2010--2012年东莞市手足口病病原学监测结果分析

目的分析东莞市2010--2012年手足口病病原学特征和流行病学特征,为适时调整手足口病的防治方案提供参考资料。方法收集2010--2012年东莞市手足口病病原学监测标本、重症病例和聚集性疫情作为研究对象,用RealtimeRT—PCR法对患者标本进行肠道病毒通用型、肠道病毒7l型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）的特异性核酸检测。结果共检测手足口病病例各类标本2282份,肠道病毒通用型核酸阳性2026份,检出率88．78％（2026／2282）,其中,EV71、CoxA16、EV71和CoxA16混合感染、未分型类（即其他肠道病毒）的阳性病例分别占肠道病毒感染阳性的46．25％（937／2026）、18．36％（372／2026）、0．10％（2／2026）和35．29％（715／2026）。2010年东莞市HFMD病原以EV71为主,构成比为60．63％（516／851）,而2011和2012年HFMD病原主体是其他肠道病毒,其构成比为39．29％（211／537）和44．67％（285／638）。东莞市HFMD全年均有发病,高峰期主要为每年的4-6月（41．24％,941／2282）;男性发病例数（1483例）多于女性（799例）;病例以5岁以下儿童为主（92．73％,2116／2282）。分析2026例肠道病毒阳性病例,其中轻、重症病例分别占所有病例的70．53％（1429／2026）、28．97％（587／2026）,死亡病例10例。重症病例以EV71为主．其构成比为81．43％（478／587）,死亡病例均为EV71核酸阳性。结论2010年东莞市手足口病病原体以EV71为主,2011年和2012年其他肠道病毒已经成为东莞市手足口病最主要的病原体。EV71仍然是引起手足口重症和死亡病例的优势流行型别。     

东莞市2011年手足口病肠道病毒型别分析

目的了解引起东莞市2011年手足口病疫情的肠道病毒型别。方法采用荧光RT-PCR方法对标本中总肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CVA16)进行特异性核酸检测。对非EV71非CVA16的其它肠道病毒采用VP4基因测序进行型别鉴定。结果 2011年共检测608份手足口病病例标本,537份为阳性,其中198份为EV71阳性(占36.87%),128份为CVA16阳性(占23.84%),211份为非EV71、非CVA16的其它肠道病毒阳性(占39.29%)。对其它肠道病毒进行VP4基因测序分型,共获得50个可用序列,通过BLAST在线比对确定型别,1例CVA1,43例CVA6,4例CVA10,1例CVA12,1例CVB1。结论 2011年引起手足口病的非EV71非CVA16肠道病毒构成比已超过EV71和CVA16,成为东莞引起手足口病主要病原体之一,其中CVA6构成比较大,值得进一步研究。     

东莞市集中式餐具消毒效果分析

目的了解东莞市餐具消毒企业餐具消毒效果情况,完善监管措施。方法对全市53家餐具消毒企业包装好的消毒餐具进行现场随机采样,进行大肠菌群与烷基(苯)磺酸钠检测。结果 53家餐具消毒企业中,抽检结果均合格的占79.52%;530份大肠菌群检测样品合格率为96.42%,各种餐具消毒效果没有显著差异(x2=8.632,P>0.05);53份烷基(苯)磺酸钠检测样品合格率为100.0%。结论东莞市集中式餐具消毒企业餐具消毒效果总体情况良好,建议继续加强餐具消毒企业的监管及技术指导力度,进一步提高消毒餐具达标率,保障消费者健康。     

2010年东莞市手足口病病原监测分析

目的了解东莞市手足口病病原谱构成及其流行特征。方法采用实时荧光PCR检测2010年手足口哨点监测医院上送的标本,应用Excel和SPSS分析。结果380例病原阳性病例中,EV71（占29.47%）所占构成比略高于CoxA16（占24.47%）,未分型肠道病毒占46.05%。病原感染构成比无性别差异,以5岁以下人群感染为主（占96.72%）。EV71与CoxA16在0~1岁人群感染构成比最低（各为14.43%与11.34%）,在1～5岁人群感染构成比较稳定（占36.13%）,6岁后以EV71感染为主（占40.0%）;3～7月以EV71与CoxA16流行为主,其中6～7月以EV71为主（约占47.91%）;8月后以未分型感染为主,其中10～12月感染构成比最高（占87.50%）;各监测点EV71与CoxA16呈交替流行,未分型肠道病毒占较大比例。病例样品检出率较高（达89.41%,380/425）,以粪便为主（占87.29%）,其检出率明显高于肛拭子（73.08%）。结论东莞市手足口病病原谱构成与流行在人群年龄、时间、地域方面均呈动态变化,以CoxA16伴随EV71流行为主,其它未分型肠道病毒也占相当比重。     

2010-2011年广东省东莞市甲型H1N1流行性感冒病毒血凝素基因变异特征研究

目的 了解2010-2011年广东省东莞市甲型H1N1流行性感冒(流感)病毒血凝素(HA)基因的特征及变化。 方法 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、基因扩增、测序得到标本HA基因的核酸序列,利用生物信息软件对序列的特征及变化情况进行分析。 结果 通过测序得到各标本HA基因1701 bp长度的核苷酸序列,566个氨基酸。2年间有24个氨基酸位点发生变异,但其中有12个位点的改变只出现在单个毒株上。发生明显变化趋势的位点只有145、202、391、468,其中202位点属于Sb抗原决定簇区。受体结合位点、潜在糖基化位点及二硫键比较稳定,2年间没有发生变化。 结论 主要功能区域比较保守,无变化。序列中发生明显变化趋势的位点只有4个,其中1个位于抗原决定簇区,属于流感病毒抗原漂移过程中突变的累积。     

东莞市2010年麻疹疫苗强化免疫接种率调查

目的 全面评估东莞市麻疹强化免疫接种工作的开展情况,为下阶段消除麻疹提供依据.方法 采用PPS法在全市抽取35个行政村,再用系统抽样法在每村各抽取12户进行入户查证调查.结果 426名被调查儿童中,应种对象376名,接种率98.1％,其中本地儿童接种率97.7％,外地儿童98.5％;强化免疫后,2周岁以上儿童合格接种率...     

