Fusions of Dendritic Cells and C6 Cells Transfected with TGF-β1 Antisense in Treatment of Intracranial Gliomas

Objective： To investigate the immunotherapy efficacy of fusion cells （dendritic-C6anti-TGF-β1 cells） in the treatment of intraeranial gliomas. Methods： Dendritic cells were isolated from rat bone-marrow precursors stimulated in vitro with granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor （GM-CSF） and Interleukin-4 （IL-4）. C6anti-TGF-β1 cells originally from C6 cell line of a rat glioblastoma were transfected with plasmid of TGF-β1 anti-sense gene. Fusions of dendritic cells and C6anti-TGF-β1 cells were prepared by polyethylene glycol （PEG）. The DC/C6anti-TGF-β1 fusion cells were observed and confirmed by fight microscopy and scanning electron microscopy. Experimental rats were divided into three groups at random： C6 cells （Ⅰ）, dendritic-C6anti-TGF-β1 fusion cells and C6 cells （Ⅱ） and IMDM medium only （Ⅲ）. The cells were injected into right parietal lobe region of the rat with stereotaxic technique. Histology, tumor necrosis and survival time were evaluated. Results： Compared with the rats that received C6 cells （survival median time was less than 20 days, tumor region was seen in all fields of observed）, the rats injected with dendritic-C6anti-TGF-β1 fusion cells and C6 cells got a more prolonged life span （more than 59 days）, as well as less tumor region （5.01%-6.2%）. There was no tumor necrosis, but some glias were seen in surroundings. All rats were survived and no necrosis was observed in negative control group. Statistical analysis showed that group Ⅱ had significant difference compared with group Ⅰ. Conclusions： Dendritic-C6anti-TGF-β1 fusion cells could prolong the life span of rats, providing a strategy to achieve an antitumor response against tumors in the central nervous system.     

静脉应用骨髓基质细胞改善脑梗死后神经功能

目的：探索应用骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗死的可行性和骨髓基质细胞在修复中枢神经损伤方面的作用。方法：从健康人肋骨取原代骨髓基质细胞后扩增。线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型(n=56)，2h后再灌注。24h后治疗组(n=28)尾静脉注射3&;#215;106骨髓基质细胞，对照组(n=28)和正常组(n=16)尾静脉注射1mL生理盐水。采用神经损伤评分(NSS)检测大鼠神经系统功能，EusA检测脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)。流式细胞仪检测细胞凋亡，免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞或骨髓基质细胞来源的细胞。结果：在模型制作后7，14，21，28d，治疗组的NSS较对照组明显低(t=9．9—2．9，P&;lt;0．05)，治疗组的BDNF和NGF较对照组明显高(F=708．9，846．2，P&;lt;0．05)，治疗组的凋亡和坏死细胞占细胞总数的(13．6&;#177;7．8)％，(11．2&;#177;4．5)％，较对照组[(22．3&;#177;7．8)％，(16．8&;#177;5．6)％]明显减少(F=125．9，95．7，P&;lt;0．05)。在缺血侧半球可以发现骨髓基质细胞，并且一部分骨髓基质细胞表达了神经细胞表面标志物。结论：骨髓基质细胞移植后缺血脑组织中生长因子的增加和细胞替代对神经功能的恢复起到了重要作用。     

应用人骨髓基质细胞治疗大鼠缺血性脑梗塞的实验研究

目的　探索应用骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗塞的途径 ,效果 ,机理。方法　从健康人肋骨取原代骨髓基质细胞后扩增。线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型 (n=5 6 ) ,2小时后再灌注。 2 4小时后治疗组 (n =2 8)尾静脉注射 3× 10 6 骨髓基质细胞 ,对照组 (n =2 8)尾静脉注射 1ml生理盐水。分别采用神经损伤评分 (NSS)检测大鼠神经系统功能 ,ELISA检测BDNF、NGF ,流式细胞仪检测细胞凋亡 ,免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞或骨髓基质细胞来源的细胞。结果　在 7,14 ,2 1,2 8天治疗组的NSS较对照组明显低 (P <0 0 5 ) ,治疗组的BDNF和NGF较对照组明显高(P <0 0 5 ) ,治疗组的凋亡细胞较对照组明显减少 (P <0 0 5 )。在缺血侧半球可以发现骨髓基质细胞 ,并且一部分骨髓基质细胞表达了神经细胞表面标志物。结论　静脉移植骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗塞是一种简单有效的方法。骨髓基质细胞移植后缺血脑组织中生长因子的增加对神经功能的恢复起到了重要作用。     

研究药物对肿瘤细胞代谢的新方法──灌注细胞31P核磁共振谱

为连续观察药物对细胞代谢的影响,用含紫杉醇的灌注液对人口腔上皮癌KB细胞和人结肠癌HCT-8细胞在灌注条件下进行了细胞³¹P谱测定,从两种细胞在未给药、给药以及停药后的灌注条件下获得的代谢图谱中发现,紫杉醇使KB细胞和HCT-8细胞的ATP代谢水平均有升高,但KB细胞的ATP升高更为明显;同样剂量的长春新碱使KB细胞代谢中的ATP峰的改变不明显,推测可能与它们的作用机制不同有关。研究结果表明,灌注细胞³¹P谱测试法对观察药物对细胞代谢的作用是独特的。     

