Lewis肺癌在小鼠体内传代过程中生长转移能力的演变与炎症的关系

目的：观察Lewis肺癌细胞株（LLC）在C57/BL6小鼠体内连续传代过程中其生长转移能力及瘤组织中炎性因素的变化,探讨肿瘤生长转移能力的演变与炎症的关系.方法：将LLC细胞接种于C57/BL6小鼠腋下,建立第1代荷瘤鼠模型,荷瘤鼠连续传代,于第2,8,15代各传15只小鼠分为早期、中期、晚期组,观察3组小鼠的岀瘤速度及肺转移情况.免疫组化法检测3组瘤组织中巨噬细胞密度、微血管密度（MVD）、核转录因子-κB（NF-κB）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达情况.结果：随着荷瘤鼠传代次数的增加肿瘤的生长转移能力逐渐增强,早期、中期、晚期3组小鼠的岀瘤速度明显加快;肺转移率明显增加,分别为13%,60%,100%（P〈0.01）.早期、中期、晚期3组小鼠瘤组织中浸润的巨噬细胞分别为（24.87±8.54）,（36.33±10.02）,（47.20±13.49）个/HP;微血管密度分别为（24.73±10.38）,（41.27±13.50）,（55.80±21.31）个/HP;NF-κB,MMP-9的表达明显增强,差异具有统计学意义（P〈0.05）.肿瘤组织中MVD,NF-κB,MMP-9的表达均与巨噬细胞的增多呈正相关,差异具有统计学意义（P〈0.01）.结论：Lewis肺癌在小鼠体内连续传代过程中生长转移能力逐渐增强,这种演变与肿瘤组织中炎症浸润的增强有重要的关系.     

艾迪注射液联合博来霉素治疗恶性胸腔积液的临床效果观察

目的 探讨艾迪注射液联合博来霉素治疗恶性胸腔积液的临床效果.方法 选取2010年1月至2015年12月于本院进行诊治的132例恶性胸腔积液患者,将其随机分为对照组和观察组.对照组患者给予传统恶性胸腔积液治疗方法,观察组患者则采用艾迪注射液联合博来霉素治疗方法.观察比较两组患者的临床治疗疗效、生活质量改善情况及治疗过程中不良反应发生情况.结果 ①观察组患者治疗有效率高达77.6％,显著高于对照组的55.4％,差异有统计学意义(P＜0.05).②治疗后,观察组患者的KPS评分显著高于对照组[(80.0±6.5)vs.(72.5±5.8)];经过一段时间的治疗,观察组生活质量改善率为74.6％显著高于对照组的49.2％,下降率为4.5％显著低于对照组的15.4％;差异均有统计学意义(P＜0.05).③与对照组相比,观察组治疗过程中不良反应发生率显著较低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 艾迪注射液联合博来霉素在治疗恶性胸腔积液患者中不仅临床效果显著、安全性好,而且也可明显改善患者的生活质量,值得进一步在临床中推广应用.     

血管生成在Lewis肺癌生长转移过程中的作用

目的建立能够模拟肿瘤生长、侵袭转移动态全过程的动物模型,利用该模型探讨血管生成与肿瘤生长、转移的关系。方法Lewis肺癌(LLC)在C57BL/6小鼠体内连续传代,观察第2代（早期组）、第8代（中期组）和第15代（晚期组）荷瘤小鼠肿瘤生长和肺转移的情况,采用免疫组织化学法检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α）和微血管密度（MVD）的表达。结果(1)早、中、晚期三组小鼠肿瘤随传代次数的增加生长速度加快、侵袭力增强,肺转移率升高。(2) VEGF、 HIF-1α和MVD在早、中、晚期三组小鼠瘤组织中的阳性表达均呈升高趋势,差别有统计学意义（P<0.05）,且HIF-1α与VEGF、VEGF与MVD的表达均呈正相关。结论Lewis肺癌在小鼠体内连续传代过程中生长速度加快,转移潜能增强,而血管生成在这个动态过程中发挥了重要作用,使肿瘤得以持续生长和扩散转移。     

