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为研究Nogo-A基因沉默对细胞凋亡的影响,本文构建了靶向Nogo-A的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体并经脂质体转染到培养的PC12细胞。分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测转染48h后Nogo-A mRNA及蛋白表达的变化。在转染后不同时间应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,用原位末端标记(TUNEL)法及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果显示:由shRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可有效抑制PC12细胞Nogo-A基因的表达。Nogo-A siRNA处理组细胞的增殖活性增加、凋亡率明显下降。本结果提示,Nogo-A基因可能与细胞凋亡有关。 相似文献
2.
五例老年人高位颈髓肿瘤的手术治疗谢光天陈海姚东晓一、临床资料从1979年3月至1997年6月,我们共收治高位颈髓肿瘤24例,其中老年人5例,占20.8%。男性3例,女性2例。年龄61~70岁,平均63.7岁。从发病至首次手术的病程为3个月~4年,其中... 相似文献
3.
胶质瘤组织中CD105与Ki-67表达的相关性 总被引:1,自引:1,他引:1
目的探讨胶质瘤组织中CD105与Ki-67表达的相关性。方法对58例胶质瘤和10例正常脑组织标本采用免疫组织化学方法检测CD105和Ki-67蛋白表达情况,并分析其相关性。结果①正常脑组织CD105蛋白表达阴性,而各级胶质瘤组织均有CD105蛋白阳性表达。高倍视野(×200倍)下Ⅰ~Ⅳ级胶质瘤组织CD105标染的微血管密度(CD105-MVD)分别为(6.33±2.97)个/视野、(10.69±2.88)个/视野、(19.13±5.14)个/视野和(25.13±5.51)个/视野,随病理分级提高逐渐增高(r=0.834,P<0.01),且不同级别胶质瘤间差异显著(P<0.01)。②Ⅰ~Ⅳ级胶质瘤组织Ki-67标记指数(Ki-67LI)分别为(4.20±1.30)%、(5.32±2.08)%、(9.88±3.24)%和(22.25±6.68)%,随病理分级升高逐渐增高(r=0.872,P<0.01),与正常脑组织比均有显著性差异(P<0.01)。除Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤间无明显差异(P>0.05)外,其他各级别胶质瘤间均相差显著(P<0.01)。③CD105-MVD与Ki-67LI呈显著正相关(r=0.699,P<0.01)。结论胶质瘤组织中CD105-MVD与Ki-67LI有显著相关性,提示其可作为判断胶质瘤恶性程度的指标。 相似文献
4.
目的 研究Nogo-A基因沉默对PC12细胞多巴胺释放的影响.方法 构建靶向Nogo-A的短发夹样RNA(shRNA)真核表达载体,并经脂质体转染PC12细胞,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法检测对Nogo-A mRNA及蛋白的抑制效应.采用高效液相色谱仪(HPLC)检测转染前后多巴胺释放的变化.结果 将重组质粒转染到PC12细胞48h后,Nogo-A基因表达明显受抑、多巴胺释放量减少.结论 Nogo-A可能参与PC12细胞多巴胺的释放. 相似文献
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目的 探讨TNP-470联合化疗药物卡氮芥(BCNU)对人U-251胶质母细胞瘤细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用.方法 将人U-251胶质母细胞瘤细胞株注射至裸鼠皮下,第7天荷瘤裸鼠随机分为4组:TNP-470治疗组、BCNU治疗组、TNP-470和BCNU联合治疗组、对照组.测体质量及肿瘤大小,以山羊抗小鼠CD105多克隆抗体免疫组化染色计数肿瘤微血管密度(MVD).结果 治疗后第21天联合治疗组移植瘤体积[(108.93±17.63)mm3]明显小于TNP-470治疗组[(576.10±114.29)mm3]及BCNU治疗组[(473.01±48.04)mm3](P均<0.01);各治疗组移植瘤体积均小于对照组[(1512.61±470.25)mm3](P均<0.01);TNP-470治疗组与BCNU治疗组间移植瘤体积差异无统计学意义(P>0.05).治疗后第21天联合治疗组的抑瘤率(92.80%±11.37%)显著高于TNP-470治疗组(61.91%±6.29%)和BCNU治疗组(68.73%±9.65%)(P均<0.01),TNP-470治疗组与BCNU治疗组间抑瘤率无统计学意义(P>0.05).联合治疗组移植瘤MVD[(4.23 4±0.83)个/视野]明显低于TNP470治疗组[(5.70±0.85)个/视野]和BCNU治疗组[(8.60±0.87)个/视野](P均<0.05);TNP-470治疗组移植瘤MVD显著低于BCNU治疗组(P<0.05);各治疗组移植瘤MVD均较对照组[(11.32±1.50)个/视野]显著降低(P均<0.05).结论 TNP-470联合化疗药物BCNU对人U-251胶质母细胞瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的生长有显著抑制作用. 相似文献
6.
