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1.
体外诱导脐血单核细胞向破骨样细胞的分化 总被引:1,自引:0,他引:1
背景:正畸牙齿移动的基础是牙周组织的改建,其中破骨细胞性骨吸收是牙齿移动的第一步,应力作用下有关破骨细胞分化和功能成熟的信号转导通路,以及牙周膜细胞和破骨细胞之间的关系是目前国内外研究的热点之一.目的:拟建立人破骨样细胞体外培养的简便方法,观察骨吸收刺激因子对破骨样细胞分化、增殖和功能的影响.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-10/2008-05在西安交大口腔医院中心实验室完成.材料:脐带血来源于非高危妊娠的健康产妇,新鲜牛股骨由西安交通大学动物实验中心提供,用于制备100~200μm厚的骨片,1α,25-(OH)2D3、巨噬细胞集落刺激因子、前列腺素E2等骨吸收刺激因子均为Sigma公司产品.方法:无菌条件下收集脐带血,Ficoll液分离后吸取呈云雾状的白膜层,离心弃上清,加入α-MEM培养液重悬,调整脐血单核细胞浓度为1×109L-1,接种于预置盖玻片和骨片的24孔培养板中,1.0 mL/孔,设立空白对照组、10-8mol/L及107mol/L1α,25-(OH)2D3组、巨噬细胞集落刺激因子组、1α,25-(OH)2D3+前列腺素E2组,培养7d.主要观察指标:倒置显微镜观察细胞生长形态,TRAP染色法观察破骨样细胞的形成,甲苯胺蓝色观察骨吸收陷窝情况,以TRAP染色(+)、细胞核≥2个的细胞为破骨样细胞进行计数.结果:培养3d后,空白对照组细胞形态及数量无明显变化,各诱导组单核细胞出现融合趋势;7d时空白对照组出现少量的破骨样细胞,核的数目2~3个,各诱导组可见大量多核破骨样细胞,核的数日3~20个不等.诱导后光镜下可见胞浆呈红色、胞核呈淡黄色的TRAP(+)破骨样细胞,尤其是108mol/L 1α,25-(oH)2D3组可见含14个核的强阳性破骨样细胞,且胞体较大.各组均尚未形成骨吸收陷窝.与空白对照组比较,各诱导组破骨样细胞数量均明显增多(F=9.78,P<0.01);与10-8mol/L1α,25-(OH)2D3组比较,107mol/L1α,25-(OH)2D3组破骨样细胞数量无明显变化(P>0.05),巨噬细胞集落刺激因子组及1α,25-(OH)2D3+前列腺素E2组破骨样细胞数量均明显减少(F=7.46,P<0.01).结论:脐血单核细胞经骨吸收刺激因子体外诱导培养后,可分化为TRAP(+)的多核破骨样细胞,其中10-8mol/L 1α,25-(OH)2D具有最强的生物学效应. 相似文献
2.
目的 探讨内镜超声对早期胃食管癌内镜可切除性的评估价值.方法 观察经EUS检查后,并在之后2周内通过内镜黏膜切除术或内镜黏膜下剥离术术后病理证实的早期胃食管癌共65例,比较EUS和病理检查对病变浸润深度的判断.结果超声内镜诊断早期癌浸润深度的总准确性达93.8%(61/65),对病变内镜可切除性的评估总准确率为89.2%.结论超声内镜可较准确地评估早期胃食管癌的内镜可切除性. 相似文献
3.
为解决传统口腔组织病理学实验教学中存在的问题,提高实验教学效果,提出了基于微课的翻转课堂教学模式,并将其应用于口腔病理实验教学中,最后对教学效果进行评估、分析以及总结。指出基于微课的翻转课堂教学模式有利于培养学生独立思考和解决具体问题的临床思维能力,是提升口腔组织病理学实验教学效果的一种有效方法。 相似文献
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5.
患者男,49岁,因"胸骨后疼痛4d"于2012年12月29日收入我院消化科.患者12月24日误食鱼刺,强行吞咽饭团后感胸骨后疼痛明显伴胸闷.4d后由外院转至我院急诊,查胸部CT示:食管中上段条状高密度异物,左侧尖端突破食管壁,紧邻主动脉弓,与主动脉壁分界不清(图1).拟"食管异物"收入消化科.29日凌晨在全麻下行内镜下食管异物取出术,手术顺利,于食管距门齿26 cm处取出长约5 cm的两端尖锐的鱼刺一根(图2),食管见溃疡灶,表面渗血,无穿孔. 相似文献
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8.
