β-丙内酯在Vero细胞HFRS疫苗中的应用

目的 探讨β-丙内酯灭活双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗的最佳条件。方法 采用不同终浓度的β-丙内酯和不同的灭活时间对疫苗进行灭活，用细胞培养法进行病毒增殖试验，以确定灭活效果。应用高效液相色谱法分析β-丙内酯的最佳水解条件和3批双价Vero细胞出血热纯化灭活疫苗β-丙内酯残留虽。检测3批双价纯比灭活疫苗的免疫效果。结果 疫苗经终浓度为1：2000和1：4000的β-丙内酯作用24h，均可完全灭活病毒；疫苗中的β-丙内酯在37℃水浴下，随着水解时间的延长，其含量逐渐下降，水解2h后已无β-丙内酯检出；3批经β-丙内酯灭活的双价Vero细胞出血热纯化疫苗均未检出β-丙内酯残留，在家兔体内诱导产生针对汉滩型和汉城型病毒的中和抗体效价均达到1：20。结论 肾综合征出血热纯化疫苗经终浓度为1：4000β-丙内酪4℃灭活24h，然后再于37℃水浴中水解2h，既可达到完全灭活病毒且无β-丙内酯残留的目的；采用此方法灭活的双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗保持良好的免疫原性。     

IL-2重组痘苗病毒修饰的肿瘤细胞破碎物局部应用后的抗肿瘤作用研究

细胞因子基因转染的瘤苗在体内具有明显的抗肿瘤作用,但逆转录病毒载体转染的肿瘤细胞作为瘤苗在制备及保存上仍然存在不足。本文采用编码人IL-2基因的重组痘苗病毒载体(rVV-IL-2)转染B16-F10小鼠黑色素瘤细胞,经超声破碎及高速离心,制成IL-2基因转染的肿瘤细胞破碎物(IL-2VBO),以此作为瘤苗,局部注射治疗荷瘤小鼠,结果明显抑制了小鼠肿瘤的生长,延长其存活期,外周血淋巴细胞对B16-F10细胞的杀伤活性明显增高,而对YAC-1细胞的杀伤活性则增加不明显,表明IL--2VBO诱导了机体对B16-F10特异性的免疫功能。由于IL-2VBO制备方便,易于保存,同时由于痘苗病毒本身可加强诱导出的免疫反应,因此可望作为一种新的瘤苗应用于肿瘤的主动性免疫治疗。     

重组人内皮细胞生成抑制因子-Endostation的表达和纯化

目的:利用Pichia pastoris菌株高效表达重组人内皮细胞生长抑制因子(rh-Endostatin),并将其纯化至均质。方法:将构建的菌种Pichia pastoris X33/pLW202扩增后接种至发酵培养基中,诱导表达后收获上清,将上清浓缩后经亲合层析、凝胶层析后得到高纯度rh-Endostatin。结果:从发酵上清中可得到60mg/L高纯度的rh-Endostatin,经HPLC检测纯度达98％以上。结论:在Pichia pastoris表达系统中,实现了rh-Endostatin的高效分泌性表达。     

恒河猴作为肾综合征出血热动物模型的研究简报

关于肾综合征出血热(HFRS)发病机理和临床治疗所急需的动物模型的研究,国内外学者虽作了多年的努力,但一直未得到较为理想的结果。本研究用7只8个月到18个月的恒河猴进行实验,采用钴60-γ射线照射的予处理方法使猴机体免疫力低下,再接种HFRS病毒,以期使之出现某些类似临床病人的症状,旨在建立可供研究本病发病和免疫机制及防治用的动物     

