口腔癌前病变和鳞癌组织中hMSH2蛋白表达的初步探讨

目的:探讨错配修复基因hMSH2的表达与口腔鳞癌发生、发展的关系.方法:采用Western Blot和免疫组化方法检测正常口腔上皮组织、癌旁组织和鳞癌组织中hMSH2的蛋白含量和组织分布.结果:Western Blot检测发现口腔正常上皮组织与癌旁上皮组织的hMSH2表达无明显差异(P＞0.05),而鳞癌上皮内hMSH2蛋白表达较前两者显著增加(P＜0.05).免疫组化结果显示正常上皮内仅见基底层细胞胞核阳性表达;癌旁上皮内hMSH2蛋白表达与异常增生程度有关,异常增生明显的上皮,胞核阳性表达的细胞亦较多;hMSH2蛋白在鳞癌上皮全层细胞胞核内呈阳性表达.所有细胞的胞浆均未见阳性表达.结论:在口腔鳞癌组织中hMSH2蛋白表达水平升高,表明hMSH2的表达在口腔鳞癌的发生、发展过程中可能存在表观遗传调节.     

实验性大鼠舌癌p16CDKN2A外显子1甲基化状态研究

目的 :检测实验性大鼠舌癌发生发展过程中 p16CDKN2A基因exon 1的甲基化状态 ,探讨关键基因甲基化在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法 :0 .0 2 g/L 4 硝基亚氧喹啉 (4NQO)饮水饲养清洁级SD大鼠 3 0只 ,分别于第 13、16、2 4周切取其正常组织、中重度异常增生组织及鳞癌组织 ;应用甲基化特异性PCR检测上述组织中p16CDKN2A基因exon 1的甲基化状态。结果 :所有实验标本均扩增出 12 3bp的非甲基化产物 ,但未检测出甲基化产物。结论 :应用 4NQO成功建立实验性SD大鼠舌癌模型 ;抑癌基因 p16CDKN2Aexon 1在该实验性大鼠舌癌模型中未发生甲基化现象     

人脐带间充质干细胞对肝癌细胞增殖性及凋亡的影响

目的 探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchyma cell, MSC)对肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)癌细胞增殖和凋亡的影响,为HCC的治疗提供新的思路。 方法 取50%覆盖率的MSC培养皿,换上新鲜的DMEM/F-12培养基,待其培养至100%的覆盖率后收集培养基备用,即为MSC条件培养基。用新鲜DMEM/F-12培养基加上等量的MSC条件培养基的混合培养基培养HepG₂人类肝癌细胞株24、48和72h,使用MTT法测定HepG₂细胞的增殖活性、通过Hoechest33342和PI双染色后在荧光倒置显微镜下观察计数以测定HepG₂细胞的凋亡、用Transwell侵袭实验和黏附实验测定HepG₂细胞侵袭能力以及通过Western blot法检测凋亡相关信号通路蛋白的表达。 结果 混合培养基培养HepG₂细胞24h后,对其生长和凋亡及侵袭黏附能力没有显著影响(P>0.05)。但是培养延长到48h和72h后,HepG₂细胞的活性、增殖能力、侵袭能力和黏附能力都受到显著的抑制,这些变化伴随着细胞分裂相关因子Ki-67、PCNA和组蛋白H3磷酸化水平下调,以及细胞凋亡执行者caspase-3的激活和抗凋亡蛋白Bcl-2的抑制。 结论 体外间接共培养实验表明,人脐带间充质干细胞具有抑制肝脏肿瘤细胞增殖及促进其凋亡的作用。     

口腔癌前损害和鳞癌组织hMSH2转录水平改变与意义

目的 检测口腔癌前损害和鳞癌组织中hMSH2基因转录水平,探讨hMSH2在口腔鳞癌发生发展过程中的作用。方法 RT-PCR法选择性扩增11例口腔鳞癌及其癌前损害、正常组织hM-SH2 mRNA片段(316bp),以GAPDH(580bp)为内参对照,半定量测定hMSH2基因的mRNA转录水平。结果 口腔鳞癌的hMSH2转录水平较正常组织和癌旁组织显著升高(P<0.05),正常组织与癌旁组织的hMSH2基因转录水平差异无显著性(P>0.05)。结论 在口腔鳞癌的发生发展过程中,hMSH2基因的转录存在表观遗传学调节。     

口腔鳞癌组织hMSH2外显子突变筛选的初步研究

目的:探讨错配修复基因hMSH2在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法:应用PCR-SSCP法检测30例口腔粘膜鳞状细胞癌组织标本中hMSH2外显子5、6、7、8、9、12的突变情况。结果:在30例口腔鳞癌中,hMSH2六个外显子 PCR均扩增到目的DNA片段;SSCP检测未检出hMSH2六个外显子发生突变。结论:口腔鳞癌hMSH2外显子结构改变模式与遗传性肿瘤不同;错配修复基因在口腔鳞癌发生发展中的作用值得探讨。