东莞市病毒性腹泻病原学分析

目的了解东莞市病毒性腹泻的病原学分布情况。方法收集2010年7月至2012年9月东莞市东华医院感染性腹泻患者的粪便样品,采用ELISA方法检测轮状病毒,采用Realtime RT-PCR方法检测诺如病毒,采用RT-PCR方法检测星状病毒,采用Realtime PCR方法检测腺病毒。结果检测粪便样品共224份,诺如病毒、轮状病毒、腺病毒、星状病毒检测阳性率分别为17.9%、11.6%、4.5%,0.4%,总检测阳性率为31.3%。对其中22份轮状病毒阳性样品进行血清分型,结果G血清型中,G1型10株,G2型1株,G3型8株,G9型3株。P血清型中,P6型1株,P8型12株,9株未能分型。40株诺如病毒全部为GⅡ型。1株星状病毒经测序分析为1型。结论东莞市腹泻病毒主要感染3岁以下的婴幼儿,诺如病毒和轮状病毒为主要病原体,轮状病毒的分布呈多样性,以G1型为主。     

PARP-1在米托蒽醌诱导的MCF-7耐药细胞中的表达及作用分析

目的：研究抗癌药物米托蒽醌诱导乳腺癌细胞系MCF-7耐药过程中,聚ADP-核糖聚合-1（poly ADP-ribosepolymerase-1,PARP-1）的表达变化,探讨MCF-7耐药细胞株中多药耐药的形成机制。方法：分别设米托蒽醌6个不同浓度实验组（0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16μmol/L）,先以0.005μmol/L的米托蒽醌持续作用MCF-7细胞30d后,改用下一个剂量0.01μmol/L继续作用30d,依次按由低到高的浓度顺序进行,诱导产生耐药细胞。并设未用米托蒽醌处理的MCF-7为对照组。采用实时荧光定量RT-PCR和蛋白免疫印迹杂交分别检测米托蒽醌各浓度组细胞中PARP-1mRNA和蛋白的表达水平。结果：与对照组相比,随着米托蒽醌浓度的增加,PARP-1表达水平呈增高趋势,并且有剂量-反应效应,其中0.02、0.04和0.08μmol/L等3个浓度组的表达量显著高于对照组（P〈0.05）。结论：米托蒽醌持续染毒可诱导MCF-7细胞中PARP-1的表达,其表达参与了肿瘤多药耐药的形成。     

肾细胞癌RASSF1A基因启动子区甲基化状况与表达水平研究

目的检测19例肾细胞癌患者癌组织及癌旁组织Ras相关区域家族蛋白1A（RASSFlA）基因启动子区甲基化情况并检测其mRNA表达水平，探索两者之间的联系。方法收集肾细胞癌患者癌组织及相应癌旁组织19份，分别提取其基因组DNA，以甲基化特异性PCR（Methylation special PCR，MSP）法检测RASSFlA基因启动子区甲基化情况。并以QPCR法检测了RASSFlA基因的mRNA表达水平。结果19例中有lO例肾细胞癌患者癌组织存在高甲基化，mRNA表达水平表达降低，二者之间存在显著负相关性（r=-0．8734，P〈0．01）。结论肾细胞癌中RASSFlA基因启动子区存在高甲基化，并抑制该基因的表达。     

乳腺癌耐受蛋白的表达与5-氟尿嘧啶耐受的相关性研究

目的 筛选乳腺癌耐受蛋白(BCRP)介导的耐受药物,探讨BCRP的表达与耐受药物的相关性.方法 采用已成功建立的BCRP表达细胞模型,经细胞存活实验(MTr法)筛选出BCRP介导的耐受药物,并利用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内残留耐受药物的相对含量;运用荧光定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法(IHC)检测140例临床乳腺癌组织标本中BCRP的表达,同时利用MrIT法研究临床组织标本对耐受药物的化学敏感性;采用单项方差统计学检验方法分析临床乳腺癌组织中BCRP的表达与药物耐受的相关性.结果 MTT实验结果显示,细胞对5.氟尿嘧啶(5-Fu)的耐药指数随着BCRP表达的升高而增加,达到10.58倍(P＜0.05,n=3).HPLC实验证实BCRP的表达与细胞内残留的5-Fu呈显著的负相关性(r=-0.897,P＜0.05).140例临床乳腺癌组织标本中,BCRP阳性表达率为33%(47/140).BCRP阳性表达的乳腺癌组织对5-Fu的耐药指数是正常癌旁组织的7-12倍,BCRP的表达与5-Fu的耐受具有正相关性(R2=0.8124,P＜0.01).结论 BCRP的表达与5-Fu的药物耐受具有显著的相关性,研究结果有助于BCRP阳性;表达的乳腺癌病人化疗方案的制订和优化.