人胆囊类器官培养体系的建立与鉴定

目的 构建人胆囊类器官的培养体系,实现人胆囊类器官体外稳定快速扩增,并鉴定其特性。方法 分离人来源胆囊组织上皮细胞,运用三维培养体系将细胞嵌入基质胶中进行3D培养。观察胆囊类器官生长过程中球囊样结构的面积、周长与形态,计算形状因子。利用细胞免疫荧光染色技术检测胆囊类器官的干性标志物CD133、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)以及胆管上皮细胞标志物肝细胞核因子1β(HNF1β)、上皮细胞黏附分子（Ep CAM）、细胞角蛋白7、细胞角蛋白19、性别决定区Y框9(SOX9)的表达情况。使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brd U）摄入实验检测小分子CHIR-99021和blebbistatin对类器官增殖特性的影响。结果 胆囊类器官在体外培养过程中,类器官形成的球囊面积逐渐增大,第7天的类器官面积与第1天比较差异有统计学意义（P<0.01）,第7天时其形状因子从第1天的0.80(0.75,0.84)增高至0.83(0.81,0.85)(P<0.01),表明类器官在体外稳定生长且形状逐渐趋于一个完美的圆。免疫荧光染色可见类器官表达胆管上皮细胞标志物。在培养基中加入小分子CH...     

移植细胞实现肝脏有效再殖的机制研究

细胞移植是目前代替原位肝移植治疗终末期肝脏疾病最具可行性的方法。然而由于细胞来源、移植细胞植入受体肝脏效率低、增殖缓慢等问题，极大地限制了细胞移植治疗方式在临床上的广泛应用。近年来，通过人为修饰改变移植细胞和宿主肝脏微环境和肝细胞的特性，使得移植细胞再殖肝脏取得了实质性的进展。本文主要综述目前已经成功实现肝脏再殖的研究成果，并探讨移植细胞在不同动物模型中再殖肝脏的潜在机制。     

医学细胞生物学实验教学改革初探

细胞生物学是医学教育的一门基础性课程,是开启医学生涯的敲门砖。培养符合新时代发展需求的高素质医学人才,要求医学生具有良好的细胞生物学基础。文章探讨了医学本科生细胞生物学实验教学的现状,创新教学模式、优化考核方式、完善课程设置和充分利用现代化教学设备,以期提高教学质量,加强对学生自主创新能力和科研素质的培养。     

下调SIRT6对肝癌干细胞干性维持的抑制作用

摘 要：［目的］ 探讨抑制SIRT6表达在肝癌干细胞干性维持中的作用及潜在机制。［方法］ 在不同肝癌细胞系中构建肝癌干细胞模型（Lv-Pnanog-GFP），利用流式细胞术分选出不同来源的肝癌干细胞，采用蛋白免疫印迹（Western blot，WB）和免疫细胞化学（immunocytochemistry，ICC）技术检测SIRT6蛋白在肝癌干细胞中的表达水平；构建SIRT6慢病毒短发卡RNA感染载体（shSIRT6）感染肝癌干细胞，采用WB技术检测shSIRT6的干扰效率；采用实时定量反转录聚合酶链反应（real-time PCR）检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的干性基因（Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44）mRNA的表达水平，ICC方法检测EpCAM蛋白的表达水平；采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）试剂盒和细胞增殖活力（CCK8）试剂盒检测抑制SIRT6表达后肝癌干细胞的增殖能力；采用克隆形成和成球实验检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的自我更新能力；利用衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）试剂盒检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的衰老水平。［结果］ WB和ICC检测结果显示，Nanog阳性肝癌干细胞中SIRT6表达水平明显高于Nanog阴性肝癌细胞；real-time PCR检测结果显示，抑制SIRT6后，肝癌干细胞的干性基因（Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44）mRNA表达水平降低。与real-time PCR结果一致，ICC结果也表明，抑制SIRT6后，干性标志物EpCAM的蛋白表达水平降低（P<0.01）。细胞增殖检测结果进一步显示，抑制SIRT6，肝癌干细胞的增殖水平降低（P<0.05）。克隆形成实验和细胞成球实验结果显示，抑制SIRT6导致肝癌干细胞的克隆形成能力和成球能力一致性降低（P<0.01）。SA-β-Gal活性检测结果显示，抑制SIRT6后，肝癌干细胞的SA-β-Gal活性显著性提高（P<0.01）。［结论］肝癌干细胞高表达SIRT6，通过抑制SIRT6表达可诱导肝癌干细胞发生衰老，导致其干性标志物表达水平下降，增殖能力降低，肝癌干细胞克隆形成和成球能力下降。     

