人端粒酶逆转录酶抗原HLA-A0201限制性CTL表位预测及鉴定

目的应用生物信息学方法对人端粒酶逆转录酶(h TERT)HLA-A2+限制性细胞毒性T细胞(CTL)表位进行预测和鉴定,寻找诱导机体特异性杀伤肺癌肿瘤细胞的抗原表位。方法应用生物信息学软件BIMAS、SYFPEITHI对h TERT蛋白进行HLA-A0201限制性CTL抗原表位预测,筛选优势表位;应用肽亲和力实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放实验及人干扰素γ(IFN-γ)ELISPOT实验验证表位,筛选出激发机体产生特异性免疫反应的表位。结果生物信息学软件筛选出优势表位为:ILAKFLHWL、ELLRSFFYV及ILSTLLCSL;肽亲和力实验得到优势表位荧光系数(FI)为:ILAKFLHWL0.67、ELLRSFFYV0.66及ILSTLLCSL0.90;LDH释放实验显示ILAKFLHWL所诱导CTLs的杀伤率明显高于其它各表位,也明显高于阴性表位,差异均具有统计学意义(P0.05);人IFN-γELISPOT实验证明ILAKFLHWL所诱导的CTLs产生的IFN-γ斑点数多于其他表位,差异具有统计学意义(P0.05)。结论ILAKFLHWL的免疫原性强,可用于后续制备肺癌多肽疫苗。     

DHA对小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的机制研究

目的 探讨二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）对LPS诱导小鼠急性肺损伤的治疗作用及可能的机制.方法 体重20-25 g的BALB/c小鼠18只随机分为3组：①对照组,气管内滴注PBS;②LPS模型组,气管内滴注LPS （100μg/50 μl）,作用6h;③DHA组,连续给予DHA（500 mg/kg）灌胃连续预处理7d,再气管内滴注LPS（100 μg/50μl）作用6h.观察各组小鼠肺组织病理组织学变化,肺泡灌洗液（BALF）中白细胞总数及髓过氧化物酶活性变化,以及BALF中促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及抗炎性细胞因子IL-10含量变化. 结果 与对照组比较,LPS模型组小鼠的组织病理学显示明显的肺泡壁结构破坏,炎性细胞浸润增多及肺组织出血加重,BALF中的白细胞总数及肺组织内髓过氧化物酶活性明显增高,BALF中促炎性细胞因子IL-1β、IL-6显著升高（P＜0.01）,保护性细胞因子IL-10较对照组有所升高,但差异没有统计学意义（P＞0.05）.与LPS模型组比较,DHA预处理组小鼠的肺泡壁结构破坏受到抑制,炎性细胞浸润及组织出血减少,BALF中IL-1β、IL-6浓度显著下降（P＜0.01）,同时BALF中抗炎因子IL-10显著升高（P＜0.01）. 结论 DHA通过重建抗炎反应和炎症反应的平衡对急性肺损伤发挥保护作用.     

法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建和初步鉴定

目的构建法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库并初步鉴定。方法利用Trizol法抽提法国梧桐花粉总RNA,经过Oligo(d T)纤维素柱纯化后分离mRNA,反转录合成ds c DNA,连接EcoRⅠ接头,末端磷酸化,XhoⅠ消化,电泳分离并凝胶回收大于500 bp以上的c DNA片段,与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建c DNA文库,检测文库容量和重组率,并采用PCR方法对插入的c DNA片段大小进行分析。结果成功构建了一个文库容量为3.5×106pfu/ml,重组率为94%,平均插入片段长度约为0.7 kb的法国梧桐花粉变应原c DNA表达文库。结论所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的 c DNA,为进一步研究法国梧桐花粉主要变应原基因并制备重组标准化法国梧桐花粉主要变应原疫苗奠定基础。     

木黄酮对培养肝星状细胞增殖及脂质过氧化的影响

目的 以培养的大鼠肝星状细胞(HSC)为模型,测定植物雌激素木黄酮对HSC增殖及培养液中脂质过氧化产物的影响.以明确木黄酮抑制肝纤维化形成的作用.方法 采用培养的SD大鼠肝星状细胞(HSC-T6)为模型,培养后加入H2O3诱导氧化应激,分为3组,用不同浓度的木黄酮温育48 h,收集细胞培养基的上清液,每个浓度设6个重复组,用MTT法检测HSC增殖;收集细胞培养基上清液,采用试剂盒方法测定脂质过氧化产物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱苷肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX).结果 木黄酮各剂量组不同程度降低HSC的增殖.呈剂量-效应关系.给予木黄酮后,MDA和GSH水平明显降低,SOD和GSH-PX活力明显升高.也呈剂量-效应关系.结论 植物雌激素木黄酮具有抑制肝纤维化形成的作用,其作用机制可能与抑制HSC的增殖及抗HSC氧化应激、抗脂质过氧化作用有关.     

