膜联蛋白A1拟肽Ac2-26对心肺转流大鼠肺损伤的影响

目的 通过观察Ac2-26对心肺转流(CPB)大鼠肺功能、肺组织结构及丝裂原活化蛋白激酶p38/细胞核因子-κB（p38MAPK/NF-κB）表达影响。
方法 选择成年健康SD雄性大鼠18只,体重350～450 g。随机分成三组：假手术组（S组）、缺血-再灌注组（IR组）和膜联蛋白A1（AnxA1）拟肽Ac2-26组（AC组）,每组6只。S组做穿刺及开胸处理,不建立CPB;IR组建立CPB,10 min后开胸夹闭左肺门;AC组建立CPB,在CPB前10 min给予Ac2-26 1 mg/kg,10 min后开胸夹闭左肺门。分别在CPB前、开放左肺门时、停CPB 90 min时,记录大鼠HR、MAP,并取动脉血行血气分析,计算氧合指数（OI）、呼吸指数（RI）。停CPB 90 min时用ELISA法检测左肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）、支气管液肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-6（IL-6）和总蛋白含量,采用Western-blot法检测肺组织丝裂原活化蛋白激酶p38（p38MAPK）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（p-p38MAPK）、核因子-κBp65（NF-κBp65）、磷酸化核因子-κBp65（p-NF-κBp65）和AnxA1含量,取左肺组织行光镜检查和病理损伤评分。
结果 与S组比较,开放左肺门时、停CPB 90 min时IR组和AC组HR明显减慢,MAP、OI明显降低,RI明显升高（P<0.05）,停CPB 90 min时IR组和AC组TNF-α、IL-10、IL-6、总蛋白、p-p38MAPK、p-NF-κBp65、AnxA1含量明显升高（P<0.05）,病理损伤评分明显升高（P<0.05）。与IR组比较,停CPB 90 min时AC组HR明显增快,OI明显升高,RI明显降低（P<0.05）,TNF-α、IL-6、总蛋白、p-p38MAPK、p-NF-κBp65、AnxA1含量明显降低（P<0.05）,IL-10明显升高（P<0.05）,病理损伤评分明显降低（P<0.05）。
结论 膜联蛋白A1拟肽Ac2-26可抑制大鼠CPB后肺组织丝裂原活化蛋白激酶p38的活化,抑制核因子-κB的分泌,降低TNF-α和IL-6的含量,增加IL-10含量,减轻其肺损伤程度,减少炎性渗出,改善肺功能。     

糖尿病大鼠冠状动脉超氧阴离子生成部位的研究

目的探讨糖尿病大鼠高血糖状态下冠状动脉超氧阴离子(O2-)生成部位。方法用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型后取冠状动脉和在高糖下培养大鼠冠状动脉24 h,免疫荧光组织化学染色及激光扫描共聚焦显微镜检测冠状动脉中O2-生成部位。结果糖尿病大鼠冠状动脉内皮组织、外膜组织和平滑肌组织O1-生成量均较对照组升高,二者比较差异有统计学意义(t内=24．719,P<0．01;t外=14．206,P<0．01;t平:11．784, P<0．01)。高糖培养24 h,大鼠冠状动脉内皮组织O2-生成量比对照组升高,二者比较差异有统计学意义(t内= 2．183,P<0．05);外膜组织和平滑肌组织O2-生成量与对照组比较,差异无统计学意义(t外=1.439,P>0．05;t平= 1．662,P>0．05)。结论糖尿病短期高血糖状态下,O2-只产生于内皮细胞,长期高血糖状态下,O2-由内皮细胞经跨细胞转移转运到平滑肌细胞。     

心脏不停跳大鼠单肺体外循环肺损伤模型的建立

目的 建立心脏不停跳大鼠单肺体外循环（CPB）肺损伤模型,为研究CPB肺损伤的发病机制及保护措施提供实验平台。方法 健康成年SD大鼠24只,随机分为单纯开胸组（T组）、单纯CPB组（C组）和缺血再灌注组（IR组）,每组8只。T组仅开胸,C组开胸后建立CPB,IR组建立CPB期间行左肺缺血再灌注损伤。在CPB前（T1）、开放左肺门即刻（T2）及实验结束时（T3）行动脉血气分析,记录红细胞压积（Hct）、血乳酸（Lac）和肺功能的变化。实验结束时,检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量;剪取左肺组织,观察左肺组织的病理变化。结果 CPB后Hct下降（P?<0.05）。与T组比较,实验结束时C组和IR组肺功能下降,Lac和肺损伤评分较T组高（P?<0.05）;上述变化在IR组中最为突出。IR组中血液和肺组织的IL-1β、TNF-α含量最多（P?<0.05）。结论 该自创实验动物模型建立成功,能模拟临床CPB肺损伤的病理生理变化,对CPB肺保护相关研究有着积极的推动作用。     

