布洛芬通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控肝癌QGY-7703细胞迁移和侵袭的机制

目的 探讨布洛芬通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对肝癌QGY-7703细胞迁移和侵袭的调控机制。方法 取对数生长期人肝癌细胞QGY-7703,采用随机法分为两组,对照组（C组）：加入等容量的RPMI l640培养液;实验组（B组）：按照不同布洛芬浓度分为三个亚组：B1组250 μmol/L,B2组500 μmol/L、B3组1 000 μmol/L。各组分别作用24、48和72 h后,利用Transwell小室检测各组细胞的侵袭和迁移能力。各组分别作用48 h后,采用Real-time PCR检测各组细胞中PI3K、PTEN和MMP-9基因表达的变化;用Western blot检测各组细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、mTOR、磷酸化mTOR（p-mTOR）和MMP-9蛋白表达情况。结果 与C组比较,B1、B2、B3三组细胞迁移和侵袭能力均降低,具有浓度和时间的依赖性,差异有统计学意义（P<0.01）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞PTEN mRNA和PTEN蛋白表达明显升高,且随着布洛芬作用浓度的增加而升高,具有浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞PI3K mRNA、Akt和mTOR蛋白的表达量差异均无统计学意义（P>0.05）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞MMP-9 mRNA和蛋白的表达以及p-Akt、p-mTOR蛋白的表达均显著下降,且随着布洛芬作用浓度的增加而降低,具有良好的浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 布洛芬可以抑制QGY-7703细胞的迁移和侵袭能力,与布洛芬对细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控有关。     

吗啡对人食管癌细胞Ec109生长及p53、caspase-3基因表达的影响

目的 研究吗啡对人食管癌Ec109细胞生长及其可能的作用机制.方法 取对数生长期食管癌Ec109细胞,随机分为实验组和对照组,实验组按照吗啡不同作用浓度分为3个亚组:M1组(0.1 μmol/L)、M2组(10 μmol/L)、M3组(1000 μmol/L);对照组加入等容量的RPMI-1640培养基.各组分别作用24 h、48 h和72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;作用48 h后,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率,RT-PCR测定p53和caspase-3基因的表达.结果 与对照组比较,实验组M1组、M2组、M3组细胞增殖抑制率均显著升高(P＜0.01),且随吗啡浓度增加和时间延长,各实验组细胞增殖抑制率增加,呈时间和浓度依赖性(P＜0.01);各实验组细胞凋亡率和G1期细胞比例均明显升高(P＜0.05),且随吗啡作用浓度增加而升高明显,呈浓度依赖性(P＜0.05),各实验组细胞p53 mRNA和caspase-3 mRNA的表达量均显著升高(P＜0.05),且随吗啡作用浓度的增加而升高,呈浓度依赖性(P＜0.05).结论 吗啡可抑制食管癌Ec109细胞生长并促进其凋亡,其作用机制可能与促进p53和caspase-3基因表达有关.     

布洛芬调控IKKβ/IκBα/NF-κB信号通路对肝癌细胞株增殖及凋亡的影响

目的 探讨布洛芬调控IKKβ/IκBo/NF-κB信号通路对肝癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 选择人肝癌QGY-7703细胞为研究对象,采用随机数字表法将QGY-7703细胞随机分为对照组(Qc组)和不同浓度布洛芬组,每组6例:Q1组(布洛芬作用浓度为250 μmol/L)、Q2组(布洛芬作用浓度为500 μmol/L)、Q3组(布洛芬作用浓度为1 000 μmol/L)、Qc组加入等容量的RPMI-1640培养基.各组分别孵育24 h、48 h和72 h时,采用CCK-8法测定不同浓度及不同孵育时间细胞的增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况;孵育48 h时,采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中IKKβ和Bcl-2基因mRNA和蛋白的变化以及磷酸化IKKβ (p-IKKβ)、磷酸化IκBoα(p-IκBα)、NF-κBp65蛋白的表达情况.结果 与Qc组比较,Q1组、Q2组、Q3组细胞增殖抑制率及细胞凋亡率均增加,差异有统计学意义(P＜0.05);Q1组、Q2组、Q3组细胞增殖抑制率及细胞凋亡率依照布洛芬作用浓度和时间的增加而依次增加,具有浓度和时间依赖性,差异有统计学意义(P＜0.05);与Qc组比较,Q1组、Q2组、Q3组细胞IKKβ mRNA和Bcl-2 mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05);Q1组、Q2组、Q3组比较,细胞IKKβ mRNA和Bcl-2 mRNA表达依照布洛芬作用浓度的增加而依次下调,具有浓度依赖性,差异有统计学意义(P＜0.05);与Qc组比较,Q1组、Q2组、Q3组细胞IKKβ、Bcl-2、p-IKKβ、p-IκBα和NF-κBp65蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05);Q1组、Q2组、Q3组比较,细胞中IKKβ、Bcl-2、p-IKKβ、p-IκBα和NF-κBp65蛋白的表达依照布洛芬作用浓度的增加而依次降低,具有浓度依赖性,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 布洛芬可以抑制人肝癌QGY-7703细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能与布洛芬调控细胞IKKβ/IκBα/NF-κB信号通路有关.