女性特发性肺间质纤维化并发肺气肿的危险因素分析及相关预测模型构建

目的 探讨女性特发性肺间质纤维化(IPF)并发肺气肿的危险因素,并构建列线图风险预测模型。方法 回顾性选取2017年1月—2020年1月我院收治的132例女性IPF并发肺气肿患者纳为观察组,另选取同期我院收治的186例女性单纯IPF患者纳为对照组。收集两组患者的临床资料、肺功能指标、动脉血氧分压、胸部高分辨CT(HRCT)表现类型及血清指标。采用单因素及多因素Logistic回归分析筛选出女性IPF并发肺气肿的危险因素;应用(4.1.2)R建立列线图预测模型;采用ROC曲线评估模型区分度;采用Bootstrap法进行内部验证,并以校正曲线及H-L检验评估其有效性。前瞻性选取2020年2月—2022年1月在我院接受治疗的163例女性IPF患者进行外部验证。结果 Logistic回归分析结果显示,吸烟史、反流性食管炎、二手烟暴露、工作中接触粉尘是女性IPF合并肺气肿的危险因素(P<0.05);基于上述各危险因素成功建立女性IPF并发肺气肿列线图模型;ROC曲线分析结果显示,AUC可达0.811(95%CI:0.764～0.859),灵敏度为0.780,特异度为0.710;采用Boot...     

PEDF下调 HIF-1α表达抑制缺氧状态下NSCLC细胞增殖、迁移的作用机制

目的:研究色素上皮衍生因子（PEDF）对缺氧状态下非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法:体外培养NSCLC细胞A549,氯化钴（CoCl2）100 μmol/L 模拟缺氧环境。实验分为4组:正常对照组（A组）、氯化钴干预组（B组）、氯化钴＋PEDF 50 ng/ml干预组（C 组）及氯化钴＋PEDF 200 ng/ml干预组（D组）。MTT检测各组细胞增殖能力,进行划痕实验,在光镜下观察实验组和对照组细胞的移行情况;进行Transwell小室侵袭实验,计算细胞穿透数;进行ELISA法检测各组细胞培养液上清中HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达水平。结果:细胞增殖能力:B组较A组增加,C组较B组降低,D组较C组降低,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;细胞迁移能力:B组较A组增加,C组较B组降低,D组较C组降低,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;细胞穿透数:B组较A组增多,C组较B组减少,D组较C组减少,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;HIF-1α和VEGF的表达水平:B组较A组升高,C组较B组下降,D组较C组下降,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:肺癌A549细胞在缺氧环境较常氧具有更强的增殖力和移行能力;可以分泌HIF-1α,HIF-1α对VEGF的表达有一定的促进作用。PEDF对缺氧状态下A549细胞高表达的VEGF具有一定抑制作用,且该抑制作用可能与PEDF调控HIF-1α有关。     

CT引导下经胸壁肺活检在肺癌精准治疗中的临床应用

目的探讨CT引导下经胸壁肺活检在肺癌精准治疗中的临床应用。方法回顾性分析2014年12月至2016年6月在西安交通大学第二附属医院呼吸内科所做CT引导下经皮肺穿刺活检术并经手术病理、临床治疗或随访观察证实的73例患者。根据CT扫描图像选择最佳穿刺层面及穿刺点获取标本。结果 73例患者肺部病变全部取样成功,穿刺病理提示恶性肿瘤39例,良性病变34例。经手术病理、临床治疗或随访观察证实为恶性肿瘤42例,良性病变31例,诊断准确率为95.9%,灵敏度为92.9%,特异度为100%。对确诊肺腺癌的23例患者进行了基因突变检测,共检测到11例存在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变,突变率为47.8%;其中以第19外显子缺失(占所有突变的36.4%)及第21外显子点突变(27.3%)发生率较高。穿刺后发生并发症14例,症状均较轻,无致死性不良反应发生。结论 CT引导下经皮肺穿刺活检术是一种创伤小、安全性高、并有较高准确性的检查方法,对肺部病变的诊断及治疗有重要的应用价值。     

厚朴酚通过PD-1/PD-L1通路介导非小细胞肺癌增殖和凋亡的机制研究

目的 探讨厚朴酚对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)增殖和凋亡的影响及其具体机制.方法 收集西安交通大学第二附属医院NSCLC组织标本30例以及对应的癌旁组织,通过real-time RT-PCR和Western blot检测组织中PD-1以及PD-L1的表达水平.将肺癌细...     

CA125、ADA、NLR和PLR在胸腔积液鉴别诊断中的应用价值

目的:探讨糖类抗原125（CA125）、腺苷脱氨酶（ADA）、外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）和血小板与淋巴细胞比值（PLR）在胸腔积液鉴别诊断中的价值。方法:选取我院2015年1月至2016年12月住院确诊恶性胸腔积液（A组）患者58例和结核性渗出性胸膜炎（B组）患者62例,收集两组患者血浆CA125、胸水CA125、胸水ADA及血常规的各项指标。采用SPSS 17.0 统计软件对数据进行统计学分析。结果:A组患者血浆CA125、胸水CA125、白细胞计数、中性粒细胞计数均明显高于B组,A组患者胸水ADA明显低于B组,两组差异均有统计学意义（P＜0.05）。比较A组和B组患者的单核细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数、NLR及PLR,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:胸水ADA和胸水CA125在A组患者和B组患者的鉴别诊断中有重要价值,NLR和PLR对两者鉴别诊断意义不大。     

肠易激综合征患者粪便和直肠黏膜中蛋白酶的活性

肠易激综合征(IBS)是一种常见的功能性胃肠疾病,其发病机制尚不清楚,目前缺乏有效的治疗方法.人体胃肠道中存在的多种蛋白酶除了降解蛋白作用外,还起着信号分子的作用,通过裂解蛋白酶激活受体(PARs)调节许多细胞功能,包括胃肠动力、离子分泌、细胞间通透性、感觉功能和炎症反应.