氟对小鼠胸腺及上皮细胞形态与功能的影响

目的研究氟化物对胸腺上皮细胞的毒性作用及对胸腺细胞发育的影响,探讨其作用机制。方法采用小鼠胸腺上皮细胞原代体外培养及与胸腺细胞混合培养技术,观察不同剂量氟化钠(NaF)对小鼠胸腺上皮细胞形态与功能的损伤情况及胸腺细胞在NaF处理的小鼠胸腺上皮细胞环境中的生长发育状况。结果染氟组可见小鼠胸腺上皮细胞胞体变圆,折光性增强,胞浆内有空泡形成,小鼠胸腺上皮细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性增强,胸腺上皮细胞合成DNA和蛋白质的能力降低,白细胞介素1(IL-1)分泌量减少,并呈一定的剂量反应关系。不同剂量NaF处理的小鼠胸腺上皮细胞与新鲜的胸腺细胞混合培养,随着染氟剂量的增加,胸腺细胞摄取3H-Tdr和3H-Leu的能力降低,活细胞数目逐渐减少。结论高氟能够直接损伤小鼠胸腺上皮细胞、破坏胸腺微环境,进而导致胸腺细胞发育障碍,影响免疫功能。     

母体慢性氟暴露对仔鼠免疫功能的影响

通过亲代雌鼠慢性染毒，系统研究了氟对Ｆ１代仔鼠免疫机能的影响。结果表明，氟可明显抑制仔鼠足垫肿胀反应、脾ＩｇＭ抗体形成细胞活性以及胸腺细胞ＤＮＡ和蛋白质的合成，并降低末梢血中Ｔ淋巴细胞百分率。本研究为寻找母体慢性氟暴露对后代危害的早期敏感指标提供了理论依据。     

氧化砷对NB4和Jurkat细胞周期的影响

目的：研究氧化砷(As2O3)对白血病细胞系NB4、Jurkat细胞周期的影响及对细胞周期及凋亡相关蛋白的调节作用。方法：以MTT、基因组DNA电泳、蛋白／DNA双参数流式细胞术等方法研究As2O3对白血病细胞的作用及机制。结果：随着As2O3作用时间的延长，白血病细胞增殖明显受到抑制，DNA电泳出现“梯”状条带，流式细胞术检出亚G1峰，细胞周期阻滞于G1和G2／M期，部分细胞周期及凋亡相关的调控蛋白表达改变。结论：As2O3通过改变细胞周期及凋亡相关蛋白的表达而抑制白血病细胞增殖和诱导其凋亡。     

烟草特异亚硝胺NNK诱发人胎肺细胞癌变启动模型的建立

观察烟草特异亚硝胺ＮＮＫ在诱发人胎肺组织（ＨＦＬＴ）癌变中的启动作用。结果显示：（１）在０～５００μｇ／ｍｌ范围内，ＨＬＦＴ中８ＯＨｄＧ含量随ＮＮＫ剂量的增加而增高；（２）５００μｇ／ｍｌＮＮＫ处理组ＨＬＦＴＤＮＡ与Ｎｅｕ基因共转染后所得Ｇ４１８抗性细胞可在裸鼠体内形成纤维肉瘤，且细胞形态呈多角形，提示ＮＮＫ所致ＨＬＦＴＤＮＡ损伤使其获得了转化Ｒａｔ１细胞的潜能。说明ＮＮＫ在诱导ＨＬＦＴ癌变中发挥启动作用，并为研究肺癌早期分子标志提供了线索     

醋氨酚对小鼠培养肝细胞的毒性作用:Ca~(2+)-核酸内切酶、DNA修复和谷胱甘肽保护剂对DNA断裂和细胞死亡的影响

钙离子失调在细胞损害机制中起着重要作用,但它并非细胞死亡的直接原因。近来有关醋氨酚肝脏毒性的研究发现,细胞核 Ca~(2+)蓄积和 DNA 断裂与细胞死亡密切相关,提示醋氨酚所致钙失调激活 Ca~(2+)-核酸内切酶,引起DNA 断裂,进而造成细胞死亡。     

NNK处理BEP2D细胞中8—羟基鸟嘌呤含量的变化

烟草致癌物与人类肺癌发生密切相关［１］。近年来，许多学者把甲基亚硝胺吡啶基丁酮（ＮＮＫ）作为一种代表性的烟草特异亚硝胺广泛应用于烟草的致癌机理研究。此外，ＤＮＡ加合物形成，作为评价人类接触致癌物水平和早期损害的指标之一［２，３］，可用于评价人类癌症危...     

铅对雄性生殖功能的影响

铅是一种工业用途非常广泛的金属,也是较早为人类所知能够妨害生殖功能的毒物。铅对雄性生殖功能的影响主要表现在损害或干扰精子的正常发生过程,导致性功能减退、不育、子代发育异常或先天疾患。近年来化学物的生殖毒性日益受到人们的重视,尤其是生殖学、生殖毒理学和遗传毒理学的迅猛发展,人们对铅雄性生     

SEN病毒部分基因的克隆及序列测定

目的：了解我国人群中是否存在SEN病毒(SENV)感染,并分析SENV国内分离株的部分基因序列,方法：在SENV的保守区设计引物,建立巢式PCR方法检测血清中SENV DNA,并对PCR产物进行克隆,测序,结果,7例非甲－非瘐型肝炎,且输血传播病毒（TTV）阴性患者中,2例SENV阳性,其中一株的序列与意大利SENV－D株（AX－25730）相对应位置核苷酸序列同源性为90％,结论：本研究证初了我国存在SENV感染,建立了检测SENV的PCR方法,并对SENV部分基因进行了克隆及测序,对进一步开展SENV诊断和流行病学调查具有重要意义。     

丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a的克隆表达及其cDNA序列分析

目的：从丝瓜籽中克隆核糖体失活蛋白luffin-a基因，并在原核系统进行表达。方法：根据已报道的cDNA序列设计引物，用RT-PCR的方法从成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a基因，克隆后鉴定核苷酸序列。构建表达载体pET-28a（＋）-luffin-a，转化大肠杆菌BL21（DE3），并经IPTG诱导表达。利用金属离子亲和层析的方法纯化所得目的蛋白。结果：克隆的luffin-a基因及其所编码的氨基酸序列与国外报道的核苷酸序列及氨基酸序列同源性分别为95％和92％，因而所获得的luffin-a基因是丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a一个新的cDNA序列。经SDS-PAGE分析：luffin—a主要存在于包涵体中。金属离子亲和层析可纯化目的蛋白。结论：本研究成功地克隆了luffin-a一个新的序列，并建立了该蛋白的原核表达系统，同时利用亲和层析可一步法纯化获得目的蛋白。     

HLA—DR分子的分离纯化

目的：纯化HLA－DR。方法：纯化抗HLA－DR单克隆抗体1243并与CNBr活化的Sepharose4B偶联亲和柱,应用免疫亲和层析方法纯化HLA－DR分子。结果;从5g HLA-DR阳性的人B淋巴瘤细胞系RAJI裂解液中得到20μHLA-DR分子。它们以二聚体形式存在,能与构象依赖型单抗L243进行结合,煮沸变性后分开为α和β两条单链。这为MHCⅡ类分子抗原表位研究奠定了基础。