骨形态发生蛋白9抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭和迁移

目的 探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭、迁移能力的影响.方法 RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞系中BMP9的表达;扩增高滴度的BMP9表达腺病毒,感染MDA-MB-231细胞,制备高表达BMP9的重组MDA-MB-231/BMP9细胞,以此作为实验组;同时以含GFP的窄载腺病毒感染该细胞为MDA-MB-231/GFP,联合空白MDA-MB-231共同作为对照组;通过平板集落形成实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测重组MDA-MB-231/BMP9细胞侵袭及迁移能力.结果 与对照组细胞相比,实验组细胞中BMP9 mRNA表达水平明显增高;实验组细胞集落形成率由对照的90.6%±2.5%与85.6%±3.5%显著下降至57.3%±4.5%(P＜0.05);实验组划痕愈合率由对照的95.4%±3.1%与92.5%±2.4%下降至74.0%±3.6%(P＜0.05);实验组穿膜细胞数由对照的(255.3±16.1)个与(267.3±14.9)个下降至(150.3±14.6)个(P＜0.05).结论 BMP9可以在体外抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭与迁移.     

骨形态发生蛋白9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的作用研究

目的:研究骨形态发生蛋白9(Bone morphogenetic protein9,BMP9)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、周期及凋亡的影响.方法:半定量RT-PCR法检测高转移性乳腺癌细胞MDA-MB-231和低转移性乳腺癌细胞MCF-7中BMP9的表达,用人BMP9重组腺病毒(AdBMP9)感染MDA-MB-231细胞作为实验组,含GFP的空载腺病毒(AdGFP)感染MDA-MB-231细胞作为对照组,MIT法观察细胞增殖的变化,流式细胞仪分析周期及凋亡的变化.结果:半定量RT-PCR显示,乳腺癌细胞MDA-MB-231中未检测到BMP9mRNA的表达;MTT结果显示,AdBMP9处理可引起MDA-MB-231细胞增殖抑制,第5 dMDA-MB-231/BMP9组的细胞增殖率(0.8860±0.0532)显著低于MDA-MB-231/GFP组(1.2240±0.1031)(P＜0.05);流式细胞仪分析结果显示,腺病毒感染后第2d和第3d,MDA-MB-231/BMP9组细胞周期各相发生变化,G2/M期细胞明显增加,分别为MDA-MB-231/GFP组的3.2倍和2.4倍(P＜0.05);同时BMP9可诱发细胞凋亡,腺病毒感染后第3dMDA-MB-231/BMP9组细胞凋亡百分率(31.55%±8.26%)明显高于MDA-MB-231/GFP组(3.80%±0.46%)(P＜0.05).结论:提示BMP9可通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞凋亡来抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖.     

骨形态发生蛋白9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein9,BMP9)在体内、外对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。方法:将pAdtrack-CMV/BMP9和pAdtrack-CMV/GFP腺病毒感染MDA-MB-231细胞,RT-PCR法检测MDA-MB-231/GFP和MDA-MB-231/BMP9细胞中BMP9mRNA的表达,MTT法、平板集落形成实验和FCM法检测细胞增殖和凋亡的情况。建立裸鼠MDA-MB-231、MDA-MB-231/GFP和MDA-MB-231/BMP9移植瘤模型,测量移植瘤体积,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果:MDA-MB-231和MDA-MB-231/GFP细胞中无BMP9mRNA的表达,MDA-MB-231/BMP9细胞中有明显BMP9mRNA表达;MDA-MB-231/BMP9细胞增殖抑制率高于MDA-MB-231/GFP细胞(P<0.05),而细胞集落形成率明显低于MDA-MB-231/GFP和MDA-MB-231组(P<0.05),细胞凋亡率则明显高于MDA-MB-231/GFP和MDA-MB-231组(P<0.05)。MDA-MB-231/BMP9组的裸鼠移植瘤体积明显小于MDA-MB-231/GFP和MDA-MB-231组(P<0.001),而移植瘤细胞中的凋亡指数则明显高于MDA-MB-231/GFP和MDA-MB-231组(P<0.001)。结论:BMP9可在体内、外抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖并促进其凋亡。     

乳腺癌患者血浆D-二聚体水平与临床病理特征的关系

目的：分析不同临床病理特征的乳腺癌患者血浆D-二聚体（ D-D）水平的差异,探讨血浆D-D检测在乳腺癌病情监测及预后判断中的应用价值。方法选择资料保存完整的乳腺癌患者189例,其中接受外科手术治疗者129例,接受全身辅助治疗者60例。所有患者经治疗6～8个月后复诊时,完全缓解（CR）53例、部分缓解（PR）47例、疾病稳定（SD）48例、疾病进展（PD）41例。分别于治疗前、治疗后14 d、治疗后6～8个月复诊时,采用酶联免疫荧光法检测静脉血血浆D-D水平。比较不同年龄、乳腺癌病理类型、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移、雌激素受体（ ER）表达、孕激素受体（ PR）表达、人类表皮生长因子受体-2（ HER-2）表达、手术治疗前后、全身辅助治疗前后及不同临床疗效（ CR、PR、SD、PD）患者的血浆D-D水平。结果 TNM分期Ⅲ、Ⅳ期者血浆D-D水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者,肿瘤直径≥5 cm者血浆D-D水平高于肿瘤直径＜5 cm者,有淋巴结转移者血浆D-D水平高于未转移者,手术治疗后血浆D-D水平低于治疗前,全身辅助治疗后血浆D-D水平低于治疗前（ P均＜0．05）。临床疗效为CR、PR者治疗后血浆D-D水平低于治疗前,PD者治疗后血浆D-D水平高于治疗前（P均＜0．05）,SD者治疗前后血浆D-D水平差异无统计学意义。结论血浆D-D水平与乳腺癌患者的TNM分期、肿瘤直径、淋巴结转移及预后有关,手术及全身辅助治疗可降低血浆D-D水平。     

肿瘤抗体药物偶联物的研发进展和挑战

抗体药物偶联物（antibody-drug conjugate,ADC）是通过连接子将抗体和小分子载荷药物进行连接,利用抗体作为载体将小分子载荷毒素靶向运输至目标细胞的新型药物。随着国内首款ADC药物维迪西妥单抗的上市,ADC药物的临床应用日益广泛。截至2022年2月,临床试验网站www.ClinicalTrial.gov显示有1 685项注册临床试验正在开展。目前,全球共批准14款ADC药物上市,其中美国获批12款,日本和中国各1款。随着对ADC药物作用机制的理解加深和新药研发技术的不断突破,促使构成此类药物的抗体、载荷毒素、连接子及偶联技术均有飞速的发展。但是,ADC药物还存在诸多问题和挑战,如发展新型载荷毒素、降低异质性、保证均一性和稳定性等。为了更好地理解ADC药物的性质,本文就该类药物的技术进展进行综述。