应用中药外敷治疗小儿肺炎后期临床观察与护理

小儿肺炎后期迁延不愈的治疗，临床上常采用肺部理疗及继续使用抗生素等，往往效果不佳，我院儿科自2002年来，采用跌打丸和醋外敷治疗肺炎后期的患儿，收到了良好的效果，现将76例临床应用情况报告如下。     

案例教学在高校细胞工程授课中的应用

细胞工程旨在通过相关理论让学生掌握如何科学改造细胞以获取目的产物,注重培养学生的科研思维、解决问题的能力和实践操作。在以往授课过程中,教师发现多数学生对课程相关领域的知识储备有限。文章介绍了案例教学在细胞工程中的具体实施方案与授课效果,通过围绕“诱导型多能干细胞的获取与应用”这一主题,安排课前资料查阅、课堂回答讨论、教师答疑与总结等模块完成授课,最后通过问卷调查、成绩评测分析教学效果。新的教学模式激起了学生的学习热情,锻炼了学生的探索能力,培养了专业思维素养,并延续了学生对所学专业的兴趣。今后,教师可通过凝练专业知识结合拓展具体应用,继续在该课程中开展案例教学。     

细胞骨架中微丝观察实验的优化探索

以细胞内微丝束的观察来体现细胞骨架知识体系是生物医学本科层次开设的实验必修项目之一。文章以细胞骨架重要功能特点-支撑和维持细胞形态为出发,对细胞进行细胞松弛素B处理和恢复并结合两种染色方法来分析细胞的形态与细胞骨架间的关系。该实验的优化,有助于学生理解细胞骨架功能,取得了较好的教学效果。     

二联用药治疗消化性溃疡

目前 ,消化性溃疡一般均采用三联疗法 :枸橼酸铋钾、阿莫西林和甲硝唑 ;或庆大霉素、呋喃唑酮和甲硝唑。疗效显著 ,但伴有很多副作用 ,如消化系统不适和对肾的损伤。笔者 1996年8月～ 1998年 8月采用阿莫西林、思密达 ,联合治疗幽门螺杆菌(Ｈｐ)相关性消化性溃疡 ,疗效报道如下。1　资料与方法1.1　临床资料　消化性溃疡患者 2 0例 (十二指肠溃疡 14例 ) ,男 11例 ,女 9例 ,年龄 5～ 46岁 ,平均 2 7.7岁 ,病程 1～ 10ａ。均经武汉同济医院或武汉大学人民医院胃镜确诊为十二指肠或胃溃疡 ,经快速尿素酶试验和ＬＯＳ银染法检测Ｈｐ阳性[1 ] 。…     

GDF15因子在代谢、衰老和炎症相关疾病中的作用

GDF15蛋白是TGF-β超家族的成员,在多种组织中都表达。但是生理条件下其表达水平较低,而随着衰老的发生、运动或压力的刺激,GDF15蛋白的表达水平明显增加。GDF15主要通过其唯一报道受体GFRAL促进细胞内脂肪酸β氧化和脂质分解缓解脂肪肝等的发展,同时也降低机体的食物摄入量从而抑制肥胖。而衰老过程中,GDF15主要作为炎症因子,调控衰老和纤维化相关疾病的发生。然而,GDF15是血液循环因子,其作用的靶细胞广泛,通过不同信号传导作用引起细胞发生多种效应。本文主要通过概述GDF15蛋白的结构以及其在生理和病理条件下参与的调控作用,为临床上以GDF15为靶点的疾病治疗提供理论依据。