胸苷激酶基因治疗人多形性胶质母细胞瘤BT325并诱导BT325和9L肿瘤细胞的凋亡

目的：了解转单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ＴＫ）前后胶质瘤细胞对更昔洛韦（ＧＣＶ）的药物敏感性；钙通道阻滞剂尼莫地平是否增强ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ基因治疗的肿瘤杀伤作用，以及该治疗方法能否诱导胶质瘤细胞凋亡。方法：用带有ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ基因的重组逆转录病毒载体，转染人多形性胶质母细胞瘤株ＢＴ３２５。用ＭＴＴ法测定ＧＣＶ对转染ＨＳＶ－ＴＫ基因ＢＴ３２５瘤细胞的杀伤作用。结果：０．１ｕｇ／ｍｌ的ＧＣＶ对转ＨＳＶ－ＴＫ基因的ＢＴ３２５瘤细胞有杀伤作用，加入尼莫地平后，０．０１ｕｇ／ｍｌ的ＧＣＶ即有杀伤作用。同时发现该治疗方法可以引起胶质瘤细胞的凋亡。结论：ＨＳＶ－ＴＫ／ＧＣＶ基因治疗对胶质瘤有很强的杀伤作用，并可以引起肿瘤细胞的凋亡；尼莫地平有协同作用，这可能使尼莫地平做为一种增敏剂在脑肿瘤该治疗中使用。     

关于加强卫生消毒杀虫产品应急储备建设的思考

近年来,我国地震、山洪、泥石流等自然灾害时有发生,给人民生命财产造成重大损失。实践证明,卫生消杀产品储备是应对突发公共卫生事件、预防发生次生灾害必备的物质基础,专业的消杀队伍储备是把突发性公共卫生事件带来的危害降到最低点的有利保障。进一步完善消杀产品及消杀队伍的应急储备,加强对消杀产品及队伍的管理,提高消杀产品的统一调配和保障能力,确保发生突发公共卫生     

静脉应用骨髓基质细胞改善脑梗死后神经功能

目的:探索应用骨髓基质细胞治疗缺血性脑梗死的可行性和骨髓基质细胞在修复中枢神经损伤方面的作用。方法:从健康人肋骨取原代骨髓基质细胞后扩增。线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型(n=56),2h后再灌注。24h后治疗组(n=28)尾静脉注射3×106骨髓基质细胞,对照组(n=28)和正常组(n=16)尾静脉注射1mL生理盐水。采用神经损伤评分(NSS)检测大鼠神经系统功能,ELISA检测脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF),流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞或骨髓基质细胞来源的细胞。结果:在模型制作后7,14,21,28d,治疗组的NSS较对照组明显低(t=9.9～2.9,P<0.05),治疗组的BDNF和NGF较对照组明显高(F=708.9,846.2,P<0.05),治疗组的凋亡和坏死细胞占细胞总数的(13.6±7.8)%,(11.2±4.5)%,较对照组犤(22.3±7.8)%,(16.8±5.6)%犦明显减少(F=125.9,95.7,P<0.05)。在缺血侧半球可以发现骨髓基质细胞,并且一部分骨髓基质细胞表达了神经细胞表面标志物。结论:骨髓基质细胞移植后缺血脑组织中生长因子的增加和细胞替代对神经功能的恢复起到了重要作用。     

人野生型p53基因增强9L胶质肉瘤细胞的化疗敏感性

恶性胶质瘤化疗面临二大难题,一是肿瘤化疗药不敏感和耐药,二是化疗的有效剂量同中毒剂量常很接近.副作用大,在杀伤瘤细胞的同时也杀伤正常细胞.人们在寻找特异性杀伤肿瘤药物同时,还试图利用基因工程技术改变肿瘤细胞的药物敏感性,近来的研究发现放疗和化疗可以引起肿瘤细胞凋亡,而是否发生凋亡同肿瘤 p~53基因的状态有关.本实验证实野生型p~53基因(Wt-p~53)能增强9L胶质肉瘤细胞化疗敏感性,钙通道阻滞剂尼莫地平有协同作用.钙通道抑制剂的作用机制还不完全清楚,但有一些细胞的凋亡并无Ca~(2 )的活动.目前认为凋亡的DNA lader是由于细胞内Ca~(2 )、Mg~(2 )依赖性核酸内切酶把DNA切成180-200bp不同倍数的核酸片段形成的.该酶需要 Ca~(2 )激活.肿瘤细胞凋亡是否由Ca~(2 )通道引起,取决于细胞是否存在Ca~(2 )依赖性核     

胸苷激酶基因治疗恶性胶质瘤Ⅰ期临床研究

目的用插入单纯疱疹病毒胸苷激酶基因的逆转录病毒包装细胞(pLTKcSN/VPC)和更昔洛韦(Ganciclovir,GCV)治疗恶性胶质瘤,探讨其毒副作用和疗效。方法14例恶性胶质瘤尽可能切除肿瘤,瘤床多点注射pLTKcSN/VPC,注射点每人平均50点,接种量依据瘤床面积而定,每人注射量8～16ml不等,平均13.92ml/人,于术后7～10d开始,静脉点滴GCV,10mg·kg-1·d-1,分2次,12h1次,持续2周。结果本组毒性比较轻,均能耐受。胶质母细胞瘤组平均存活23.9个月,存活时间超过12个月病人占75%,存活时间超过23个月病人占50%,最长存活时间50个月的病人死于其他疾病。恶性胶质瘤组平均存活29.2个月,存活时间超过24个月病人占67%,存活时间超过36个月病人占33%,最长存活时间54个月,病人至今存活,无肿瘤复发迹象。结论pLTKcSN/VPC和GCV治疗恶性胶质瘤毒副作用低,对部分胶质瘤有比较明确的治疗作用。