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高效毛细管电泳法检测尿液中痕量纤维蛋白肽A、B 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立高效毛细管电泳测定尿液中反应体内微血栓形成的特异分子标志物纤维蛋白肽A(FPA)和纤维蛋白肽B(FPB)的方法.方法 采用25 cm×50 μm涂层毛细管柱,0.1 mol/L pH2.5的磷酸缓冲液,27.58 kPa压力进样,190nm紫外检测.用比FPB多一个酪氨酸的合成肽(FPB-Tyr)作内标,加内标后的尿样用Sep-Pak C18柱预处理.结果 采用本法,尿样中的FPA、FPB和内标可在16min内得到很好的分离,三者的迁移时间分别为:7.28、14.31、15.22min;将内标和一系列浓度的FPA、FPB标准品加入空白尿样,用Sep-Pak C18柱预处理后,毛细管电泳进样分析,在FPA和FPB浓度为0-40 mg/L的范围内,用FPA(FPB)同内标的校正峰面积比值对添加的相应的FPA(FPB)浓度得到校正工作曲线,线性关系良好,R均>0.99.未预处理的尿样中FPA、FPB的最低检出浓度分别为30μg/L、40μg/L(信噪比为3:1);本法FPA和FPB测定的日内、日间精密度好,平均回收率高.结论 本方法可靠,特异性好,可为开展纤维蛋白肽类及其它的痕量肽类分析提供参考. 相似文献
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DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
拟从细胞凋亡角度出发,探讨能够诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的因素,为有效地防治该恶性肿瘤提供新的思路。方法:光镜下观察细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例;DNA凝胶电泳及二苯胺法测定DNA片段化程度。结果:一定浓度的拓朴异构酶Ⅰ(Topoiso-meraseⅠ,TOPOⅠ)抑制剂喜树碱(Camptothecin,CPT)体外作用于人低分化鼻咽癌上皮细胞系CNE-2Z细胞一定时间后,镜下可见细胞体积缩小,染色质凝聚,胞膜突起及凋亡小体形成等形态变化。2~10μmol/L的CPT分别作用12小时后作流式细胞仪检测,亚二倍体比例均为30%左右;各浓度分别作用24小时,亚二倍体比例均为50%左右;同时细胞周期有明显的变化,主要表现为G2/M期细胞减少。DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的梯形带。结论:拓朴异构酶Ⅰ抑制剂CPT对人低分化鼻咽癌上皮细胞具有明显的凋亡诱导作用。 相似文献
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目的分析纤维蛋白原(Fg)β-148 C/T基因多态性与性别、年龄、吸烟等因素对血浆Fg水平的影响.方法用PCR-RFLP的方法分析基因多态性,比浊法测定血浆Fg水平.结果病例组血浆Fg水平明显高于对照组(P<0.01),两组的T1a基因频率分布差异无显著性(P>0.05).男女两性的血浆Fg水平比较差异无显著性(P>0.05);两性中T-148基因携带者血浆Fg水平均比CC基因型者明显升高((P<0.05).在T-14携带者中,血浆Fg水平随年龄增长而升高(P<0.05);吸烟组Fg水平高于不吸烟与戒烟组(P<0.05).结论Fgβ-148 C/T基因多态性与血浆Fg水平相关,T-1a基因携带者更易受年龄、吸烟等因素影响使血浆Fg水平升高.提示Fgβ-148 C/T基因多态性可作为血栓性疾病的遗传易感标志之一. 相似文献
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β—纤维蛋白原—455G/A基因多态性对缺血性心脏病患者血浆纤维蛋白原水平的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨β-纤维蛋白原-455G/A(β-Fg-455G/A)基因多态性与环境因素对血浆Fg表达的调节机制及与缺血性心脏病(IHD)发病的关系.方法应用PCR及限制性内切酶分析的方法,分析75例IHD及156例对照者β-Fg-455 G/A基因多态现象,比浊法测定血浆Fg水平.结果病例组血浆Fg水平明显高于对照组(P<0.01).无论男、女患者与对照,A基因携带者血浆Fg水平比同组GG基因型者明显升高(P<0.05).对照组中的A基因携带者与病例组中的GG基因型者,随增龄血浆Fg水平有明显升高(P<0.05).IHD患者男性,按吸烟及基因型情况分组,相同基因型时,吸烟组血浆Fg水平高于不吸烟与戒烟组(P<0.05).病例组A基因频率明显高于对照组(P<0.005).结论β-Fg-455 G/A等位基因与血浆Fg水平相关,A基因携带者IHD发病率更高.提示β-Fg-455 G/A可作为IHD的遗传易感标志之一用于易感人群的检测. 相似文献
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