蚊乙酰胆碱酯酶基因突变与抗药性

媒介昆虫的抗药性主要有两种分子机制即基因突变和基因扩增。其中基因突变与抗药性有着密切的关系。蚊对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性的产生可能是由于突触部位的乙酰胆碱酯酶对杀虫剂不敏感造成的。这种不敏感性的产生是编码乙酰胆碱酯酶的基因Ace发生突变,从而导致氨基酸替代,这种变化也改变了酶对底物以及杀虫剂的催化活性。     

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及序列分析

目的 从白纹伊蚊基因组DNA中获得乙酰胆碱酯酶（AchE)基因片段及其DNA序列。方法 根据已知的果蝇和斯氏按蚊AchE氨基酸序列保守区域设计一对简并引物，利用简并引物对白纹伊蚊AchE基因片段进行扩增。PCR产物经T／A克隆，α互补筛选法筛选，碱裂解法提取出重组质粒DNA,并对之进行酶切鉴定和PCR鉴定。对重组质粒的阳性克隆进行DNA是序，利用互联网和PCGENE软件与部分已知物的AchE氨基酸序列进行同源性分析并构建进化系统树。结果 从白纹伊蚊基因组DNA中扩增出AchE基因片段，其核酸序列共394bp，根据内含子特性确定内含子位置后，所得基因的氨基酸序列共107个氨基酸残基，并含有AchE的特征性保守序列FGESAG。同源性分析表明，其与埃及伊蚊相应片段的同源性最高（96％），其次为斯氏按蚊（87％），与黑腹果蝇则较低（69％）。结论 从白纹伊蚊敏感株中获得了AchE基因片段，DNA序列及其特征。该片段与埃及伊蚊相应片段同源性最高。     

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段序列分析

媒介昆虫抗性已成为当前虫媒病防制中的突出问题[1 - 3] ,作者曾报道白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶 (ＡＣｈＥ)基因片段的克隆及鉴定[4 ] ,本实验选择白纹伊蚊基因组ＤＮＡＡＣｈＥ基因片段克隆进行ＤＮＡ测序 ,并分析其序列特征 ,为进一步研究其ＡＣｈＥ与抗药性的关系提供依据。1　材料与方法1 .1　实验蚊株　白纹伊蚊敏感株由中山医科大学寄生虫学教研室惠赠。1 .2　实验菌株　ＪＭ 1 0 9由中山医科大学寄生虫学教研室惠赠。1 .3　质粒载体　ＰＭＤ 1 8 Ｔｖｅｃｔｏｒ试剂盒为大连宝生物公司产品。1 .4　主要试剂　ＣＴＡＢ为Ｓｅｒｖａ公司产品…     

血清中神经特异性烯醇化酶对肺癌患者的临床意义

目的 研究神经特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase,NSE）在肺癌临床病理分类中的诊断作用及其临床意义。方法 510例肺癌患者血清NSE的检测采用全自动电化学发光免疫分析法。检测数据均值比较采用单因素方差分析,率的比较采用卡方检验。结果 510例肺癌患者中共有150例患者血清NSE检测阳性,其中非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）有126例,占全部NSCLC患者的26.27%（126/462）;小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）患者24例,占全部SCLC患者的80.0%（24/30）。SCLC患者的血清NSE检测阳性的比例（80%）与NSCLC患者相比显著增高（卡方检验,x2=10.64,P<0.01）。此外,NSCLC患者血清NSE均值为13.99±0.52 ng/mL;SCLC患者血清NSE均值为45.50±19.61 ng/mL。SCLC患者血清NSE水平显著高于NSCLC患者（单因素方差分析,P<0.01）。结论 NSE的阳性率和血清中的水平与患者的年龄、性别等均无关系,而与肿瘤的病理类型密切有关,即与肺癌是SCLC还是NSCLC有关。NSE 对SCLC患者是一种较好的肿瘤特异性标志物,可以用于肺癌的诊断并指导治疗。     

