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目的：研究1,4-苯醌对人慢性髓系白血病细胞（K562细胞）线粒体功能及凋亡的影响。方法：分别用终浓度为0、10、20 μmol/L的1,4-苯醌处理K562细胞24 h,用CCK-8法检测细胞活力,通过流式细胞仪检测活性氧（ROS）生成量;用线粒体膜电位、三磷酸腺苷（ATP） 生成量来评价线粒体功能;用PI-Annexin V双染法检测细胞的凋亡,采用分光光度法检测caspase-3酶的活性。结果：与对照组比较,1,4-苯醌10和20 μmol/L染毒组K562细胞相对增殖率均降低（P均<0.05）;随着1,4-苯醌浓度的增加,ROS生成量逐渐上升、线粒体膜电位和ATP生成量均逐渐降低、细胞的凋亡率逐渐增高,其中1,4-苯醌20 μmol/L染毒组与对照组间的差异均有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）;caspase-3活性逐渐升高,1,4-苯醌10和20 μmol/L染毒组与对照组相比差异均有统计学意义（P均<0.01）。结论：1,4-苯醌可以诱导K562细胞ROS升高,抑制K562细胞增殖,造成线粒体功能障碍,诱导细胞凋亡升高,提示线粒体障碍在1,4-苯醌诱导K562细胞凋亡的过程中发挥了重要作用。 相似文献
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目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,PBQ)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)的凋亡效应与调控机制。方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的PBQ处理HELF细胞24 h和40μmol/L PBQ处理HELF细胞24、48、72 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测PBQ对HELF细胞增殖的抑制作用,以PI单染法检测细胞周期的改变,用Annexin-Ⅴ/PI双染法检测细胞凋亡,以实时荧光PCR法检测Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平的改变。结果:与对照组相比,不同PBQ染毒浓度下作用24 h后,随PBQ浓度增加,细胞相对增殖率显著下降(P0.05),G0/G 1期细胞下降(在40和60μmol/L时,P0.05),S期细胞增加(P0.05),以40μmol/L PBQ浓度作用于HELF细胞不同时间,随着染毒时间的增加其相对增殖率和S期细胞均下降(P0.05),而G0/G1期细胞随着染毒时间的增加呈上升趋势(P0.05);当染毒浓度大于20μmol/L时,染毒24 h可诱导HELF细胞产生凋亡,凋亡率随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05);不同浓度的PBQ染毒24 h,细胞的Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平均上调。40μmol/L PBQ作用不同时间后,Bax、p53 mRNA水平随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异均具有统计学意义(P均0.05);Bcl-2随染毒时间增加而下降,48和72 h时与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05);Bax/Bcl-2比值随染毒时间增加而增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。结论:PBQ能抑制HELF细胞增殖,影响HELF细胞周期分布,诱导细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值的上升,及p53 mRNA表达的上调有关。 相似文献
3.
目的：研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）高表达对苯代谢物1,4-苯醌、氢醌、苯酚诱导K562细胞毒性的影响。方法：用不同浓度的1,4-苯醌（0、10、20、40、80 μmol/L）、氢醌（0、10、20、40、80 μmol/L）、苯酚（0、1、1.5、2、2.5、5 mmol/L）分别染毒对照组K562细胞及高表达HIF-1α的K562细胞24 h,MTT法检测细胞增殖情况,PI/FITC Annxein V双染结合流式细胞术检测细胞凋亡率,碘化丙啶结合流式细胞术检测细胞周期。结果：MTT实验结果显示,1,4-苯醌染毒后,两株细胞均出现增殖率下降且呈剂量效应关系,1,4-苯醌浓度为80 μmol/L时,高表达HIF-1α的K562细胞增殖率高于对照组K562细胞（P < 0.05）。氢醌和苯酚在较高浓度染毒后,对照组K562细胞亦出现增殖抑制,而高表达HIF-1α的K562细胞增殖无明显抑制。流式细胞术结果显示,1,4-苯醌染毒后,两株细胞的细胞凋亡率增加且呈剂量效应关系。20 μmol/L浓度1,4-苯醌染毒时,高表达HIF-1α的K562细胞较对照组K562细胞凋亡减弱（P < 0.05）。氢醌和苯酚染毒后,两株细胞的凋亡率与未染毒组比较,差异均无统计学意义（P均 > 0.05）,高表达HIF-1α的K562细胞的凋亡率较对照组K562细胞亦无显著差异。细胞周期检测结果显示,3种苯代谢物均可引起K562细胞周期阻滞在G0/G1期或S期。结论：3种苯的代谢物中,1,4-苯醌对K562细胞的毒性大于氢醌和苯酚,HIF-1α高表达可降低苯代谢物引起的细胞毒性,其作用的发挥可能是通过调节细胞增殖及凋亡而实现。 相似文献
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