尿多酸肽对高危组骨髓增生异常综合征细胞株p15INK4B基因的去甲基化作用

目的探讨尿多酸肽(CDA-2)对高危组骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株p15INK4B基因的去甲基化作用。方法检测不同浓度CDA-2作用下,MDS-RAEB细胞株MuTz-1的细胞存活率(MTT法);p15INK4B基因、甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA表达(RT-PCR);p15INK4B基因甲基化程度(甲基化特异PCR,MSP)。结果CDA-2呈剂量依赖性抑制MuTz-1细胞生长;伴随CDA-2剂量增加,p15INK4B基因甲基化程度逐渐减弱,其mRNA表达逐渐增加;且CDA-2可显著降低MuTz-1细胞中DNMT1和DNMT3BmRNA的表达。结论CDA-2可能通过下调DNMT1和DNMT3BmRNA表达使p15INK4B基因甲基化程度下降,恢复其在细胞周期中的调节作用,进而抑制MDS细胞的过度增殖。     

《天然药物化学》教学实践策略的探讨

顺应素质教育的要求,构建以学生为主体的学习模式,加强学生自学能力的培养,促进学生创新精神、创新能力的提高。在建立适合新教育观念的教学模式基础上,配套建立了以培养学生自主学习能力,强化实践教学为平台的教学方法。     

糖尿病大鼠冠状小动脉超氧阴离子产生量的观察

目的探讨糖尿病大鼠高糖状态下冠状小动脉超氧阴离子(O2-)产生量,阐明高糖状态对O2-产生的影响。方法用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型,通过手术显微镜及显微手术器械分离大鼠冠状动脉,冷冻切片制备部分标本,用免疫荧光技术测定糖尿病及正常大鼠冠状动脉O2-产生量。结果糖尿病模型组大鼠冠状动脉O2-产生量与正常对照组大鼠及模型组预先加入自由基清除剂组相比明显增加;冷冻切片冠状动脉横切面荧光染色结果表明糖尿病大鼠高糖状态下血管平滑肌与内皮O2-产生均增多。结论高糖能刺激冠状小动脉产生过量的O2-,参与糖尿病状态下的氧化应激,可能与糖尿病微血管并发症密切联系。     

高糖培养下大鼠冠状小动脉氧自由基生成部位的研究

目的 探讨高糖培养下大鼠冠状小动脉超氧阴离子(O-·2)的生成部位.方法 显微镜下大鼠冠状小动脉的分离;DMEM(高糖)培养大鼠冠状小动脉;应用免疫荧光组织化学染色及激光扫描共聚焦显微镜检测O-·2生成部位.结果 高糖组大鼠冠状小动脉内皮组织O-·2生成量比正常组增高,外膜组织、平滑肌组织O-·2生成量与正常组无差别.结论 高糖培养下大鼠冠状小动脉O-·2只产生于内皮细胞.     

链脲佐菌素致大鼠高血糖模型的实验研究

目的 探讨链脲佐菌素(streptozocin,STZ) 所致Wistar大鼠高血糖稳定模型的最佳实验条件.方法 应用STZ腹腔注射制备大鼠高血糖模型,计算成模率和死亡率.结果 采用一次给药法,分为不同剂量组(40mg/kg;50mg/kg;60mg/kg),其中50mg/kg剂量组成模率较好.采用两次给药法,第一次给予10mg/kg,隔1天分别给予以下剂量(40mg/kg,50mg/kg,60mg/kg),其中第一次10mg/kg,第二次50mg/kg剂量组成模率最高.两次给药法相对应剂量组成模率比一次给药法高.日照时间对成模率及死亡率均有影响.日照时间短,成模率明显降低,而且死亡率明显增高.结论 用STZ制备糖尿病模型是一种稳定可靠的方法.实验选取雄性Wistar大鼠体重190～220g,在日照时间充足的条件下饲养.给药方式采取两步给药法,剂量为10mg/kg,隔1天给予50mg/kg,其成模率最高.     

急性白血病患者WT1基因表达水平及其临床意义

目的：探讨WT1基因与急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）患者预后的关系及其用于微小残留病（MRD）监测的可能性。方法收集58例初发AML、32例初发ALL、40例AML-完全缓解（CR）、28例ALL-CR患者及31例同期三系增生活跃患者（对照组）骨髓单个核细胞,利用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测WT1基因的表达,建立WT1基因在各组间的表达阈值,以WT1拷贝数／ABL拷贝数×100%表示WT1基因的相对表达量。结果初发AML患者与对照组间WT1基因中位相对表达量差异有统计学意义[20.880%（3.550%～48.500%）比0.026%（0～0.240%）,Z＝-7.74,P＜0.0001]。AML-CR患者[0.102%（0～5.380%）]与初发AML患者间WT1基因中位相对表达量差异有统计学意义（Z＝-8.34,P＜0.0001）。此外,WT1基因表达高于阈值（20.880%）的AML患者第1个疗程CR率为60.7%（17／28）,而表达低的患者为76.7%（23／30）。AML患者复发时WT1表达升高。与对照组相比,初发ALL患者WT1基因中位相对表达量[0.350%（0.021%～10.780%）]升高（Z＝-2.58,P＜0.05）,但与ALL-CR患者[0.038%（0～2.800%）]相比,WT1基因中位相对表达量差异无统计学意义（P＝0.065）。结论 WT1基因在AML中的表达相对较高,其可能成为AML患者预后评估及MRD监测的有效指标,但并不适用于ALL患者。