。结果　微囊化mIL 12基因工程细胞产生的mIL 12蛋白可自由透过微囊膜。植入荷瘤小鼠体内2 1d后 ,微囊化mIL 12基因工程细胞治疗组血清中mIL 12 ,mIL 2及mIFN γ水平分别为 (5 49± 5 3) ,(180± 2 9)和 (10 0 8± 15 6 )ng·L- 1,而mIL 4 ,mIL 10水平则显著降低。脾脏细胞毒T淋巴细胞 (CTL)活性及自然杀伤细胞 (NK)活性均显著增高 ,肿瘤生长受到显著性抑制 ,荷瘤小鼠的存活期明显延长。结论微囊化mIL 12基因工程细胞在体内可持续、稳定地释放mIL 12 ,能激发机体产生持久而强大的抗肿瘤免疫反应 ,对实验小鼠产生明显的抗肿瘤效应并延长其生存期。