骨桥蛋白在Lewis肺癌生长转移过程中的表达

目的建立能够模拟肿瘤生长、侵袭转移动态全过程的动物模型,利用该模型探讨骨桥蛋白在肿瘤生长转移过程中的作用。方法Lewis肺癌（LLC）在C57BL/6小鼠体内连续传代,观察第2代（早期组）、第8代（中期组）和第15代（晚期组）荷瘤小鼠肿瘤生长和肺转移的情况,采用免疫组化法检测各组荷瘤鼠肿瘤组织中骨桥蛋白（OPN）和微血管密度（MVD）的表达。结果①随传代次数的增加肿瘤生长速度加快、侵袭力增强,肺转移率升高。②OPN和MVD在早、中、晚三组小鼠瘤组织中的表达均呈升高趋势（P〈0．05）,且二者的表达呈正相关。结论OPN可能通过促进肿瘤血管生成的途径加速肿瘤的生长转移。     

干扰素诱导跨膜蛋白3 在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞凋亡的调控作用研究

目的 探讨干扰素诱导跨膜蛋白3（IFITM 3）在结肠癌组织中的表达及对结肠癌细胞凋亡的调控作用。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测结肠癌组织和对应的癌旁组织中IFITM 3 的表达水平。细胞转染si-IFITM 3 抑制IFITM 3 的表达,同时转染si-control 作为对照,MTT 检测转染后48 h的细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot 检测细胞中Bcl-2、Bax、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果 IFITM 3 在结肠癌组织中的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义（P <0.05）。si-IFITM 3 组结肠癌细胞HT29 和HCT116 的存活率与si-control 组相比下降,差异有统计学意义（均P <0.05）。转染si-IFITM 3 后的结肠癌细胞HT29 和HCT116 凋亡率高于si-control 组,差异有统计学意义（均P <0.05）。转染si-IFITM 3 后的结肠癌细胞HT29 和HCT116 中STAT3 蛋白表达水平没有变化,p-STAT3、Bcl-2 蛋白表达水平低于si-control 组,Bax 蛋白表达水平高于si-control 组。结论 干扰素诱导跨膜蛋白3在结肠癌组织中过度表达。抑制干扰素诱导跨膜蛋白3 的表达,可以抑制结肠癌细胞的增殖,促进癌细胞凋亡,其作用机制与Bcl-2、Bax、STAT3 有关。     

奥沙利铂与紫杉醇分别联合5-Fu在胃癌根治术后的应用效果比较

目的比较奥沙利铂(L-OHP)及紫杉醇(PTX)分别联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗方案在胃癌根治术后的应用效果及安全性。方法选取2010-06~2013-05该院收治的66例胃癌根治术后患者作为研究对象,按入院顺序编号半随机分为A、B两组各33例。A组采用奥沙利铂联合5-Fu术后辅助化疗方案,B组采用紫杉醇联合5-Fu方案,均随访2年,统计肿瘤复发率、转移率、患者无瘤生存率、总生存率及毒副反应发生率。结果 A组、B组术后1年、2年肿瘤复发、转移率比较差异无统计学意义(P0.05)。A、B组术后1年、2年无瘤生存率、总体生存率比较差异均无统计学意义(P0.05)。A组Ⅲ~Ⅳ度中性粒细胞减少,恶心、呕吐,周围神经毒性、发热、肝功能异常发生率略高于B组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论奥沙利铂与紫杉醇分别联合5-Fu在胃癌根治术后辅助化疗中均有确切疗效,患者均可耐受,安全性较高。     

AMD3100 对 Lewis 肺癌进展及荷瘤鼠脾脏髓源抑制性细胞积聚的影响

目的 观察趋化因子受体CXCR4拮抗剂AMD3100对Lewis肺癌进展及荷瘤鼠脾脏髓源抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells ,MDSCs)积聚的影响. 方法 60只荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠分为2组:PBS组(腹腔只注射PBS液,0.2 ml/只)、AMD3100组[腹腔注射溶解有2 mg/(kg*d) AMD3100的PBS液,0.2 ml/只,1次/d,共26 d],每组30只.隔日测2组小鼠体质量,记录成瘤时间.26 d随机处死2组荷瘤鼠各15只,剥离瘤体称量,观察肺转移灶数目,用免疫组化法计数瘤组织微血管密度(microvessel density,MVD),流式细胞仪测小鼠脾脏MDSCs比例;统计2组剩余小鼠自然生存天数. 结果 PBS组、AMD3100组小鼠Lewis肺癌成瘤时间分别为(8.03±1.47)、(9.97±1.50) d,接种瘤细胞后26 d瘤质量分别为(3.54±0.93)、(2.09±0.66)g,MVD值分别为(41.40±6.44)、(32.47± 5.33)个/HP,肺癌肺转移灶数目分别为(18.27±9.78)、(7.40± 5.83)个/只,MDSCs比例分别为(19.57±3.59)%、(31.42±5.04)%,中位生存时间分别是第29、34天,2组各项指标比较差异均有统计学意义(P＜0.01). 结论 AMD3100可延缓Lewis肺癌进展,但可能对荷Lewis 肺癌小鼠免疫产生一定的抑制作用.     