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及序列分析

目的　从白纹伊蚊基因组 DNA中获得乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)基因片段及其 DNA序列。　方法　根据已知的果蝇和斯氏按蚊 Ach E氨基酸序列保守区域设计一对简并引物 ,利用简并引物对白纹伊蚊 Ach E基因片段进行扩增。PCR产物经 T/ A克隆 ,α互补筛选法筛选 ,碱裂解法提取出重组质粒 DNA,并对之进行酶切鉴定和 PCR鉴定。对重组质粒的阳性克隆进行 DNA测序 ,利用互联网和 PCGENE软件与部分已知物种的 Ach E氨基酸序列进行同源性分析并构建进化系统树。　结果　从白纹伊蚊基因组 DNA中扩增出 Ach E基因片段 ,其核酸序列共 394bp,根据内含子特性确定内含子位置后 ,所得基因的氨基酸序列共 10 7个氨基酸残基 ,并含有 Ach E的特征性保守序列 FGESAG。同源性分析表明 ,其与埃及伊蚊相应片段的同源性最高 ( 96 % ) ,其次为斯氏按蚊 ( 87% ) ,与黑腹果蝇则较低 ( 6 9% )。　结论　从白纹伊蚊敏感株中获得了 Ach E基因片段、DNA序列及其特征。该片段与埃及伊蚊相应片段同源性最高。     

白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及鉴定

目的　从白纹伊蚊中分离、克隆及鉴定乙酰胆碱酯酶 (ACh E)基因片段。　方法　根据已知的果蝇和斯氏按蚊 ACh E氨基酸序列保守区域设计简并引物 ,对白纹伊蚊 ACh E基因片段进行扩增 ,将凝胶回收的 PCR产物经与 T-载体质粒连接进行 T/ A克隆 ,用α互补筛选法筛选重组质粒克隆 ,用碱裂解法提取重组质粒 DNA并对重组质粒进行酶切鉴定和 PCR鉴定。　结果与结论　获得与设计相符的白纹伊蚊 ACh E基因片段 PCR扩增产物并对其作出鉴定     

非小细胞肺癌EGFR罕见突变及其靶向与免疫治疗策略

表皮生长因子受体(EGFR)基因的激活突变包括经典突变和罕见突变。罕见突变病人数量少,不同突变类型对不同的EGFR酪氨酸激酶抑制剂的敏感性差异较大。本文将对各种罕见突变进行系统回顾,总结针对罕见突变的临床前研究和临床研究,为临床治疗决策提供依据。     

鼻咽癌患者外周血细胞计数的昼夜节律

目的了解健康志愿者和鼻咽癌患者外周血细胞计数的生物节律,为择时采血与择时输血提供理论依据。方法参加实验的14位健康志愿者和13位鼻咽癌患者在连续24h内,每隔4h采集4ml外周静脉血1次,共采血6次;采用放射免疫法检测可的松水平,采用全自动血细胞分析仪检测外周血细胞计数;采用重复测量的方差分析法以及余弦分析法对各种外周血细胞计数及血浆可的松水平作统计分析。结果大部分的血细胞参数都显示出明显的昼夜节律的特性,在24h内。各种血细胞计数波动较大。结论正常人及中晚期鼻咽癌患者的外周血细胞数量均可以保持稳定的昼夜节律,外周血细胞数在24h内存在的明显波动为择时采血与择时输血提供了可能。     

蚊乙酰胆碱酯酶基因突变与抗药性

媒介昆虫的抗药性主要有两种分子机制即基因突变和基因扩增，其中基因突变与抗药性有着密切的关系。蚊对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性的产生可能是由于突触部位的乙酰胆碱酯酶对杀虫剂不敏感造成的，这种不敏感性的产生是编码乙酰胆碱酯酶的基因Ａｃｅ发生突变，从而导致氨基酸替代，这种变化也改变了酶对底物以及杀虫剂的催化活性。     

生物节律周期探测方法的研究进展

探测生物节律的周期是当今时间生物学研究的热点问题之一,它的研究将有助于了解某些病变机理和时钟基因对生物体的作用,指导临床适时用药和治疗等.介绍了Lomb-Scargle周期图、基于余弦法的谱分析方法(百分节律谱方法、倒椭圆谱方法等)、最大熵谱分析方法等几种探测生物节律周期的新方法,对各种方法的优缺点进行了探讨,并对将来的研究提出了一些建议.这些方法为准确探测生物节律的周期、揭示生物节律的变化规律提供了新的思路.