目的研究Nogo-A主要功能片段Nogo-66、amino-Nogo对大鼠皮质神经元细胞内钙离子浓度的影响。方法体外原代培养并鉴定新生大鼠皮质神经元,将神经元按照干预药物不同分为对照组(给予Krebs-ringer液)、Nogo-66组、amino-Nogo组、amino-Nogo+尼莫地平组,以Fluo4/AM标记神经元细胞内钙离子,采用激光共聚焦显微镜技术检测药物干预1、3、5、7 min时各组神经元细胞内钙离子信号。结果加入药物后,对照组和Nogo-66组神经元细胞内钙离子信号强度在各时间点未见明显变化(P>0.05),而amino-Nogo组和amino-Nogo+尼莫地平组钙离子信号持续升高(P<0.05)。组间比较结果显示,在药物干预1 min时,4组间的神经元细胞内钙离子信号比较差异无统计学意义(P>0.05);在药物干预3、5、7 min时,Nogo-66组神经元细胞内钙离子信号与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05),而amino-Nogo组和amino-Nogo+尼莫地平组神经元细胞内钙离子信号与对照组和Nogo-66组同时间点比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在药物干预3 min时,amino-Nogo组神经元细胞内钙离子信号与amino-Nogo+尼莫地平组比较差异无统计学意义(P>0.05);在药物干预5、7 min时,amino-Nogo组神经元细胞内钙离子信号高于amino-Nogo+尼莫地平组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 amino-Nogo是Nogo-A中导致神经元细胞内钙离子浓度升高的责任功能片段。 相似文献
7.
目的探讨CD105在胶质瘤组织中的表达及其意义。方法对58例胶质瘤和10例正常脑组织标本采用免疫组织化学方法检测CD105蛋白表达情况,同时与干细胞相关抗原(CD34)表达情况作对比分析。结果①正常脑组织CD105蛋白表达阴性,而各级胶质瘤组织均有CD105蛋白阳性表达。高倍视野(×200)下Ⅰ~Ⅳ级胶质瘤组织CD105标染的微血管密度(CD105-MVD)分别为(6.33±2.97)个/视野、(10.69±2.88)个/视野、(19.13±5.14)个/视野和(25.13±5.51)个/视野,随病理分级提高逐渐增高(r=0.834,P<0.01),且不同级别各组间均差异显著(P<0.01)。②胶质瘤及正常脑组织均有CD34蛋白阳性表达。高倍视野(×200)下Ⅰ~Ⅳ级胶质瘤组织CD34标染的MVD(CD34-MVD)分别为(10.60±4.72)个/视野、(16.65±4.40)个/视野、(28.53±7.72)个/视野和(38.95±7.98)个/视野,随病理分级升高逐渐增高(r=0.571,P<0.05),除Ⅰ级胶质瘤与正常脑组织[(9.80±3.52)个/视野]及Ⅱ级胶质瘤间CD34-MVD无明显差异(P>0.05)外,其他不同级别胶质瘤各组间差异均有显著性(P<0.01)。③CD105-MVD较CD34-MVD与胶质瘤病理分级具有更紧密的联系(u>1.96,P<0.05)。结论CD105优于CD34,可作为胶质瘤特异性血管内皮细胞标记物并用于测定肿瘤血管生成。 相似文献
8.
目的探讨脑桥中央髓鞘溶解症合并脑桥外髓鞘溶解症的磁共振成像(MRI)动态变化特点。方法报道3例患者纠正低钠血症后,先后出现脑桥外髓鞘溶解症和脑桥中央髓鞘溶解症,对脑桥外髓鞘溶解症和脑桥中央髓鞘溶解症的MRI动态演变特点进行分析。结果患者临床出现髓鞘溶解相关症状2~3 d后,MRI呈现基底节区对称性弥散受限等脑桥外髓鞘溶解症的特征性改变。1~2周后脑桥出现明显弥散受限,病灶呈"蝙蝠翅"或"三叉戟"样。2例患者遗留部分神经系统缺损症状,1例患者持续昏迷。结论可疑髓鞘溶解症MRI出现基底节区对称性弥散受限,预示脑桥中央髓鞘溶解发生。 相似文献
9.
This study established superparamagnetic iron oxide (SPIO)-labeled nerve growth fac-tor-β (NGF-β) gene-modified spinal cord-derived neural stem cells (NSCs). The El4 rat embryonic spinal cord-derived NSCs were isolated and cultured. The cells of the third passage were transfected with plasmid pcDNA3-hNGFβ by using FuGENE HD transfection reagent. The expression of NGFβ was measured by immunocytochemistry and Western blotting. The positive clones were selected, allowed to proliferate and then labeled with SPIO, which was mediated by FuGENE HD transfection reagent. Prussian blue staining and transmission electron microscopy (TEM) were used to identify the SPIO particles in the cells. The distinctive markers for stem cells (nestin), neuron (β-Ⅲ-tubulin), oligodendrocyte (CNPase) and astrocyte (GFAP) were employed to evaluate the differentiation ability of the labeled cells. The immunocytochemistry and western blotting showed that NGF-β was expressed in spinal cord-derived NSCs. Prussian blue staining indicated that numerous blue-stained particles appeared in the cytoplasma of the labeled cells. TEM showed that SPIO particles were found in vacuolar structures of different sizes and the cytoplasma. The immunocytochemistry demonstrated that the labeled cells were nestin-positive. After differentiation, the cells expressed β-Ⅲ-tubulin, CNPase and GFAP. It was concluded that the SPIO-labeled NGF-β gene-modified spinal cord-derived NSC were successfully established, which are multipotent and capable of self-renewal. 相似文献
10.
颅内动脉瘤是严重威胁人类生命健康的一种.是造成自发性蛛网膜下腔出血的首位原因.该病最大的特点是较高的残死率,即使在现代的医疗条件下颅内动脉瘤破裂出血的死亡率仍高达40%[1]. 相似文献