血清miRNA-15b和miRNA-34a的检测对ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗疗效的评估

目的 探讨血清miRNA-15b和miRNA-34a的检测对ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗疗效的评估价值.方法 收集2010年1月1日至2016年1月1日于本院化疗的201例ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者化疗前和化疗后血清,另收集20例健康人血清做对照.设计miRNA-15b和miRNA-34a上下游引物,提取血清中总RNA,采用RT-PCR方法检测血清中miRNA-15b和miRNA34a含量水平,记录每份样品检测CT值,分析其与每例患者的治疗疗效相关性.结果 ①经过2个疗程的化疗后,201例非小细胞癌患者中69例为PR,94例为SD,38例为PD.②健康对照组的血清中miRNA-15b和miRNA-34a的CT值分别为(35.50±2.51)、(36.00±2.00)观察组化疗前、后血清中miRNA-15b CT值分别为(28.43±4.81)、(31.85±7.00);观察组化疗前、后血清中miRNA-34a的CT值分别为(30.43±5.12)、(32.00±6.28);与健康对照组相比,观察组化疗前、后血清中miRNA-15b和miRNA-34a含量均处于高水平;差异均具有统计学意义(均P＜ 0.05).③与化疗前相比,PR组和PD组两组患者血清中miRNA-15b和miRNA-34a CT值有显著变化,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).结论 血清中miRNA-15b和miRNA-34a的检测对ⅢB、Ⅳ期非小细胞肺癌患者的化疗疗效及病情评估具有重要的临床参考价值.     

肿瘤浸润淋巴细胞在食管癌组织中表达及与预后的关系

目的:研究食管癌组织中浸润的CD3+T、CD8+T、颗粒酶B(granzyme B,GrB)阳性T细胞和Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)表达情况及对预后的影响.方法:应用免疫组织化学法检测CD3、CD8、GrB和Foxp3在90例食管癌间质和癌巢中的表达,计数阳性细胞,应用Cox回归模型和Kaplan-Meier生存曲线分析其与患者预后的关系.结果:本组病例3年总生存率为66.67%(60/90).单因素生存分析表明,食管癌间质和癌巢中CD3+T、CD8+T细胞高表达组3年生存率高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);GrB+T细胞高表达组较低表达组有生存优势,但差异无统计学意义(P>0.05);Foxp3+Treg细胞高表达组生存率低于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05).Cox模型多因素分析表明,食管癌间质浸润的CD3+T、CD8+T 、Foxp3+Treg细胞数量、病变长度和TNM分期均是影响生存期的独立因素(均P<0.05) .结论: 间质浸润的CD3+T、CD8+T细胞增多时患者预后良好,Foxp3+Treg细胞数量增多则预后不良.     

CD8+T细胞和调节性T细胞在食管癌中表达及与预后的关系

目的 探讨食管癌组织中CD8+T细胞、Foxp3阳性调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)表达及对预后的影响.方法 应用免疫组织化学SP法检测CD8、Foxp3在90例食管癌组织间质、癌巢中的表达,计数阳性细胞,分析阳性细胞数目与预后的关系.结果 间质中CD8+T细胞的数量与浸润深度、分化程度呈负相关(P<0.05);Foxp3+Treg细胞数量与淋巴结转移、病变长度呈正相关(P<0.05).本组病例3年总生存率66.67%(60/90).单因素生存分析显示,无论癌巢或间质中,CD8+T细胞计数高者的总体生存曲线优于计数低者,差异有统计学意义(P<0.05);roxp3+Treg细胞计数高者的累计生存情况较计数低者差(P<0.05).多因素分析显示,间质浸润的CD8+T、Foxp3+Treg细胞数量和病变长度是影响生存期的独立因素(P<0.05).结论 间质中浸润的CD8+T细胞数量、Foxp3+Treg细胞数量是影响食管癌患者预后的独立因素,Foxp3+Treg细胞数量增多预后不良,CD8+T细胞数量增多则预后良好.