血管内皮细胞生长抑制剂-Endostatin的研究进展

近年来的基础及临床研究表明肿瘤形成、生长、浸润及转移的关键是肿瘤血管化。肿瘤生长需要血液提供氧气和营养 ,没有新血管生成 ,肿瘤维持微小状态不会对人体产生生命危险〔1〕。体内的新血管生成是由许多刺激因子和抑制因子控制的 ,它们与内皮细胞受体结合起调控作用〔2 ,3〕。抑制肿瘤的新血管生成对治疗肿瘤很重要〔4〕。目前已发现几种血管生成抑制剂在实验室肿瘤模型中有很强的治疗作用。美国的Ｅｎｔｒｅｍｅｄ公司其主推药物Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ因其显著的抗肿瘤血管生成作用 ,已成为世界各国科学家和临床医生关注的焦点。1　Ｅｎ…     

IL2激活的PBL治疗晚期肺癌病人的疗效观察

近年来,许多学者采用LAK(淋巴因子激活的杀伤)细胞对各种肿瘤病人进行了过继性免疫治疗,取得了一定的疗效。目前临床常用大量的患者自身外周血淋巴细胞做为LAK前体细胞,因其提取方法复杂,对患者有很多危险性,难以在临床推广应用。为解决LAK细胞来源问题,近年来许多学者研究了同种LAK细胞临床应用的可行性.我们采用正常人外周血淋巴细胞(PBL)做为同种LAK前体细胞,经重组白细胞介素—2(rIL—2)激活后,治疗了晚期肺癌病人,现将结果报告如下。     

环磷酰胺处理猕猴建立HFRS动物模型

目前在正常机体状况下是难以找到致HFRS病模型的。本研究设计了一种人工干预方法,用经环磷酰胺预处理后的猕猴感染HFRSV,结果发生感染,引起病毒血症,产生抗体应答,并表现出了某些类似HFRS病人的症状。主要有肾脏损伤出现的蛋白尿、管型尿、氮血症、血钾增高和毛细血管中毒症状,伴有红细胞和血色素降低及血小板下降,在白细胞分类中出现了异形淋巴等血象改变,而且实验组4只感染猕猴中1只合并脑内出血等导致死亡,1只出现了后肢麻痹等神经症状。这种方法虽然人为地增加了干预因素,但动物出现了感染、发病,表现类似于人类HFRS,复制出了致病动物模型,为HFRS临床治疗、药物筛选提供了可选择的实验动物。     

血管内皮抑制素对小鼠肉瘤的抑制作用

肿瘤细胞具有血管形成依赖性〔1〕,而实体瘤的持续生长和侵袭转移有赖于充足的微血管生成和血液供应营养〔2～ 4〕,因此 ,抑制肿瘤血管的的生成可作为治疗癌症的一种手段〔5〕。Oreilly于 1994年从荷瘤鼠尿液及血清中分离到一种特异抑制肿瘤血管及转移灶生长的多肽肿瘤血管生长因子 (Endo statin) 〔6〕。我国从人肝脏cDNA文库中筛选克隆到该基因 ,在酵母菌中表达出可溶性人Endostatin〔7〕。这种物质在体外特异抑制内皮细胞的生长。本文对我所研制的Endostatin进行抑制小鼠S180肉瘤生长的试验研究。初步探讨其作用机制。材料与方法　 (…     

单克隆抗体的免疫测定技术

抗血清是多克隆性的不均一抗体,单克隆抗体则与其相反,它的化学和免疫学性状是均一的,对一种抗原决定簇有很高的特异性.而且可以长期连续获得同一单克隆抗体(McAb).下面介绍应用McAb设计的新免疫测定技术.一、双侧同时结合法(Simultaneoustwo Site):双侧结合法(夹心法)一般是被检材料(包括被检抗原)和固相抗体及标记抗体的反应分两阶段进行.用针对抗原上不同的抗原决定簇的两种McAb同时与     

东北三省部分地区人血清恙虫病立克次体抗体调查

自１９９２～１９９４年发现辽宁、吉林、黑龙江三省存在恙虫病自然疫源地之后,了解恙虫病流行范围,则是恙虫病工作者关注的问题。１９９７年以来,在东北三省的２７个市、县进行了血清学调查,加上前几年的调查,共３８个市、县,阳性的市、县２８个,给出了一个东北三...