非小细胞肺癌EGFR—TKI再治疗反应临床观察及机制探讨

目的：观察非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer,NSCLC）患者使用表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermalgrowthfactorreceptor_tyrosinekinaseinhibitor,EGFR-TKI）初始治疗失败后,经过一段时间的间歇期,再次应用EGFR—TKI治疗的临床疗效,并探讨其可能的分子机制。方法：回顾性分析2008—12-01—2012-05—30,我院19例初始用EGFR—TKI治疗失败后停止一段时间并再次应用EGFR-TKI治疗的NSCLC患者的临床资料。采用小剂量递增的方法,体外诱导EGFR-TKI耐药的细胞模型,研究“治疗再反应”现象可能的分子机制。结果：19例NSCLC患者中47．4％（9／19）再次应用EGFR-TKI仍可获得疾病控制,其中PR为15．8％（3／19）,SD为31．6％（6／19）。同时,体外诱导的耐药细胞株经顺铂治疗2个月后,再次给予厄洛替尼（Erlotinib）治疗,抑制率由3％升高至15％,P〈0．05,再次显示了部分的有效性。蛋白质印迹法检测自噬相关分子LC3B发现,耐药细胞株LC3B表达增加,再次Erlotinib治疗后LC3B表达水平相对未处理细胞明显下调。结论：EGFR-TKI治疗失败的NSCLC患者经过一段时间的间歇期再次应用EGFR—TKI,部分患者仍可获得较满意的疾病控制,该效应可能与细胞自噬有密切关系,这种再治疗反应有望成为NSCLC的一种有效治疗策略。     

miR-451 抑制肝癌HepG2 细胞增殖及其在肝癌诊断和预后中的作用

[摘要] 目的：寻找用于肝癌诊断的miRNA分子靶标,探讨其在肝癌细胞增殖及细胞周期中的作用及其机制。方法：通过对TCGA数据库中377 例肝癌样本和37 例癌旁样本的miRNAs 表达数据资料进行统计分析,得到一组包含33 个差异表达的miRNA。对差异表达的miRNA采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）和Kaplan-Meier 生存分析进行进一步的筛选,同时结合现有文献最终选择miR-451 作为研究目标。向人肝癌细胞株HepG2 转染pLVX-shRNA2-miR-451,使之过表达miR-451,通过CCK-8 细胞增殖实验检测其对HepG2 细胞增殖能力的影响,用流式细胞术观察对HepG2 细胞细胞周期的影响。结果：miR-451 在肝癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织[ （473.40±390.24) vs (1 990.47±2 118.04),P<0.05],且可以作为肝癌诊断的标志物,ROC值为0.91（敏感度0.89,特异性0.87）。体外实验结果表明,过表达miR-451 后肝癌HepG2 细胞增殖能力明显降低[48 h：(0.69±0.04) vs(1.08±0.05);72 h：(0.76±0.07) vs (1.52±0.02);均P<0.01],大量细胞被阻滞于S 期（P<0.05）。结论：miR-451 不但可以作为诊断肝癌和指示预后的生物标志物,还具有抑制肝癌细胞增殖的作用。