碘伏作为一种新型广谱高效消毒剂,近年来在临床上得到了广泛应用。尤其对口腔内各种细菌,不管是厌氧菌或需氧菌,都有强烈的杀菌或抑菌作用,在临床应用中取得了满意效果。现将我们3年来的应用体会介绍如下。l临床资料与方法1.l药物来源。采用含碘浓度为3000ppm的碘伏(齐齐哈尔卫防消毒剂厂生产)。以碘伏原液为100%,用蒸馏水将其稀释为12.5%和25%备用。1.2病例选择。选择200例临床上需作根管治疗的牙齿200颗。其中:牙髓炎86颗,根尖周炎叨颗,残髓炎历颗,牙折8颗,前牙23颗,磨牙105颗,双尖牙五颗。回.3方法。200例患者按就… 相似文献
9.
体外诱导脐血单核细胞向破骨样细胞的分化 总被引:1,自引:0,他引:1
背景:正畸牙齿移动的基础是牙周组织的改建,其中破骨细胞性骨吸收是牙齿移动的第一步,应力作用下有关破骨细胞分化和功能成熟的信号转导通路,以及牙周膜细胞和破骨细胞之间的关系是目前国内外研究的热点之一。
目的:拟建立人破骨样细胞体外培养的简便方法,观察骨吸收刺激因子对破骨样细胞分化、增殖和功能的影响。
设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-10/2008-05在西安交大口腔医院中心实验室完成。
材料:脐带血来源于非高危妊娠的健康产妇,新鲜牛股骨由西安交通大学动物实验中心提供,用于制备100~200 μm厚的骨片, 1α,25-(OH)2D3、巨噬细胞集落刺激因子、前列腺素E2等骨吸收刺激因子均为Sigma公司产品。
方法:无菌条件下收集脐带血,Ficoll液分离后吸取呈云雾状的白膜层,离心弃上清,加入α-MEM培养液重悬,调整脐血单核细胞浓度为1×109 L-1,接种于预置盖玻片和骨片的24孔培养板中,1.0 mL/孔,设立空白对照组、10-8 mol/L及10-7 mol/L 1α,25-(OH)2D3组、巨噬细胞集落刺激因子组、1α,25-(OH)2D3+前列腺素E2组,培养7 d。
主要观察指标:倒置显微镜观察细胞生长形态,TRAP染色法观察破骨样细胞的形成,甲苯胺蓝染色观察骨吸收陷窝情况,以TRAP染色(+)、细胞核≥2个的细胞为破骨样细胞进行计数。
结果:培养3 d后,空白对照组细胞形态及数量无明显变化,各诱导组单核细胞出现融合趋势;7 d时空白对照组出现少量的破骨样细胞,核的数目2~3个,各诱导组可见大量多核破骨样细胞,核的数目3~20个不等。诱导后光镜下可见胞浆呈红色、胞核呈淡黄色的TRAP(+)破骨样细胞,尤其是 10-8 mol/L 1α,25-(OH)2D3组可见含14个核的强阳性破骨样细胞,且胞体较大。各组均尚未形成骨吸收陷窝。与空白对照组比较,各诱导组破骨样细胞数量均明显增多(F=9.78,P < 0.01);与10-8 mol/L 1α,25-(OH)2D3组比较,10-7 mol/L 1α,25-(OH)2D3组破骨样细胞数量无明显变化(P > 0.05),巨噬细胞集落刺激因子组及1α,25-(OH)2D3+前列腺素E2组破骨样细胞数量均明显减少(F=7.46,P < 0.01)。
结论:脐血单核细胞经骨吸收刺激因子体外诱导培养后,可分化为TRAP(+)的多核破骨样细胞,其中10-8 mol/L 1α,25-(OH)2D¬具有最强的生物学效应。 相似文献
10.
目的:拟构建一种牙周膜牙囊复合细胞膜片,并比较其与单一膜片的性能差异,以期寻找一种更加优越的牙周缺损修复材料。方法:将第三代牙周膜干细胞及牙囊干细胞直接混合共同培养,将牙周膜牙囊混合细胞、牙周膜干细胞及牙囊干细胞分别制备成细胞膜片,应用HE染色,扫描电镜比较三种膜片形态学差异,应用茜素红染色,RT—PCR比较三种膜片成骨能力差异。结果:扫描电镜结果显示,牙囊牙周膜混合细胞膜片分泌更多的细胞外基质。HE染色结果也显示牙囊牙周膜混合细胞膜片细胞层数更多,基质分泌量更大。同时,牙囊牙周膜混合细胞膜片AIJP、Runx2、OCN表达显著高于单一细胞膜片。成骨诱导21天后,茜素红染色结果显示,与单一细胞膜片相比,牙囊牙周膜混合细胞膜片染色更深。结论:牙周膜牙囊复合细胞膜片较单一细胞膜片,细胞层数更多,基质分泌量更大,骨向分化能力更强,为牙周再生提供了新的思路。 相似文献